Avaliação histológica de folículos pré-antrais inclusos em tecido ovariano equino e uso de metodologias ativas no ensino superior
| Ano de defesa: | 2024 |
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Universidade Federal de Pelotas
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Programa de Pós-Graduação em Veterinária
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Resumo: | A espécie equina tem sido um modelo experimental atraente para a investigação comparativa da foliculogênese em seres humanos e animais domésticos, devido a uma série de semelhanças na dinâmica folicular. Neste sentido, a obtenção de tecido ovariano equino de alta qualidade é crucial para garantir a eficácia das técnicas de manipulação ovariana. Portanto, é essencial realizar uma análise histológica que preserve a integridade morfológica do tecido, estabelecendo um protocolo de fixação adequado para assegurar a preservação dos folículos pré-antrais da forma mais fidedigna ao tecido ovariano fresco original, mitigando danos. Desta forma, a presente tese objetivou aprimorar os protocolos de fixação para preservar a morfologia dos folículos pré-antrais inclusos em tecido ovariano equino. Adicionalmente, foram formuladas metodologias ativas no desenvolvimento de habilidades de pesquisa junto a estudantes de graduação em medicina veterinária. No primeiro estudo, ovários (n = 6) de éguas jovens submetidas a ovariectomia foram fragmentados (3 x 3 x 1 mm; 20 fragmentos/ovário). Os fragmentos de tecido ovariano equino foram destinados a fixação com etanol 70% por curto período (ST-EtOH, 45 minutos) em comparação a dois fixadores clássicos [solução de Carnoy (CAR) e paraformaldeído a 4% (PFA)] em diferentes tempos de fixação (6 horas, 12 horas). Após processamento histológico clássico, as lâminas obtidas foram avaliadas quanto a morfologia (normal ou anormais), e estágio de desenvolvimento folicular, as densidades de células foliculares e estromais, além dos diâmetros nucleares dos folículos e oócitos inclusos em tecido ovariano equino. Como resultado, demonstrou-se que a solução de Carnoy melhor preservou a morfologia celular de tecido ovariano equino. Observamos que o paraformaldeído a 4% é um fixador adequado para avaliação morfológica de folículos pré-antrais, além de possuir a vantagem de ser compatível com técnicas de imunohistoquímica quando comparado com os demais fixadores. Além disso, o fixador ST-EtOH se mostrou uma boa alternativa quando é necessária uma avaliação histológica rápida. Adicionalmente, no segundo estudo foi possível avaliar o envolvimento dos estudantes de graduação em veterinária na pesquisa, utilizando metodologias ativas de ensino, visando capacitar os estudantes a adquirir habilidades essenciais para sua formação, construir conhecimentos científicos e estimular o pensamento crítico. A experiência da utilização das metodologias ativas contribuiu para a elaboração de um segundo estudo com foco nos procedimentos de manipulação de tecido ovariano equino, e fornecendo aos estudantes uma visão mais abrangente das aplicações práticas e científicas nesta área. |
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2025-10-06T19:20:35Z2025-10-062025-10-06T19:20:35Z2024-11-29BORGES, Morgana Alves. Avaliação histológica de folículos pré-antrais inclusos em tecido ovariano equino e uso de metodologias ativas no ensino superior. 2023. 100 f. Tese (Doutorado em Veterinária, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2023.http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/handle/prefix/17846A espécie equina tem sido um modelo experimental atraente para a investigação comparativa da foliculogênese em seres humanos e animais domésticos, devido a uma série de semelhanças na dinâmica folicular. Neste sentido, a obtenção de tecido ovariano equino de alta qualidade é crucial para garantir a eficácia das técnicas de manipulação ovariana. Portanto, é essencial realizar uma análise histológica que preserve a integridade morfológica do tecido, estabelecendo um protocolo de fixação adequado para assegurar a preservação dos folículos pré-antrais da forma mais fidedigna ao tecido ovariano fresco original, mitigando danos. Desta forma, a presente tese objetivou aprimorar os protocolos de fixação para preservar a morfologia dos folículos pré-antrais inclusos em tecido ovariano equino. Adicionalmente, foram formuladas metodologias ativas no desenvolvimento de habilidades de pesquisa junto a estudantes de graduação em medicina veterinária. No primeiro estudo, ovários (n = 6) de éguas jovens submetidas a ovariectomia foram fragmentados (3 x 3 x 1 mm; 20 fragmentos/ovário). Os fragmentos de tecido ovariano equino foram destinados a fixação com etanol 70% por curto período (ST-EtOH, 45 minutos) em comparação a dois fixadores clássicos [solução de Carnoy (CAR) e paraformaldeído a 4% (PFA)] em diferentes tempos de fixação (6 horas, 12 horas). Após processamento histológico clássico, as lâminas obtidas foram avaliadas quanto a morfologia (normal ou anormais), e estágio de desenvolvimento folicular, as densidades de células foliculares e estromais, além dos