Efeitos da oxigenação hiperbárica sobre a vascularização e a morte celular em retalhos cutâneos randômicos em ratos

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2021
Autor(a) principal: Rech, Fabricio Valandro [UNIFESP]
Orientador(a): Fagundes, Djalma José [UNIFESP]
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
dARK ID: ark:/48912/001300001wbj3
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://hdl.handle.net/11600/62178
Resumo: Objetivos: estudar o efeito da oxigenação hiperbárica em retalhos cutâneos randômicos em ratos através da avaliação imunoistoquímica da expressão do VEGF-A para presença de vasos sanguíneos e da Caspase 3 Clivada para identificação das células em apoptose. Métodos: Quarenta ratos (Rattus norvegicus albinus, linhagem Wistar) foram distribuídos em quatro grupos: GE (n = 10), submetidos a anestesia geral, epilação e simulação de OHB; GER (n=10) submetidos a anestesia geral, epilação, ao retalho cutâneo e a simulação de OHB; GE/OHB (n = 10), submetidos a anestesia geral, epilação e as sessões de OHB; e GER/OHB (n = 10), submetidos a anestesia geral, epilação, ao retalho cutâneo e as sessões de OHB. Os animais foram observados durante todo o experimento, durante sete dias. No oitavo dia os animais foram anestesiados, foram colhidas biópsias cutâneas incisionais e, os animais foram eutanasiados. As amostras cutâneas foram processadas para análise imunoistoquímica. Resultados: Os resultados morfométricos indicaram a quantidade de vasos sanguíneos e as células em apoptose presentes nas três regiões dos retalhos. Identificou-se vasos sanguíneos visibilizados pelo VEGF-A, com grande quantidade de vasos em todas as regiões (proximal, media e distal) do retalho de pele referente aos animais pertencentes dos grupos GE e GE/OHB, apresentando aproximadamente a mesma quantidade de vasos sanguíneos nas três regiões estudadas, ou seja, não identificou-se diferenças estatisticamente significantes. Em relação aos animais dos grupos GE/R e GER/OHB, houve diminuição da vascularização em especial na porção mais distal do retalho, em ambos os grupos, porém com quantificação de vasos maior em todas as regiões no grupo GER/OHB (p<0,05). Na quantificação das células reativas a caspase 3 clivada, para identificação das células em apoptose dos grupos GE e GE/OHB houve aproximadamente a mesma quantidade de células reativas, nas três regiões estudadas, ou seja, não se identificou diferenças estatisticamente significantes entre as regiões. Os grupos GER e GER/OHB têm maior número de células em apoptose, sendo que as áreas localizadas na região distal do retalho eram bem evidentes e a quantidade de células em apoptose em maior número do que na região proximal. Notou-se maior número de células em apoptose no grupo GER em todas as regiões observadas quando comparadas ao grupo GER/OHB (p<0,05). Conclusões: A pesquisa permitiu constatar que a oxigenação hiperbárica tem efeito protetor nos retalhos randômicos no modelo experimental proposto, atendendo a seus princípios teóricos. A avaliação microscópica mostrou que a oxigenação hiperbárica esteve associada a maior quantidade de vasos sanguíneos e mostrou efeitos moduladores favoráveis sobre a concentração de figuras de apoptose em todas as regiões do retalho cutâneo randômico.
