Expressão gênica em células osteobláticas humanas após irradiação de laser de baixa intensidade
| Ano de defesa: | 2018 |
|---|---|
| Autor(a) principal: | |
| Orientador(a): | |
| Banca de defesa: | |
| Tipo de documento: | Tese |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
| dARK ID: | ark:/48912/001300001qdqm |
| Idioma: | por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
|
| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
|
| Departamento: |
Não Informado pela instituição
|
| País: |
Não Informado pela instituição
|
| Palavras-chave em Português: | |
| Palavras-chave em Inglês: | |
| Link de acesso: | https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=6591262 https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/52458 |
Resumo: | O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do laser de baixa intensidade, através da expressão gênica, na sinalização de cálcio, mineralização óssea e mecanismos de estresse celular em osteoblastos humanos. Culturas celulares da linhagem osteoblástica hFOB1.19 foram cultivados e distribuídos em dois grupos, controle (C; n=78) e laser (L; n=78) com n=6 por dia do período experimental. Após maturação, as células do grupo L foram irradiadas com laser de baixa intensidade de Arseneto de Gálio e Alumínio, λ=808nm, 200mW de potência nominal, densidade de potência de 200mW/cm2, dose de energia ou fluência de 37J/cm2, área de feixe de 0,02mm2, tempo de 5s, energia de 1J, em um ponto de aplicação, diariamente, durante 13 dias. Em seguida, foram realizadas contagens celulares e o RNA foi extraído, quantificado, submetido a síntese de cDNA e realizada quantificação de Ct comparativo pela técnica de reação em cadeia da polimerase em tempo real. Os valores foram submetidos à análise estatística pelo teste MannWhitney com p<0,05. A análise da contagem celular foi estatisticamente superior no grupo L (37,25x104±22,02) em relação ao grupo controle (22,75x104±7,660) com (p=0,0259) e os valores de 2ΔΔCt apresentaram para os genes S100A6, PMCA, calmodulina e FKBP4 hiper expressão no décimo terceiro dia, enquanto a osteocalcina apresentou hipo expressão e iNOS mantevese constante nos grupos L e C. Sugerese que o mecanismo de ação do laser de baixa intensidade é, possivelmente, dosedependente e acumulativo e estar relacionado às fases do ciclo celular em osteoblastos humanos. |
| id |
UFSP_40a971326553feae3aeb8f60f9b8eeff |
|---|---|
| oai_identifier_str |
oai:repositorio.unifesp.br:11600/52458 |
| network_acronym_str |
UFSP |
| network_name_str |
Repositório Institucional da UNIFESP |
| repository_id_str |
|
| spelling |
Doutoradohttp://lattes.cnpq.br/7592528580581344http://lattes.cnpq.br/2871630525937037Bomfim, Fernando Russo Costa do [UNIFESP]http://lattes.cnpq.br/7094550148821893Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Plapler, Helio [UNIFESP]Thomasini, Ronaldo Luis [UNIFESP]São Paulo2020-03-25T11:43:55Z2020-03-25T11:43:55Z2018-11-28O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do laser de baixa intensidade, através da expressão gênica, na sinalização de cálcio, mineralização óssea e mecanismos de estresse celular em osteoblastos humanos. Culturas celulares da linhagem osteoblástica hFOB1.19 foram cultivados e distribuídos em dois grupos, controle (C; n=78) e laser (L; n=78) com n=6 por dia do período experimental. Após maturação, as células do grupo L foram irradiadas com laser de baixa intensidade de Arseneto de Gálio e Alumínio, λ=808nm, 200mW de potência nominal, densidade de potência de 200mW/cm2, dose de energia ou fluência de 37J/cm2, área de feixe de 0,02mm2, tempo de 5s, energia de 1J, em um ponto de aplicação, diariamente, durante 13 dias. Em seguida, foram realizadas contagens celulares e o RNA foi extraído, quantificado, submetido a síntese de cDNA e realizada quantificação de Ct comparativo pela técnica de reação em cadeia da polimerase em tempo real. Os valores foram submetidos à análise estatística pelo teste MannWhitney com p<0,05. A análise da contagem celular foi estatisticamente superior no grupo L (37,25x104±22,02) em relação ao grupo controle (22,75x104±7,660) com (p=0,0259) e os valores de 2ΔΔCt apresentaram para os genes S100A6, PMCA, calmodulina e FKBP4 hiper expressão no décimo terceiro dia, enquanto a osteocalcina apresentou hipo expressão e iNOS mantevese constante nos grupos L e C. Sugerese que o mecanismo de ação do laser de baixa intensidade é, possivelmente, dosedependente e acumulativo e estar relacionado às fases do ciclo celular em osteoblastos humanos.The aim of this study was to evaluate the effects of lowlevel laser, through gene expression, in calcium signaling, bone