Desenvolvimento de um multiplex RT-PCR para detecção simultanea dos virus dengue, zika e chikungunya
Ano de defesa: | 2022 |
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Tipo de documento: | Dissertação |
Tipo de acesso: | Acesso aberto |
Idioma: | por |
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Palavras-chave em Português: | |
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Resumo: | No Brasil, com a co-circulação dos vírus dengue, zika e chikungunya e a similaridade entre os sinais e sintomas que acomete esses pacientes, torna-se difícil apenas o diagnóstico baseado nos critérios clínicos. Portanto, faz-se necessário o desenvolvimento de técnicas de diagnóstico diferencial que sejam capazes de detectar essas doenças de forma mais rápida, menos onerosa e com alta sensibilidade e especificidade. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi desenvolver e validar uma técnica de diagnóstico através de um multiplex RT-PCR para dengue, zika e chikungunya (T-RT-PCR DZC) em uma única reação. Para isso fez-se uso de primers para dengue, zika e chikungunya desenhados no laboratório. A validação do multiplex RT-PCR foi feita utilizando amostras de soro de indivíduos que apresentavam quadro febril agudo indiferenciado com duração entre 1 e 7 dias. E a validação do T-RT-PCR DZC foi realizada com 33 amostras, utilizando primers da literatura para dengue, zika e chikungunya e apresentou 100% de sensibilidade e 100% de especificidade. Concluímos, que o T-RT-PCR DZC apresentou bom desempenho, sendo capaz de fazer a diferenciação entre os vírus dengue, zika e chikungunya, com um menor tempo e com 100% sensibilidade e especificidade. Palavras-chave: Triplex-RT-PCR; SFA; DENV; ZIKV; CHIKV. |
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Desenvolvimento de um multiplex RT-PCR para detecção simultanea dos virus dengue, zika e chikungunyaDengueZika vírusChikungunyaNo Brasil, com a co-circulação dos vírus dengue, zika e chikungunya e a similaridade entre os sinais e sintomas que acomete esses pacientes, torna-se difícil apenas o diagnóstico baseado nos critérios clínicos. Portanto, faz-se necessário o desenvolvimento de técnicas de diagnóstico diferencial que sejam capazes de detectar essas doenças de forma mais rápida, menos onerosa e com alta sensibilidade e especificidade. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi desenvolver e validar uma técnica de diagnóstico através de um multiplex RT-PCR para dengue, zika e chikungunya (T-RT-PCR DZC) em uma única reação. Para isso fez-se uso de primers para dengue, zika e chikungunya desenhados no laboratório. A validação do multiplex RT-PCR foi feita utilizando amostras de soro de indivíduos que apresentavam quadro febril agudo indiferenciado com duração entre 1 e 7 dias. E a validação do T-RT-PCR DZC foi realizada com 33 amostras, utilizando primers da literatura para dengue, zika e chikungunya e apresentou 100% de sensibilidade e 100% de especificidade. Concluímos, que o T-RT-PCR DZC apresentou bom desempenho, sendo capaz de fazer a diferenciação entre os vírus dengue, zika e chikungunya, com um menor tempo e com 100% sensibilidade e especificidade. Palavras-chave: Triplex-RT-PCR; SFA; DENV; ZIKV; CHIKV.The co-circulation of the dengue, zika, and chikungunya viruses in Brazil and the similarity of the signs and symptoms that afflict these individuals, making a diagnosis based on clinical criteria alone is challenging. As a result, it's critical to create differential diagnosis tools that can diagnose these diseases more rapidly, at a lower cost, and with a high level of sensitivity and specificity. This study aimed to develop and evaluate a diagnostic approach for dengue, zika, and chikungunya (T-RT-PCR DZC) in a single reaction using a multiplex RT-PCR. Primers for dengue, zika, and chikungunya were created in the laboratory. Serum samples from participants who experienced an undifferentiated acute fever that lasted between 1 and 7 days were used to validate multiplex RT-PCR. The T-RT-PCR DZC was validated with 33 samples, utilizing primers from the literature for dengue, zika, and chikungunya, and showed 100 percent sensitivity and specificity. We conclude that the T-RT-PCR DZC performed remarkably, distinguishing between dengue, zika, and chikungunya viruses in less time and with 100% sensitivity and specificity. Keywords: Triplex-RT-PCR; SFAI; DENV; ZIKV; CHIKV.Dissertação enviada com autorização e certificação via CI 90385/22 em 23/12/2022Lima, Danielle MaltaRolim, Dionne BezerraMaranhão, Sarah Sant¿AnnaUniversidade de Fortaleza. Programa de Pós-Graduação em Ciências MédicasSantiago, Léo2022info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf47f.https://biblioteca.sophia.com.br/terminalri/9575/acervo/detalhe/129114https://uol.unifor.br/auth-sophia/exibicao/27761porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNIFORinstname:Universidade de Fortaleza (UNIFOR)instacron:UNIFORinfo:eu-repo/semantics/openAccess2024-06-19T11:43:09Zoai::129114Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttps://www.unifor.br/bdtdONGhttp://dspace.unifor.br/oai/requestbib@unifor.br||bib@unifor.bropendoar:2024-06-19T11:43:09Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNIFOR - Universidade de Fortaleza (UNIFOR)false |
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