Adenosina trifosfato (ATP) na criopreservação de sêmen suíno
Ano de defesa: | 2017 |
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Tipo de documento: | Dissertação |
Tipo de acesso: | Acesso aberto |
Idioma: | por |
Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Pelotas
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Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-Graduação em Veterinária
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Departamento: |
Faculdade de Veterinária
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País: |
Brasil
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Palavras-chave em Português: | |
Área do conhecimento CNPq: | |
Link de acesso: | http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/4638 |
Resumo: | O espermatozoide suíno é uma célula metabolicamente ativa, que necessita de aporte energético, na forma de adenosina trifosfato (ATP), para manter sua homeostase. A partir da hidrólise do ATP em adenosina monofosfato, é sinalizada a atividade motora para o movimento flagelar. Contudo, quando o espermatozoide da espécie suína é submetido a processos tecnológicos de conservação de sêmen, como a criopreservação, há gastos energéticos acima do normalmente esperado, com perdas na concentração de células viáveis, promovendo baixa motilidade espermática diminuindo sua qualidade seminal. Estruturas celulares como, membrana plasmática, mitocôndria e acrossoma podem ser afetadas negativamente pelas crioinjurias que sofrem as células devido aos processos de congelamento/descongelamento da criopreservação.O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da adição de ATP exógeno, em diferentes concentrações, no diluente de congelamento de sêmen suíno, através da análise de cinética e estruturas celulares. O estudo foi realizado a partir de 23 amostras de doses inseminantes de ejaculados suíno ((n=23), provenientes de uma central de inseminação. Na metodologia da criopreservação foram utilizados diluentes de resfriamento, Lactose-11% (80%) e gema de ovo (20%), e de congelamento com 89,5% do DR + 1,5% Equex-Paste® e 9% de Glicerol. No diluente de congelamento foi adicionado o ATP exógeno (Adenosine5’-triphosphate disodiumsalthydrate -Sigma-Aldrich®) nas concentrações T1 (C), T2 (0,025mM), T3 (0,25mM), T4 (2,5mM) e T5 (25,0 mM). As palhetas obtiveram um volume total de 0,5mL em cada com concentração de 500x106 espermatozoides. Foram descongeladas em banhomaria (37°C) e realizada a leitura da cinética no sistema CASA (Computer Assisted Sperm Analysis Sperm Vision 3.5) em três tempos, e as estruturas celulares pelo Citometro de fluxo (Attune® Cytometer). Os resultados apresentaram-se variados, porém, ficou evidenciado que o tratamento com 0,25mM de ATP foi o mais satisfatório no descongelamento (tempo zero) para a cinética espermática (motilidade total e progressiva), enquanto que o tratamento com 25mM foi o que apresentou menor desempenho, porém este, obteve um resultado melhor nos tempos de uma e 2 horas após o descongelamento. |
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Contudo, quando o espermatozoide da espécie suína é submetido a processos tecnológicos de conservação de sêmen, como a criopreservação, há gastos energéticos acima do normalmente esperado, com perdas na concentração de células viáveis, promovendo baixa motilidade espermática diminuindo sua qualidade seminal. Estruturas celulares como, membrana plasmática, mitocôndria e acrossoma podem ser afetadas negativamente pelas crioinjurias que sofrem as células devido aos processos de congelamento/descongelamento da criopreservação.O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da adição de ATP exógeno, em diferentes concentrações, no diluente de congelamento de sêmen suíno, através da análise de cinética e estruturas celulares. O estudo foi realizado a partir de 23 amostras de doses inseminantes de ejaculados suíno ((n=23), provenientes de uma central de inseminação. Na metodologia da criopreservação foram utilizados diluentes de resfriamento, Lactose-11% (80%) e gema de ovo (20%), e de congelamento com 89,5% do DR + 1,5% Equex-Paste® e 9% de Glicerol. No diluente de congelamento foi adicionado o ATP exógeno (Adenosine5’-triphosphate disodiumsalthydrate -Sigma-Aldrich®) nas concentrações T1 (C), T2 (0,025mM), T3 (0,25mM), T4 (2,5mM) e T5 (25,0 mM). As palhetas obtiveram um volume total de 0,5mL em cada com concentração de 500x106 espermatozoides. Foram descongeladas em banhomaria (37°C) e realizada a leitura da cinética no sistema CASA (Computer Assisted Sperm Analysis Sperm Vision 3.5) em três tempos, e as estruturas celulares pelo Citometro de fluxo (Attune® Cytometer). Os resultados apresentaram-se variados, porém, ficou evidenciado que o tratamento com 0,25mM de ATP foi o mais satisfatório no descongelamento (tempo zero) para a cinética espermática (motilidade total e progressiva), enquanto que o tratamento com 25mM foi o que apresentou menor desempenho, porém este, obteve um resultado melhor nos tempos de uma e 2 horas após o descongelamento.Pig spermatozoa is a metabolically active cell, which requires energy input, in the form of adenosine triphosphate (ATP), to maintain its homeostasis. From the hydrolysis of ATP in adenosine monophosphate, motor activity is signaled for flagellar movement. However, when the spermatozoa of the swine species are subjected to technological processes of semen conservation, such as cryopreservation, there are energy expenditures above the normally expected, with losses in the concentration of viable cells, promoting low sperm motility reducing their seminal quality. Cellular structures such as plasma membrane, mitochondria, and acrosome may be negatively affected by the cryoinjurias that undergo the cells due to the freeze / thaw processes of cryopreservation. The objective of this study was to evaluate the effects of the addition of exogenous ATP, in different concentrations, in the swine semen freezing diluent, through kinetic analysis and cellular structures. In the cryopreservation methodology, diluents of cooling, Lactose-11% (80%) and egg yolk were used. The study was performed from 23 samples of inseminating doses of porcine ejaculates (n = 23) from an insemination center. (20%) and freezing with 89.5% of DR + 1.5% Equex-Paste® and 9% Glycerol. In the freezing diluent, exogenous ATP (Adenosine 5'-triphosphate disodiumsalthydrate - Sigma-Aldrich (0.25 mM), T4 (2.5 mM) and T5 (25.0 mM). The vals obtained a total volume of 0.5 mL each Concentration of 500x106 spermatozoa, were thawed in a water bath (37 °C) and the kinetics were read in the three-phase Computer Assisted Sperm Analysis (SpermVision 3.5) system and the cell structures by the Flow Cytometer (Attune® Cytometer) The results were varied, however, it was evidenced that the treatment with 0.25 mM of ATP was the most satisfactory (Total time and progressive motility), while the treatment with 25mM was the one that presented the lowest performance, but this one, obtained a better result in the times of one and two hours after the thawing.Sem bolsaporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em VeterináriaUFPelBrasilFaculdade de VeterináriaCNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIAVeterináriaSuínosReproduçãoATPEspermatozóidesSemenPorcosSpermFreezingSwineCriopreservaçãoAdenosina trifosfato (ATP) na criopreservação de sêmen suínoAdenosine triphosphate (ATP) in the cryopreservation of swine semeninfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELTEXTdissertacao_lucia_pereira_dias.pdf.txtdissertacao_lucia_pereira_dias.pdf.txtExtracted texttext/plain73870http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/4638/6/dissertacao_lucia_pereira_dias.pdf.txt909b3f936a8069fb18f7104c71dff6d6MD56open accessTHUMBNAILdissertacao_lucia_pereira_dias.pdf.jpgdissertacao_lucia_pereira_dias.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1178http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/4638/7/dissertacao_lucia_pereira_dias.pdf.jpga4cbdd5a7dbbe5b016d91823112f8ff1MD57open accessORIGINALdissertacao_lucia_pereira_dias.pdfdissertacao_lucia_pereira_dias.pdfapplication/pdf525744http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/4638/1/dissertacao_lucia_pereira_dias.pdfa977151dc3f14f974f90bf4a414ecf5aMD51open accessCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; 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