Avaliação de vacinas recombinantes e bacterinas compostas pelas proteínas ROP2 de Neospora caninum e de ROP2 associada a porção B da toxina termo lábil de Escherichia coli

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2016
Autor(a) principal: Borchardt, Jéssica Lopes
Orientador(a): Leite, Fabio Pereira Leivas
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Pelotas
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Parasitologia
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/handle/prefix/18105
Resumo: Neospora caninum é um protozoário intracelular obrigatório, agente etiológico da neosporose, principal doença parasitária responsável por abortos em bovinos em todo o mundo. Diversas medidas profiláticas contra a neosporose em animais de produção vêm sendo estudadas visando diminuir as perdas econômicas geradas por essa doença. Um método alternativo de controle seria a imunoprofilaxia através de vacinação. O presente estudo teve como objetivo avaliar a resposta imune de camundongos Swiss contra o antígeno recombinante ROP2, este em fusão com a porção B da enterotoxina termolábil de Escherichia coli (LTB), expressos em E. coli, em forma de bacterina ou purificados. Os antígenos produzidos foram quantificados pela técnica de SDS-PAGE e caracterizados pela técnica de Western blot. Após realizada a vacinação dos animais experimentais com ROP2 e ROP2/LTB, foram realizadas coletas de sangue para avaliação de níveis de IgG totais, títulos de anticorpos e isotipos pela técnica de ELISA indireto. Foi possível observar que todos os antígenos avaliados foram capazes de estimular a produção de anticorpos, sendo que as vacinas compostas por proteínas recombinantes purificadas geraram uma resposta de IgG total superior (p<0,05) as bacterinas recombinantes. Estas vacinas apresentaram títulos de anticorpos superiores aos obtidos pelas vacinas compostas pelas bacterinas. Na análise dos isotipos ambas as vacinas compostas por proteínas recombinantes purificadas estimularam níveis de IgG1 e IgG2a, sendo que o antígeno ROP2 gerou maiores índices de IgG2a e o antígeno ROP2/LTB maiores índices de IgG1. No entando, em nosso estudo pode-se concluir que as vacinas com os antígenos recombinantes purificados foram mais eficazes no estímulo da resposta imune humoral em relação as bacterinas e que esses antígenos estimularam a resposta imune tanto para uma via Th1 quanto para via Th2, sendo que a presença da ROP2 gerou uma modulação de resposta para uma via Th1, ao contrário do antígeno ROP2/LTB que devido a presença da molécula LTB modulou a resposta imune para uma via Th2, promovendo um maior equilíbrioentre as vias Th1 e Th2.
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O presente estudo teve como objetivo avaliar a resposta imune de camundongos Swiss contra o antígeno recombinante ROP2, este em fusão com a porção B da enterotoxina termolábil de Escherichia coli (LTB), expressos em E. coli, em forma de bacterina ou purificados. Os antígenos produzidos foram quantificados pela técnica de SDS-PAGE e caracterizados pela técnica de Western blot. Após realizada a vacinação dos animais experimentais com ROP2 e ROP2/LTB, foram realizadas coletas de sangue para avaliação de níveis de IgG totais, títulos de anticorpos e isotipos pela técnica de ELISA indireto. Foi possível observar que todos os antígenos avaliados foram capazes de estimular a produção de anticorpos, sendo que as vacinas compostas por proteínas recombinantes purificadas geraram uma resposta de IgG total superior (p<0,05) as bacterinas recombinantes. Estas vacinas apresentaram títulos de anticorpos superiores aos obtidos pelas vacinas compostas pelas bacterinas. 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Several prophylactic measures against neosporosis in farm animals have been studied aiming to reduce the economic losses caused by this disease. An alternate control method would be through vaccination immunoprophylaxis. This study aimed to evaluate the immune response of Swiss mice against the recombinant antigen ROP2, this fused with the B portion of the heat labile enterotoxin of Escherichia coli (LTB), expressed in E. coli in the form of bacterin or purified. The antigens were quantified by SDS-PAGE technique and characterized by Western blot. After making the vaccination of experimental animals with ROP2 and ROP2 / LTB, samples were taken of blood for evaluation of total IgG levels of antibody titers and isotypes by ELISA technique. It was observed that all the evaluated antigens are able to stimulate the production of antibodies, and vaccines consisting of purified recombinant proteins generated a higher total IgG response (p <0.05) recombinant bacterins. These vaccines had titers higher antibodies obtained by the vaccine composed by the bacterins. The analysis of the isotypes both vaccines composed of purified recombinant proteins stimulated levels of IgG1 and IgG2a, wherein the antigen ROP2 generated higher levels of IgG2a and ROP2 antigen / LTB higher IgG1 levels. However, in this study it can be concluded that vaccination with the purified recombinant antigens were more effective in stimulating the humoral immune response compared bacterins which these antigens have stimulated the immune response for either a Th1 pathway as for Th2 pathway, and the presence of ROP2 generated response modulation for a Th1 pathway, unlike ROP2 / LTB antigen that due to the presence of LTB molecule modulates the immune response for a Th2 pathway, promoting a better balance of the immune response between Th1 pathways and Th2.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em ParasitologiaUFPelBrasilCC BY-NC-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessCIENCIAS BIOLOGICASPARASITOLOGIANeosporoseAdjuvanteBacterinaRoptriasEscherichia coliNeosporosisAdjuvanteBacterinRhoptriesAvaliação de vacinas recombinantes e bacterinas compostas pelas proteínas ROP2 de Neospora caninum e de ROP2 associada a porção B da toxina termo lábil de Escherichia coliEvaluation of recombinant vaccines and bacterins ROP2 comprised of the protein of Neospora caninum and ROP2 associated with portion B of heat labile toxin of Escherichia coliinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://lattes.cnpq.br/2769953804816776http://lattes.cnpq.br/0198257253890399Cunha, Rodrigo Casquerohttp://lattes.cnpq.br/4249320103312387Leite, Fabio Pereira LeivasBorchardt, Jéssica Lopesreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELORIGINALDissertação_Jéssica L. Borchardt.pdfDissertação_Jéssica L. Borchardt.pdfapplication/pdf1127900http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/18105/1/Disserta%c3%a7%c3%a3o_J%c3%a9ssica%20L.%20Borchardt.pdfb7c6f3d001576eee71a9c136b3c69008MD51open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81960http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/18105/2/license.txta963c7f783e32dba7010280c7b5ea154MD52open accessTEXTDissertação_Jéssica L. Borchardt.pdf.txtDissertação_Jéssica L. Borchardt.pdf.txtExtracted texttext/plain133507http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/18105/3/Disserta%c3%a7%c3%a3o_J%c3%a9ssica%20L.%20Borchardt.pdf.txt03e7db688e17b459c45a40a2611ce560MD53open accessTHUMBNAILDissertação_Jéssica L. Borchardt.pdf.jpgDissertação_Jéssica L. 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