mineralization and cellular stress mechanisms in human osteoblasts. Cell cultures of osteoblastic lineage hFOB1.19 were cultured and assigned into two groups, control (C; n = 78) and laser (L; n = 78) with n = 6 per day of the experimental period. After maturation, cells of the L group were irradiated with a Gallium and Aluminum Arsenide lowlevel laser device, λ = 808 nm, 200 mW nominal power, power density of 200m W/cm2, energy dose or flow rate of 37J/cm2, area of beam of 0,02mm2, time of 5 s, energy of 1 J, at an application point, daily, for 13 days. Then, cell counts were performed and RNA was extracted, quantified, submitted to cDNA synthesis and quantified by comparative Ct by realtime polymerase chain reaction. The values were submitted to statistical analysis by MannWhitney test with p<0,05. The analysis of the cell count was statistically superior in the L group (37,25x104±22,02) in relation to the control group (22,75x104±7.660) with (p = 0,0259) and the values of 2ΔΔCt presented for the genes S100A6, PMCA, calmodulin and FKBP4 hyper expression on the thirteenth day, whereas osteocalcin presented hypo expression and iNOS remained constant in the L and C groups. It is suggested that the mechanism of action of lowlevel laser is possibly, dosedependent and cumulative and the cell cycle phases are related to human osteoblasts.Dados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2018)55 f.https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=65912622018-0399.pdfhttps://repositorio.unifesp.br/handle/11600/52458ark:/48912/001300001qdqmporUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)info:eu-repo/semantics/openAccessLasersExpressão gênicaOsteoblastosLasersOsteoblastsGene expressionExpressão gênica em células osteobláticas humanas após irradiação de laser de baixa intensidadeGene expression in human osteoblastic cells after lowlevel laser irradiationinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESPSão Paulo, Escola Paulista de MedicinaCiência Cirúrgica InterdisciplinarCiências da SaúdeAlterações Funcionais e Histopatológicas Pós-OperatóriasORIGINALFernando Russo Costa do Bomfim - A.pdfFernando Russo Costa do Bomfim - A.pdfTese de doutoradoapplication/pdf1227133https://repositorio.unifesp.br/bitstreams/ea8d3573-50f5-498a-bb63-233a0e2fc412/download70ff386daad34161a042a8f2f9e51124MD51TEXTFernando Russo Costa do Bomfim - A.pdf.txtFernando Russo Costa do Bomfim - A.pdf.txtExtracted texttext/plain103542https://repositorio.unifesp.br/bitstreams/a2d95fbd-d289-48d4-b2c1-d366183b65f3/download0b2229aceb3f244c4b756085505f3e41MD52THUMBNAILFernando Russo Costa do Bomfim - A.pdf.jpgFernando Russo Costa do Bomfim - A.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3056https://repositorio.unifesp.br/bitstreams/ec5c73ab-5898-4662-8992-5e666869f568/downloadbc575d07972498ff0f7de5e450b090b3MD5311600/524582024-08-10 11:21:41.693oai:repositorio.unifesp.br:11600/52458https://repositorio.unifesp.brRepositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestbiblioteca.csp@unifesp.bropendoar:34652024-08-10T11:21:41Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false |
| dc.title.pt_BR.fl_str_mv |
Expressão gênica em células osteobláticas humanas após irradiação de laser de baixa intensidade |
| dc.title.alternative.en.fl_str_mv |
Gene expression in human osteoblastic cells after lowlevel laser irradiation |
| title |
Expressão gênica em células osteobláticas humanas após irradiação de laser de baixa intensidade |
| spellingShingle |
Expressão gênica em células osteobláticas humanas após irradiação de laser de baixa intensidade Bomfim, Fernando Russo Costa do [UNIFESP] Lasers Expressão gênica Osteoblastos Lasers Osteoblasts Gene expression |
| title_short |
Expressão gênica em células osteobláticas humanas após irradiação de laser de baixa intensidade |
| title_full |
Expressão gênica em células osteobláticas humanas após irradiação de laser de baixa intensidade |
| title_fullStr |
Expressão gênica em células osteobláticas humanas após irradiação de laser de baixa intensidade |
| title_full_unstemmed |
Expressão gênica em células osteobláticas humanas após irradiação de laser de baixa intensidade |
| title_sort |
Expressão gênica em células osteobláticas humanas após irradiação de laser de baixa intensidade |
| author |
Bomfim, Fernando Russo Costa do [UNIFESP] |
| author_facet |
Bomfim, Fernando Russo Costa do [UNIFESP] |
| author_role |
author |
| dc.contributor.advisor-coLattes.none.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/7592528580581344 |
| dc.contributor.advisorLattes.none.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/2871630525937037 |
