Validation of optogenetic protein expression in the Dorsal cochlear nucleus: molecular basis for in vitro and in vivo investigation of tinnitus in mice

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2015
Autor(a) principal: Borges, Thawann Malfatti
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal do Rio Grande do Norte
Brasil
UFRN
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM NEUROCIÊNCIAS
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://repositorio.ufrn.br/jspui/handle/123456789/20343
Resumo: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
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spelling Validation of optogenetic protein expression in the Dorsal cochlear nucleus: molecular basis for in vitro and in vivo investigation of tinnitus in miceValidação da expressão de proteínas optogenéticas no Núcleo coclear dorsal: bases moleculares para investigação in vitro e in vivo de tinnitus em camundongosOptogeneticsDorsal cochlear nucleusAuditory systemTinnitusCNPQ::OUTROS::CIENCIAS: NEUROCIÊNCIASCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Tinnitus is the perception of a sound in the absence of a corresponding physical stimulus. It is not clear yet what mechanisms are involved in tinnitus and how it starts and/or becomes chronic. Due to the relationship between tinnitus and somatosensory trauma/stimuli, the dorsal cochlear nucleus (DCN), a region known to integrate somatosensory and auditory pathways, has been identified as a potential key structure in the generation of phantom sound perception. Here, we target specific neuronal populations in the DCN to allow further investigation on how this region may contribute to the generation of tinnitus signals that spread to other auditory areas. We examined the expression of optogenetic proteins (Channelrhodopsin 2 - ChR2; and enhanced Archaerhodopsin 3.0 - eArch3.0), targeting neurons expressing Calmoduline Kinase II alpha (CaMKIIa) promoter in wild-type C57/Bl6 mice and neurons expressing nicotinic acetylcholine receptor subunit alpha-2 promoter (ChRNA2) in ChRNA2- Cre transgenic C57/Bl6 mice, using local virus injection, verified by fluorescence microscopy. Unit responses were differentiated based on their electrophysiological response to sound. We then investigated if firing of neurons expressing optogenetic tools can be controlled in vivo and if the same neurons also fire action potentials in response to precisely timed sound stimulation. Both in vivo and preliminary in vitro data shows that neurons expressing ChR2 do respond to sound, and that they furthermore also can respond to light stimulation with a stable and similar waveform. Moreover, in vivo data shows that neurons expressing eArch3.0, responding to sound, will decrease their firing rate when exposed to green light. Thereby showing that optogenetic tools can be used functionally in the DCN, it is possible to further test tinnitus theories by, for example, producing an increased firing rate in the DCN, trying to mimic tinnitus; or inhibiting increased spontaneous firing rate in the DCN of animals with noise-induced or salycilate-induced tinnitus.Universidade Federal do Rio Grande do NorteBrasilUFRNPROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM NEUROCIÊNCIASLeão, Emelie Katarina Svahnhttp://lattes.cnpq.br/1262934391596208http://lattes.cnpq.br/1279823352935722Leão, Ricardo Maurício Xavierhttp://lattes.cnpq.br/8125613125649746Leão, Richardson Naveshttp://lattes.cnpq.br/0683942077872227Borges, Thawann Malfatti2016-04-29T20:35:41Z2016-04-29T20:35:41Z2015-06-26info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfBORGES, Thawann Malfatti. Validation of optogenetic protein expression in the Dorsal cochlear nucleus: molecular basis for in vitro and in vivo investigation of tinnitus in mice. 2015. 60f. Dissertação (Mestrado em Neurociências) - Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2015.https://repositorio.ufrn.br/jspui/handle/123456789/20343porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFRNinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)instacron:UFRN2017-11-02T18:56:16Zoai:repositorio.ufrn.br:123456789/20343Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufrn.br/oai/repositorio@bczm.ufrn.bropendoar:2017-11-02T18:56:16Repositório Institucional da UFRN - Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)false
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Validação da expressão de proteínas optogenéticas no Núcleo coclear dorsal: bases moleculares para investigação in vitro e in vivo de tinnitus em camundongos
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