Papel da fissão mitocondrial na resposta à privação alimentar em caenorhabditis elegans

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Nunes, Danilo Rosa [UNIFESP]
• Orientador(a): Cunha, Fernanda Marques Da [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300001f30w
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: Restrição Calórica; Dinâmica Mitocondrial; C. Elegans
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=7676359; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/59621

Objetivo: Investigar o impacto da ausência de fissão mitocondrial sobre a resposta à restrição calórica em C. elegans. Métodos: O verme do tipo selvagem, N2 Bristol, e o mutante drp-1, foram cultivados até a fase adulta e então transferidos para placas NGM contendo (condição ad libitum (AL)) ou não contendo (condição bacterial depri- vation (BD)) uma camada de bactéria E. coli. Os animais foram coletados após dife- rentes intervalos de tempo para avaliação de parâmetros mitocondriais incluindo morfologia, consumo de oxigênio, atividade da citrato sintase e quantificação dos níveis de ATP sintase por western immunoblotting. Além disso, o tempo de vida e a saúde dos animais também foram avaliados. Resultados: O mutante drp-1 não mostrou diferenças significativas no aumento do tempo de vida proporcionado pela BD quando comparado ao animal selvagem. A BD atenuou o prejuízo da movimen- tação em meio líquido observado durante o envelhecimento de animais selvagens, mas não de mutantes drp-1, sugerindo o que a fissão mitocondrial é necessária aos efeitos benéficos da BD sobre a musculatura dos animais. Mutantes drp-1 parecem ter mitocôndrias musculares mais alongadas quando comparados a animais selva- gens, não sendo este parâmetro afetado pela exposição dos animais à BD por 24 h. Apesar de não afetar a morfologia mitocondrial, a BD reduziu drasticamente a taxa de consumo de oxigênio de animais selvagens e drp-1 quando comparados aos res- pectivos grupos AL. Essa diminuição da respiração não é resultado da diminuição da massa mitocondrial, como revelado pelo ensaio enzimático de atividade da citrato sintase e western immunoblotting para ATP sintase. Conclusão: A diminuição da fissão mitocondrial por meio da mutação do gene drp-1 não afeta os efeitos da BD sobre o tempo de vida e atividade mitocondrial de C. elegans, mas prejudica os efei- tos benéficos da intervenção sobre a redução da mobilidade associada ao envelhe- cimento.