diâmetros nucleares dos folículos e oócitos inclusos em tecido ovariano equino. Como resultado, demonstrou-se que a solução de Carnoy melhor preservou a morfologia celular de tecido ovariano equino. Observamos que o paraformaldeído a 4% é um fixador adequado para avaliação morfológica de folículos pré-antrais, além de possuir a vantagem de ser compatível com técnicas de imunohistoquímica quando comparado com os demais fixadores. Além disso, o fixador ST-EtOH se mostrou uma boa alternativa quando é necessária uma avaliação histológica rápida. Adicionalmente, no segundo estudo foi possível avaliar o envolvimento dos estudantes de graduação em veterinária na pesquisa, utilizando metodologias ativas de ensino, visando capacitar os estudantes a adquirir habilidades essenciais para sua formação, construir conhecimentos científicos e estimular o pensamento crítico. A experiência da utilização das metodologias ativas contribuiu para a elaboração de um segundo estudo com foco nos procedimentos de manipulação de tecido ovariano equino, e fornecendo aos estudantes uma visão mais abrangente das aplicações práticas e científicas nesta área.The equine species has been an attractive experimental model for comparative research on folliculogenesis in humans and domestic animals due to several similarities in follicular dynamics. In this regard, obtaining high-quality equine ovarian tissue is crucial to ensure the effectiveness of ovarian manipulation techniques. Therefore, it is essential to perform a histological analysis that preserves the morphological integrity of the tissue by establishing an appropriate fixation protocol to ensure the preservation of pre-antral follicles as faithfully as possible to the original fresh ovarian tissue, mitigating damage. Thus, this thesis aimed to improve fixation protocols to preserve the morphology of pre-antral follicles within equine ovarian tissue. Additionally, active teaching methodologies were developed to foster research skills among undergraduate veterinary students. In the first study, ovaries (n = 6) from young mares subjected to ovariectomy were fragmented (3 x 3 x 1 mm; 20 fragments/ovary). Equine ovarian tissue fragments were subjected to fixation with 70% ethanol for a short period (ST-EtOH, 45 minutes) in comparison to two classic fixatives [Carnoy's solution (CAR) and 4% paraformaldehyde (PFA)] at different fixation times (6 hours, 12 hours). After standard histological processing, the obtained slides were assessed for morphology (normal or abnormal), follicular developmental stage, densities of follicular and stromal cells, as well as nuclear diameters of follicles and oocytes within equine ovarian tissue. As a result, it was demonstrated that Carnoy's solution better preserved the cellular morphology of equine ovarian tissue. It was observed that 4% paraformaldehyde is a suitable fixative for morphological evaluation of pre-antral follicles, and it has the advantage of being compatible with immunohistochemical technique, compared to the other fixatives. Additionally, the STEtOH fixative proved to be a good alternative when a quick histological evaluation is required. Furthermore, in the second study, it was possible to assess the involvement of undergraduate veterinary students in research, utilizing active teaching methodologies aimed at equipping students with essential skills for their education, build scientific knowledge, and stimulating critical thinking. The experience of using active teaching methodologies contributed to the development of a second study focused on equine ovarian tissue manipulation procedures and provided students with a broader perspective on the practical and scientific applications in this field.Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em VeterináriaUFPelBrasilCC BY-NC-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessCIENCIAS AGRARIASMEDICINA VETERINARIAHISTOLOGIAOvário equinoManipulação de tecidoHistologiaEstratégias de ensinoEquine ovaryTissue manipulationHistologyTeaching strategiesAvaliação histológica de folículos pré-antrais inclusos em tecido ovariano equino e uso de metodologias ativas no ensino superiorHistological evaluation of pre-antral follicles in equine ovarian tissue and the use of active teaching methodologies in higher educationinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesishttps://orcid.org/0000-0003-4359-1501http://lattes.cnpq.br/3756783939859224http://lattes.cnpq.br/1670738049534162Gastal, Eduardo Leitehttp://lattes.cnpq.br/1004659561180428Aguiar, Francisco Léo Nascimento dehttp://lattes.cnpq.br/7987281486042916Curcio, Bruna da RosaGastal, Gustavo Desire Antuneshttp://lattes.cnpq.br/9203949744725900https://orcid.org/0000-0002-5317-2207Borges, Morgana Alvesreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELORIGINALtese_morgana_alves_borges.pdftese_morgana_alves_borges.pdfapplication/pdf2220245http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/17846/1/tese_morgana_alves_borges.pdf7733519815c81536c935fe0d90bdb86fMD51open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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