Purificação e caracterização de uma protease com atividade colagenolítica proveniente de tichoderma koningiopsis (UFPIT03), isolado do ecótono caatinga-cerrado piauiense, obtida através de fermentação em estado sólido utilizando farelo de pritchardia pacifica
| Ano de defesa: | 2025 |
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| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
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Universidade Federal de Pernambuco
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| Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pos Graduacao em Biologia Aplicada a Saude
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Não Informado pela instituição
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| País: |
Brasil
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Resumo: | As proteases colagenolíticas possuem a capacidade de hidrolisar colágeno nativo e desnaturado, sendo amplamente utilizadas em diversos segmentos biotecnológicos e biomédicos. Dentre essas enzimas, as colagenases microbianas destacam-se por sua diversidade bioquímica e alta susceptibilidade à manipulação genética, com os gêneros Streptomyces e Trichoderma apresentando vantagens significativas devido à termoestabilidade e elevado rendimento. Este trabalho visou a purificação e caracterização de uma colagenase obtida de Trichoderma isolado do Ecótono Caatinga-Cerrado Piauiense, aliada ao desenvolvimento de um biofilme cicatrizante inovador formulado à base de um blend polissacarídico com nanopartículas de prata e hidrolisado de colágeno. A produção enzimática foi realizada por fermentação em estado sólido, utilizando farelo de frutos de Pritchardia pacifica como substrato agroindustrial, evidenciando o potencial sustentável do processo. A enzima foi purificada por cromatografia de troca iônica aniônica em DEAE-Sephadex-50, apresentando temperatura ótima de 45°C, pH ótimo de 7,5 e estabilidade em diferentes condições de pH. Paralelamente, o biofilme foi desenvolvido utilizando quitosana e galactomanana (extraída de Cassia grandis) como matriz base. A formulação inclui bioativos obtidos de um processo de hidrólise enzimática envolvendo colágeno bovino Tipo IV e colagenase, associados a nanopartículas de prata sintetizadas por método verde. O biofilme resultante é biocompatível, biodegradável, hidrofílico e apresenta ação antibacteriana, além de potencial hipoalergênico, favorecendo a aceleração do processo cicatricial. Este produto apresenta aplicação promissora como curativo tópico de feridas e suporte para sistemas de liberação de drogas, reforçando o aproveitamento de recursos naturais e resíduos agroindustriais. O estudo destaca a integração de processos biotecnológicos e biomédicos, contribuindo para o fortalecimento da sustentabilidade e da inovação em saúde, indústria cosmética e biomateriais. |
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BARREIRO, Maria Ercilia Limahttp://lattes.cnpq.br/1378111835815532http://lattes.cnpq.br/1797280118220965COSTA, Romero Marcos Pedrosa Brandão2025-08-28T12:42:16Z2025-08-28T12:42:16Z2025-02-24BARREIRO, Maria Ercília Lima. Purificação e caracterização de uma protease com atividade colagenolítica proveniente de trichoderma koningiopsis (UFPIT03), isolado do ecótono caatinga-cerrado piauiense, obtida através de fermentação em estado sólido utilizando farelo de pritchardia pacifica. Tese (Doutorado em Biologia Aplicada à Saude) - Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2025.https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/65538As proteases colagenolíticas possuem a capacidade de hidrolisar colágeno nativo e desnaturado, sendo amplamente utilizadas em diversos segmentos biotecnológicos e biomédicos. Dentre essas enzimas, as colagenases microbianas destacam-se por sua diversidade bioquímica e alta susceptibilidade à manipulação genética, com os gêneros Streptomyces e Trichoderma apresentando vantagens significativas devido à termoestabilidade e elevado rendimento. Este trabalho visou a purificação e caracterização de uma colagenase obtida de Trichoderma isolado do Ecótono Caatinga-Cerrado Piauiense, aliada ao desenvolvimento de um biofilme cicatrizante inovador formulado à base de um blend polissacarídico com nanopartículas de prata e hidrolisado de colágeno. A produção enzimática foi realizada por fermentação em estado sólido, utilizando farelo de frutos de Pritchardia pacifica como substrato agroindustrial, evidenciando o potencial sustentável do processo. A enzima foi purificada por cromatografia de troca iônica aniônica em DEAE-Sephadex-50, apresentando temperatura ótima de 45°C, pH ótimo de 7,5 e estabilidade em diferentes condições de pH. 