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Análise da expressão das enzimas desubiquitinadoras 5, 14 e 16 durante o ciclo de vida do Schistosoma mansoni.

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2007
Autor(a) principal: Vieira, Helaine Graziele Santos
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
dARK ID: ark:/61566/0013000006c8q
Idioma: por
Instituição de defesa: Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2611
Resumo: O Schistosoma mansoni apresenta um ciclo biológico bastante peculiar, no qual diversas alterações bioquímicas e morfológicas ocorrem no verme. Estas mudanças são adaptações evolutivas encontradas pelo parasito para sobreviver nos distintos ambientes. Acredita-se que estas adaptações são promovidas por um conjunto de genes expressos coordenadamente nos seis estágios de vida do parasito, sendo de extrema importância a identificação destes genes para elabor vacinas e novas drogas. Neste contexto, as vias de modificações pós-traducional de proteínas como a ubiquitina devem ser atuantes em vários processos celulares no parasito. A ubiquitina se liga covalentemente a proteína alvo, através de uma ligação isopeptídica entre o resíduo de glicina (Gly 76) da ubiquitina, localizado na região C-terminal e o resíduo de lisina (Lys) do grupo amino da proteína a ser ubiquitinada. Esse processo é reversível, sendo regulado pelas enzimas chamadas desubiquitinadoras (DUBs). As DUBs são cisteíno proteases que clivam a ligação isopeptídica existente entre as ubiquitinas que formam a cadeia poliubiquitinada, mantendo o pool de Ub intracelular livre e processam a préproteína dando origem a forma madura da Ub. No presente trabalho, objetivamos validar as análises in silico das DUB’s 5, 14 e 16 em S. mansoni e avaliar o padrão de expressão destas enzimas em cercárias, esquistossômulos obtidos in vitro nos tempos de 3 horas, 18,5 horas; 24 horas, 3 dias, em verme adulto e ovos. A expressão comparada das DUB’s 5, 14 e 16 mostra que elas são mais expressas nas fases cercária, verme adulto e ovo, do que nos diferentes estágios de esquistossômulos estudados, confirmando resultados encontrados anteriormente em que foi verificada a atividade DUB total nas fases de esquistossômulos menor comparada às demais fases. Este padrão de expressão também corrobora com os resultados obtido por nosso grupo de pesquisa onde foi observada a presença de conjugados ubiquitinados em todas as fases de S. mansoni, com uma abundância predominante durante as diferentes culturas de esquistossômulos (3h, 4h, 8h, 18h, 24h, 3 dias, 5 dias, 8 dias e 10 dias). Estes dados juntamente com os resultados obtidos sugerem que a ocorrência de ciclos de ubiquitinação/desubiquitinação podem estar envolvidos em processos celulares críticos durante um ciclo biológico completo do S. mansoni.
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A ubiquitina se liga covalentemente a proteína alvo, através de uma ligação isopeptídica entre o resíduo de glicina (Gly 76) da ubiquitina, localizado na região C-terminal e o resíduo de lisina (Lys) do grupo amino da proteína a ser ubiquitinada. Esse processo é reversível, sendo regulado pelas enzimas chamadas desubiquitinadoras (DUBs). As DUBs são cisteíno proteases que clivam a ligação isopeptídica existente entre as ubiquitinas que formam a cadeia poliubiquitinada, mantendo o pool de Ub intracelular livre e processam a préproteína dando origem a forma madura da Ub. No presente trabalho, objetivamos validar as análises in silico das DUB’s 5, 14 e 16 em S. mansoni e avaliar o padrão de expressão destas enzimas em cercárias, esquistossômulos obtidos in vitro nos tempos de 3 horas, 18,5 horas; 24 horas, 3 dias, em verme adulto e ovos. A expressão comparada das DUB’s 5, 14 e 16 mostra que elas são mais expressas nas fases cercária, verme adulto e ovo, do que nos diferentes estágios de esquistossômulos estudados, confirmando resultados encontrados anteriormente em que foi verificada a atividade DUB total nas fases de esquistossômulos menor comparada às demais fases. Este padrão de expressão também corrobora com os resultados obtido por nosso grupo de pesquisa onde foi observada a presença de conjugados ubiquitinados em todas as fases de S. mansoni, com uma abundância predominante durante as diferentes culturas de esquistossômulos (3h, 4h, 8h, 18h, 24h, 3 dias, 5 dias, 8 dias e 10 dias). Estes dados juntamente com os resultados obtidos sugerem que a ocorrência de ciclos de ubiquitinação/desubiquitinação podem estar envolvidos em processos celulares críticos durante um ciclo biológico completo do S. mansoni.Schistosoma mansoni presents a peculiar life cycle, in which several morphologic and biochemical alterations occur in different phases of development. These changes are evolutive adaptations found by the parasite to survive in distinct environments. These adaptations are promoted by a set of genes expressed coordinately in the six life periods of the parasite, being a target to elaboration of vaccines and new drugs. In this context, the post-transductional modifications of proteins, as ubiquitination, must be operating in some crucial cellular processes in the parasite. Ubiquitin (Ub) binds to target protein covalently, through an isopeptide linkage between the C-terminal glicina residue (Gly 76) of Ub and the amino group of Lysine (Lys). The reversible process of ubiquitination is the deubiquitination. DUBs (deubiquitin enzymes) are cystein proteases that specifically cleave off Ub from Ub-protein conjugates, Ub precursors and Ub adducts. In the present work, our objective was to validate the in silico analyses of DUB's 5, 14 and 16 in S. mansoni and evaluate the expression patterns of these enzymes in cercariae, in vitro schistosomulum obtained by times of 3 hours, 18,5 hours; 24 hours, 3 days, in adult worms and eggs. The comparative expression patterns of DUB' s 5, 14 and 16 shown that they are more expressed in cercariae, adult worm and egg phases, and in basal level in different periods of in vitro cultivate schistosomulum. Our results corroborate the low total DUB activity in phases of schistosomulum when compared with the other phases. This expression pattern also corroborates with the results obtained by our group, where the presence of ubiquitin conjugates was observed in all the phases of S. mansoni, with a relative abundance during the different culture times of schistosomulum (3h, 4h, 8h, 18h, 24h, 3 days, 5 days, 8 days and 10 days). These data suggest that the occurrence of ubiquitinating/deubiquitinating cycles can be involved in critical cellular processes during the full biological S. mansoni life cyclePrograma de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.Cota, Renata Guerra de SáVieira, Helaine Graziele Santos2013-03-25T14:37:58Z2013-03-25T14:37:58Z2007info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfVIEIRA, H. G. S. Análise da expressão das enzimas desubiquitinadoras 5, 14 e 16 durante o ciclo de vida do Schistosoma mansoni. 2007. 67 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2007.http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2611ark:/61566/0013000006c8qporreponame:Repositório Institucional da UFOPinstname:Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)instacron:UFOPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2024-11-10T17:27:47Zoai:repositorio.ufop.br:123456789/2611Repositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.ufop.br/oai/requestrepositorio@ufop.edu.bropendoar:32332024-11-10T17:27:47Repositório Institucional da UFOP - Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)false
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