Nanoresveratrol diminuiu EROs e LPO e aumenta motilidade progressiva em espermatozoides bovinos descongelados

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2019
Autor(a) principal: Cruzeiro, Pedro Sica
Orientador(a): Collares, Tiago Veiras
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Pelotas
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/handle/prefix/18307
Resumo: A criopreservação de sêmen vem sendo cada vez mais utilizada tanto para estudos científicos quanto aplicação prática. Este sistema apresenta algumas problemáticas as quais busca-se uma melhor compreensão e resolução de maneira prática, isto pode se dar com a utilização de compostos os quais podem driblar e combater possíveis mecanismos danosos às células. O resveratrol é um composto polifenólico com atividade antioxidante, anti-inflamatória e antitumoral, ainda assim, o seu consumo ajuda na prevenção de doenças cardíacas, diabetes e obesidade. Visando uma melhor entrega e melhor absorção, o resveratrol foi nanoencapsulado e testado em células espermáticas criopreservadas, tanto em sua forma nano (LNC-Res) como em sua forma livre (Res), nas concentrações de 5, 25, 50, 100, 200 e 400μM. Após descongelamento, os espermatozoides foram incubados por 15 e 60 minutos, posteriormente sendo analisados seus parâmetros como: de integridade de membrana, fragmentação de DNA, reação acrossomal, funcionalidade de mitocôndria, espécies reativas de oxigênio (ROS) e peroxidação lipídica (LPO). As análises foram realizadas em citometria de fluxo e análises cinéticas no sistema CASA, onde foram observadas as motilidades total e progressiva. Assim sendo, os resultados obtidos demonstraram que nas análises de integridade de membrana, após 60 min houve uma redução nos níveis de membranas intactas nas concentrações de 25, 50, 100, 200 e 400μM. Na análise de fragmentação de DNA não foi detectado nenhuma diferença estatística em relação ao controle, o que vai ao encontro com os resultados obtidos na análise de LPO e ROS onde ambas demonstraram uma diminuição em 15 min e nas análises de ROS uma diferença estatística entre todos tratamentos e o controle. Já a funcionalidade das mitocôndrias observou-se diferença estatística entre LNC-Res nas concentrações de 50 e 100μM quando comparada com 400μM de Res após 60 minutos. Com estes resultados, pode se constatar que o resveratrol não induziu toxicidade às células espermáticas bovinas e foi observado que este composto em sua forma nanoencapsulada estimulou a maquinaria antioxidante intracelular gerando uma proteção para a elas. Neste sentido, o LNC-Res pode vir a se tornar uma promissora forma farmacêutica para o fármaco em questão.
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spelling 2025-10-28T09:22:56Z2025-10-28T09:22:56Z2019-02-27Cruzeiro, Pedro Sica. Nanoresveratrol diminuiu EROs e LPO e aumenta motilidade progressiva em espermatozoides bovinos descongelados. 2019. 56 f. Dissertação (Mestrado) – Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Centro de Desenvolvimento Tecnológico, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2019.http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/handle/prefix/18307A criopreservação de sêmen vem sendo cada vez mais utilizada tanto para estudos científicos quanto aplicação prática. Este sistema apresenta algumas problemáticas as quais busca-se uma melhor compreensão e resolução de maneira prática, isto pode se dar com a utilização de compostos os quais podem driblar e combater possíveis mecanismos danosos às células. O resveratrol é um composto polifenólico com atividade antioxidante, anti-inflamatória e antitumoral, ainda assim, o seu consumo ajuda na prevenção de doenças cardíacas, diabetes e obesidade. Visando uma melhor entrega e melhor absorção, o resveratrol foi nanoencapsulado e testado em células espermáticas criopreservadas, tanto em sua forma nano (LNC-Res) como em sua forma livre (Res), nas concentrações de 5, 25, 50, 100, 200 e 400μM. Após descongelamento, os espermatozoides foram incubados por 15 e 60 minutos, posteriormente sendo analisados seus parâmetros como: de integridade de membrana, fragmentação de DNA, reação acrossomal, funcionalidade de mitocôndria, espécies reativas de oxigênio (ROS) e peroxidação lipídica (LPO). As análises foram realizadas em citometria de fluxo e análises cinéticas no sistema CASA, onde foram observadas as motilidades total e progressiva. Assim sendo, os resultados obtidos demonstraram que nas análises de integridade de membrana, após 60 min houve uma redução nos níveis de membranas intactas nas concentrações de 25, 50, 100, 200 e 400μM. 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This system presents some problems which seek a better understanding and resolution in a practical way, this can be with the use of compounds which can dribble and combat possible damaging mechanisms to the cells. Resveratrol is a polyphenolic compound with antioxidant, anti-inflammatory and anti-tumor activity, yet its consumption helps prevent heart disease, diabetes and obesity. In order to improve delivery and better absorption, resveratrol was nanoencapsulated and tested in cryopreserved sperm cells, both in its nano form (LNC-Res) and its free form (Res), at concentrations of 5, 25, 50, 100, 200 and 400μM. After thawing, spermatozoa were incubated for 15 and 60 minutes, after which their parameters were analyzed: membrane integrity, DNA fragmentation, acrosomal reaction, mitochondrial functionality, reactive oxygen species (ROS) and lipid peroxidation (LPO). The analyzes were performed in flow cytometry and kinetic analyzes in the CASA system, where the total and progressive motilities were observed. Therefore, the results showed that in the membrane integrity analyzes, after 60 min there was a reduction in the intact membrane levels at the concentrations of 25, 50, 100, 200 and 400 μM. In the analysis of DNA fragmentation no statistical difference was detected in relation to the control, which is in agreement with the results obtained in the analysis of OLP and ROS where both showed a decrease in 15 min and in the analysis of ROS a statistical difference between all treatments and control. The functionality of the mitochondria observed a statistical difference between LNC-Res in concentrations of 50 and 100μM when compared with 400μM of Res after 60 minutes. With these results, it can be seen that resveratrol did not induce toxicity to bovine sperm cells and it was observed that this compound in its nanoencapsulated form stimulated the intracellular antioxidant machinery generating a protection for them. In this sense, LNC-Res may become a promising pharmaceutical form for the drug in question.Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em BiotecnologiaUFPelBrasilCC BY-NC-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessENGENHARIASENGENHARIA QUIMICABIOENGENHARIAAntioxidanteCélulas espermáticasCitometria de fluxoNanotecnologiaResveratrolFlow citometryNanotechnologySperm cellsNanoresveratrol diminuiu EROs e LPO e aumenta motilidade progressiva em espermatozoides bovinos descongeladosNanoresveratrol decreased ROS and LPO and increased progressive motility in thawed bovine spermatozoainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttps://orcid.org/0000-0001-8172-7604http://lattes.cnpq.br/0666877970694962https://orcid.org/0000-0002-1535-3795http://lattes.cnpq.br/5521061970424848Seixas, Fabiana Kömmlinghttp://lattes.cnpq.br/4335833939769004Collares, Tiago VeirasCruzeiro, Pedro Sicareponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELORIGINALDissertação_Pedro Sica Cruzeiro.pdfDissertação_Pedro Sica Cruzeiro.pdfapplication/pdf772848http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/18307/1/Disserta%c3%a7%c3%a3o_Pedro%20Sica%20Cruzeiro.pdf751d77971991b91ed9e8eb899bbeb259MD51open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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