Expressão gênica em células osteobláticas humanas após irradiação de laser de baixa intensidade

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2018
Autor(a) principal: Bomfim, Fernando Russo Costa do [UNIFESP]
Orientador(a): Plapler, Helio [UNIFESP]
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
dARK ID: ark:/48912/001300001qdqm
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Palavras-chave em Inglês:
Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=6591262
https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/52458
Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do laser de baixa intensidade, através da expressão gênica, na sinalização de cálcio, mineralização óssea e mecanismos de estresse celular em osteoblastos humanos. Culturas celulares da linhagem osteoblástica hFOB1.19 foram cultivados e distribuídos em dois grupos, controle (C; n=78) e laser (L; n=78) com n=6 por dia do período experimental. Após maturação, as células do grupo L foram irradiadas com laser de baixa intensidade de Arseneto de Gálio e Alumínio, λ=808nm, 200mW de potência nominal, densidade de potência de 200mW/cm2, dose de energia ou fluência de 37J/cm2, área de feixe de 0,02mm2, tempo de 5s, energia de 1J, em um ponto de aplicação, diariamente, durante 13 dias. Em seguida, foram realizadas contagens celulares e o RNA foi extraído, quantificado, submetido a síntese de cDNA e realizada quantificação de Ct comparativo pela técnica de reação em cadeia da polimerase em tempo real. Os valores foram submetidos à análise estatística pelo teste MannWhitney com p<0,05. A análise da contagem celular foi estatisticamente superior no grupo L (37,25x104±22,02) em relação ao grupo controle (22,75x104±7,660) com (p=0,0259) e os valores de 2ΔΔCt apresentaram para os genes S100A6, PMCA, calmodulina e FKBP4 hiper expressão no décimo terceiro dia, enquanto a osteocalcina apresentou hipo expressão e iNOS mantevese constante nos grupos L e C. Sugerese que o mecanismo de ação do laser de baixa intensidade é, possivelmente, dosedependente e acumulativo e estar relacionado às fases do ciclo celular em osteoblastos humanos.
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Após maturação, as células do grupo L foram irradiadas com laser de baixa intensidade de Arseneto de Gálio e Alumínio, λ=808nm, 200mW de potência nominal, densidade de potência de 200mW/cm2, dose de energia ou fluência de 37J/cm2, área de feixe de 0,02mm2, tempo de 5s, energia de 1J, em um ponto de aplicação, diariamente, durante 13 dias. Em seguida, foram realizadas contagens celulares e o RNA foi extraído, quantificado, submetido a síntese de cDNA e realizada quantificação de Ct comparativo pela técnica de reação em cadeia da polimerase em tempo real. Os valores foram submetidos à análise estatística pelo teste MannWhitney com p<0,05. A análise da contagem celular foi estatisticamente superior no grupo L (37,25x104±22,02) em relação ao grupo controle (22,75x104±7,660) com (p=0,0259) e os valores de 2ΔΔCt apresentaram para os genes S100A6, PMCA, calmodulina e FKBP4 hiper expressão no décimo terceiro dia, enquanto a osteocalcina apresentou hipo expressão e iNOS mantevese constante nos grupos L e C. Sugerese que o mecanismo de ação do laser de baixa intensidade é, possivelmente, dosedependente e acumulativo e estar relacionado às fases do ciclo celular em osteoblastos humanos.The aim of this study was to evaluate the effects of lowlevel laser, through gene expression, in calcium signaling, bone mineralization and cellular stress mechanisms in human osteoblasts. Cell cultures of osteoblastic lineage hFOB1.19 were cultured and assigned into two groups, control (C; n = 78) and laser (L; n = 78) with n = 6 per day of the experimental period. After maturation, cells of the L group were irradiated with a Gallium and Aluminum Arsenide lowlevel laser device, λ = 808 nm, 200 mW nominal power, power density of 200m W/cm2, energy dose or flow rate of 37J/cm2, area of beam of 0,02mm2, time of 5 s, energy of 1 J, at an application point, daily, for 13 days. Then, cell counts were performed and RNA was extracted, quantified, submitted to cDNA synthesis and quantified by comparative Ct by realtime polymerase chain reaction. The values were submitted to statistical analysis by MannWhitney test with p<0,05. The analysis of the cell count was statistically superior in the L group (37,25x104±22,02) in relation to the control group (22,75x104±7.660) with (p = 0,0259) and the values of 2ΔΔCt presented for the genes S100A6, PMCA, calmodulin and FKBP4 hyper expression on the thirteenth day, whereas osteocalcin presented hypo expression and iNOS remained constant in the L and C groups. It is suggested that the mechanism of action of lowlevel laser is possibly, dosedependent and cumulative and the cell cycle phases are related to human osteoblasts.Dados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2018)55 f.https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=65912622018-0399.pdfhttps://repositorio.unifesp.br/handle/11600/52458ark:/48912/001300001qdqmporUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)info:eu-repo/semantics/openAccessLasersExpressão gênicaOsteoblastosLasersOsteoblastsGene expressionExpressão gênica em células osteobláticas humanas após irradiação de laser de baixa intensidadeGene expression in human osteoblastic cells after lowlevel laser irradiationinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESPSão Paulo, Escola Paulista de MedicinaCiência Cirúrgica InterdisciplinarCiências da SaúdeAlterações Funcionais e Histopatológicas Pós-OperatóriasORIGINALFernando Russo Costa do Bomfim - A.pdfFernando Russo Costa do Bomfim - A.pdfTese de doutoradoapplication/pdf1227133https://repositorio.unifesp.br/bitstreams/ea8d3573-50f5-498a-bb63-233a0e2fc412/download70ff386daad34161a042a8f2f9e51124MD51TEXTFernando Russo Costa do Bomfim - A.pdf.txtFernando Russo Costa do Bomfim - A.pdf.txtExtracted texttext/plain103542https://repositorio.unifesp.br/bitstreams/a2d95fbd-d289-48d4-b2c1-d366183b65f3/download0b2229aceb3f244c4b756085505f3e41MD52THUMBNAILFernando Russo Costa do Bomfim - A.pdf.jpgFernando Russo Costa do Bomfim - A.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3056https://repositorio.unifesp.br/bitstreams/ec5c73ab-5898-4662-8992-5e666869f568/downloadbc575d07972498ff0f7de5e450b090b3MD5311600/524582024-08-10 11:21:41.693oai:repositorio.unifesp.br:11600/52458https://repositorio.unifesp.brRepositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestbiblioteca.csp@unifesp.bropendoar:34652024-08-10T11:21:41Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false
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