| dc.contributor.authorLattes.none.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/7094550148821893 |
| dc.contributor.institution.pt_BR.fl_str_mv |
Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) |
| dc.contributor.author.fl_str_mv |
Bomfim, Fernando Russo Costa do [UNIFESP] |
| dc.contributor.advisor1.fl_str_mv |
Plapler, Helio [UNIFESP] |
| dc.contributor.advisor-co1.fl_str_mv |
Thomasini, Ronaldo Luis [UNIFESP] |
| contributor_str_mv |
Plapler, Helio [UNIFESP] Thomasini, Ronaldo Luis [UNIFESP] |
| dc.subject.por.fl_str_mv |
Lasers Expressão gênica Osteoblastos |
| topic |
Lasers Expressão gênica Osteoblastos Lasers Osteoblasts Gene expression |
| dc.subject.eng.fl_str_mv |
Lasers Osteoblasts Gene expression |
| description |
O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do laser de baixa intensidade, através da expressão gênica, na sinalização de cálcio, mineralização óssea e mecanismos de estresse celular em osteoblastos humanos. Culturas celulares da linhagem osteoblástica hFOB1.19 foram cultivados e distribuídos em dois grupos, controle (C; n=78) e laser (L; n=78) com n=6 por dia do período experimental. Após maturação, as células do grupo L foram irradiadas com laser de baixa intensidade de Arseneto de Gálio e Alumínio, λ=808nm, 200mW de potência nominal, densidade de potência de 200mW/cm2, dose de energia ou fluência de 37J/cm2, área de feixe de 0,02mm2, tempo de 5s, energia de 1J, em um ponto de aplicação, diariamente, durante 13 dias. Em seguida, foram realizadas contagens celulares e o RNA foi extraído, quantificado, submetido a síntese de cDNA e realizada quantificação de Ct comparativo pela técnica de reação em cadeia da polimerase em tempo real. Os valores foram submetidos à análise estatística pelo teste MannWhitney com p<0,05. A análise da contagem celular foi estatisticamente superior no grupo L (37,25x104±22,02) em relação ao grupo controle (22,75x104±7,660) com (p=0,0259) e os valores de 2ΔΔCt apresentaram para os genes S100A6, PMCA, calmodulina e FKBP4 hiper expressão no décimo terceiro dia, enquanto a osteocalcina apresentou hipo expressão e iNOS mantevese constante nos grupos L e C. Sugerese que o mecanismo de ação do laser de baixa intensidade é, possivelmente, dosedependente e acumulativo e estar relacionado às fases do ciclo celular em osteoblastos humanos. |
| publishDate |
2018 |
| dc.date.issued.fl_str_mv |
2018-11-28 |
| dc.date.accessioned.fl_str_mv |
2020-03-25T11:43:55Z |
| dc.date.available.fl_str_mv |
2020-03-25T11:43:55Z |
| dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| format |
doctoralThesis |
| status_str |
publishedVersion |
| dc.identifier.pt_BR.fl_str_mv |
https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=6591262 |
| dc.identifier.uri.fl_str_mv |
https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/52458 |
| dc.identifier.dark.fl_str_mv |
ark:/48912/001300001qdqm |
| dc.identifier.file.none.fl_str_mv |
2018-0399.pdf |
| url |
https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=6591262 https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/52458 |
| identifier_str_mv |
2018-0399.pdf ark:/48912/001300001qdqm |
| dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
| language |
por |
| dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
| eu_rights_str_mv |
openAccess |
| dc.format.none.fl_str_mv |
55 f. |
| dc.coverage.spatial.none.fl_str_mv |
São Paulo |
| dc.publisher.none.fl_str_mv |
Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) |
| publisher.none.fl_str_mv |
Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) |
| dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Repositório Institucional da UNIFESP instname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) instacron:UNIFESP |
| instname_str |
Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) |
| instacron_str |
UNIFESP |
| institution |
UNIFESP |
| reponame_str |
Repositório Institucional da UNIFESP |
| collection |
Repositório Institucional da UNIFESP |
| bitstream.url.fl_str_mv |
https://repositorio.unifesp.br/bitstreams/ea8d3573-50f5-498a-bb63-233a0e2fc412/download https://repositorio.unifesp.br/bitstreams/a2d95fbd-d289-48d4-b2c1-d366183b65f3/download https://repositorio.unifesp.br/bitstreams/ec5c73ab-5898-4662-8992-5e666869f568/download |
| bitstream.checksum.fl_str_mv |
70ff386daad34161a042a8f2f9e51124 0b2229aceb3f244c4b756085505f3e41 bc575d07972498ff0f7de5e450b090b3 |
| bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 |
| repository.name.fl_str_mv |
Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) |
| repository.mail.fl_str_mv |
biblioteca.csp@unifesp.br |
| _version_ |
1863845930085646336 |