Avaliação de modificações pós-traducionais de caráter redox do fungo Paracoccidioides brasiliensis após estresse nitrosativo

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Navarro, Marina Valente [UNIFESP]
• Orientador(a): Batista, Wagner Luiz [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: eng
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: Paracoccidioides brasiliensis; Paracoccidioidomicose; Estresse fisiológico; Proteômica; Espécies reativas de nitrogênio
• Palavras-chave em Inglês: Paracoccidioides brasiliensis; Paracoccidioidomycosis; Stress, physiological; Proteomics
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5001643; http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50659

O fungo Paracoccidioides brasiliensis e P. lutzi são os agentes causadores da paracoccidioidomicose (PCM), uma doença sistêmica prevalente na América Latina. Este fungo é considerado um patógeno intracelular facultativo capaz de sobreviver e replicar dentro de macrófagos. Sua sobrevivência durante a infecção depende da adaptação do fungo a diferentes condições, notoriamente ao estresse oxidativo/nitrosativo imposto por células do sistema imune, particularmente macrófagos alveolares. Atualmente, pouco se conhece sobre as vias de transdução de sinal envolvidas na resposta aos mecanismos de defesa do hospedeiro e são certamente desencadeadas por espécies reativas de oxigênio e nitrogênio (ROS/RNS) geradas por células do hospedeiro. Levando-se em conta que o efeito do óxido nítrico (NO) sobre o patógeno é dependente das concentrações disponíveis, tais efeitos podem alterar o status redox dos resíduos de cisteína podendo influenciar (ativando ou inibindo) uma variedade de funções de proteínas, destacando-se a S-nitrosilação, uma importante modificação pós-traducional dependente de NO que regula grande variedade de funções celulares e eventos de sinalização. Foi demonstrado por nosso grupo que células leveduriformes de Paracoccidioides proliferam quando expostas a baixas concentrações de NO. Dessa forma, este trabalho propôs avaliar o perfil de proteínas S-nitrosiladas em P. brasiliensis, bem como a identificação de sítios de S-nitrosilação, após o estímulo com diferentes concentrações de RNS. Através de análises por espectrometria de massas e quantificação Label-free foram identificadas 487 proteínas no estudo do proteoma total e 474 no estudo de proteínas S-nitrosiladas. A identificação de proteínas que sofreram S-nitrosilação com baixas concentrações de NO, apresentou um perfil de resposta proliferativo, com diversas proteínas envolvidas com regulação do ciclo celular e crescimento, e, representariam em última análise moléculas com papel importante na virulência do fungo. Por outro lado, a análise de proteínas S-nitrosiladas a partir de exposição com altas concentrações de NO apresentaram uma resposta de sobrevivência e podem tanto ajudar a explicar as propriedades antifúngicas das RNS, quanto identificar potenciais alvos moleculares para o desenvolvimento futuro de novas drogas.