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O estudo destaca a integração de processos biotecnológicos e biomédicos, contribuindo para o fortalecimento da sustentabilidade e da inovação em saúde, indústria cosmética e biomateriais.Collagenolytic proteases have the ability to hydrolyze both native and denatured collagen and are becoming increasingly important commercially. Collagenases produced by microorganisms are preferable to those produced by mammals or plants because of the biochemical diversity and susceptibility to genetic manipulation that their sources possess. The genera Streptomyces and Trichoderma have a great advantage among microorganisms that produce collagenolytic enzymes, since their genetic engineering has demonstrated great abilities in synthesizing these types of proteases, presenting characteristics of thermostability and higher yield. Collagenases have been described in their use in several biotechnology and biomedical segments, involving areas such as: medicinal, pharmaceutical, food, cosmetic and textile. The present study aimed to purify and characterize an enzyme with collagenolytic activity from Trichoderma isolated from the Caatinga-Cerrado-Piauiense ́s Ecotone and to develop a patented utility model from a healing biofilm product formulated based on a polysaccharide blend associated with silver nanoparticles with collagen hydrolysate. For the purification process, the enzyme production occurred by solid-state fermentation using Pritchardia pacifica fruit bran as an agroindustrial substrate, highlighting its sustainable biotechnological potential. The enzyme was purified by anionic ion exchange chromatography in DEAE-Sephadex, presenting ideal functional properties with an optimum temperature of 45°C, optimum pH of 7.5 and stability in different pH conditions. These results demonstrate the efficiency of the fermentation process using agroindustrial waste and the prospects for application in areas such as health, cosmetics industry and biomaterials, strengthening the valorization of regional natural resources.porUniversidade Federal de PernambucoPrograma de Pos Graduacao em Biologia Aplicada a SaudeUFPEBrasilhttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessTrichodermaColagenaseBiofilme cicatrizantePurificação e caracterização de uma protease com atividade colagenolítica proveniente de tichoderma koningiopsis (UFPIT03), isolado do ecótono caatinga-cerrado piauiense, obtida através de fermentação em estado sólido utilizando farelo de pritchardia pacificainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisdoutoradoreponame:Repositório Institucional da UFPEinstname:Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)instacron:UFPEORIGINALTESE Maria Ercilia Lima Barreiro.pdfTESE Maria Ercilia Lima Barreiro.pdfapplication/pdf1647348https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/65538/1/TESE%20Maria%20Ercilia%20Lima%20Barreiro.pdf97c781ad4e9457355101792419e3652fMD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82362https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/65538/2/license.txt5e89a1613ddc8510c6576f4b23a78973MD52TEXTTESE Maria Ercilia Lima Barreiro.pdf.txtTESE Maria Ercilia Lima Barreiro.pdf.txtExtracted texttext/plain151058https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/65538/3/TESE%20Maria%20Ercilia%20Lima%20Barreiro.pdf.txt7568cd26e88f1806abbc57934f1b2470MD53THUMBNAILTESE Maria Ercilia Lima Barreiro.pdf.jpgTESE Maria Ercilia Lima Barreiro.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1211https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/65538/4/TESE%20Maria%20Ercilia%20Lima%20Barreiro.pdf.jpg45302d50a565038feb78e17eb8a5a09bMD54123456789/655382025-08-31 15:10:37.044oai:repositorio.ufpe.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufpe.br/oai/requestattena@ufpe.bropendoar:22212025-08-31T18:10:37Repositório Institucional da UFPE - Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)false |
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