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Os animais foram observados durante todo o experimento, durante sete dias. No oitavo dia os animais foram anestesiados, foram colhidas biópsias cutâneas incisionais e, os animais foram eutanasiados. As amostras cutâneas foram processadas para análise imunoistoquímica. Resultados: Os resultados morfométricos indicaram a quantidade de vasos sanguíneos e as células em apoptose presentes nas três regiões dos retalhos. Identificou-se vasos sanguíneos visibilizados pelo VEGF-A, com grande quantidade de vasos em todas as regiões (proximal, media e distal) do retalho de pele referente aos animais pertencentes dos grupos GE e GE/OHB, apresentando aproximadamente a mesma quantidade de vasos sanguíneos nas três regiões estudadas, ou seja, não identificou-se diferenças estatisticamente significantes. Em relação aos animais dos grupos GE/R e GER/OHB, houve diminuição da vascularização em especial na porção mais distal do retalho, em ambos os grupos, porém com quantificação de vasos maior em todas as regiões no grupo GER/OHB (p<0,05). Na quantificação das células reativas a caspase 3 clivada, para identificação das células em apoptose dos grupos GE e GE/OHB houve aproximadamente a mesma quantidade de células reativas, nas três regiões estudadas, ou seja, não se identificou diferenças estatisticamente significantes entre as regiões. Os grupos GER e GER/OHB têm maior número de células em apoptose, sendo que as áreas localizadas na região distal do retalho eram bem evidentes e a quantidade de células em apoptose em maior número do que na região proximal. Notou-se maior número de células em apoptose no grupo GER em todas as regiões observadas quando comparadas ao grupo GER/OHB (p<0,05). Conclusões: A pesquisa permitiu constatar que a oxigenação hiperbárica tem efeito protetor nos retalhos randômicos no modelo experimental proposto, atendendo a seus princípios teóricos. A avaliação microscópica mostrou que a oxigenação hiperbárica esteve associada a maior quantidade de vasos sanguíneos e mostrou efeitos moduladores favoráveis sobre a concentração de figuras de apoptose em todas as regiões do retalho cutâneo randômico.Objectives: to study the effect of hyperbaric oxygenation in random cutaneous flaps of in the rats through immunohistochemical evaluation of VEGF-A expression for the presence of blood vessels and Caspase 3 Cleavage to identify cells in apoptosis. Methods: Forty rats (Rattus norvegicus albinus, lineage Wistar) were divided into four groups: GE (n = 10), submitted to general anesthesia, epilation and OHB simulation; GERN (n = 10) submitted to general anesthesia, epilation, skin flap and OHB simulation; GE / OHB (n = 10), submitted to general anesthesia, epilation and OHB sessions; and GER / OHB (n = 10), who underwent general anesthesia, epilation, the skin flap and the OHB sessions. The animals were observed throughout the experiment, for seven days. On the eighth day of the animals were anesthetized, incisional skin biopsies were collected, and the animals were euthanized. Skin samples were processed for immunohistochemical analysis. Results: The morphometric results indicated the amount of blood vessels and cells in apoptosis present in the three regions of the flaps. Blood vessels visualized by VEGF-A were identified, with a large number of vessels in all regions (proximal, middle and distal) of the skin flap referring to animals belonging to the GE and GE / OHB groups, presenting approximately the same number of vessels blood samples in the three regions studied, that is, no statistically significant differences were identified. In relation to the animals of the GE / R and GER / OHB groups, there was a decrease in vascularization, especially in the most distal portion of the flap, in both groups, however with greater vessel quantification in all regions in the GER / OHB group (p < 0.05). In the quantification of reactive cells, the cleaved caspase 3, for identification of apoptosis cells in the GE and GE / OHB groups, there was approximately the same amount of reactive cells in the three regions studied, that is, there were no statistically significant differences between the regions. The GER and GER / OHB groups have a higher number of cells undergoing apoptosis, and the areas located in the distal region of the flap were quite evident and the number of cells undergoing apoptosis in greater numbers than in the proximal region. A greater number of apoptosis cells were noted in the GER group in all regions observed when compared to the GER / OHB group (p <0.05). Conclusions: The research showed that hyperbaric oxygenation has a protective effect on random flaps in the proposed experimental model, in accordance with its theoretical principles. Microscopic evaluation showed that hyperbaric oxygenation was associated with a greater number of blood vessels and showed favorable modulating effects on the concentration of apoptosis figures in all regions of the random skin flap.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)00194 f.RECH, F. V. Efeitos da oxigenação hiperbárica sobre a vascularização e a morte celular em retalhos cutâneos randômicos em ratos. São Paulo, 2021. 94 f. Tese (Doutorado em Ciência Cirúrgica Interdisciplinar) – Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo, São Paulo, 2021.https://hdl.handle.net/11600/62178ark:/48912/001300001wbj3porUniversidade Federal de São Pauloinfo:eu-repo/semantics/openAccessOxigenação hiperbáricaRetalho cirúrgicoApoptoseNecroseRatosEfeitos da oxigenação hiperbárica sobre a vascularização e a morte celular em retalhos cutâneos randômicos em ratosEffects of hyperbaric oxygenation on vascularization and cell death in random skin flaps in rats.info:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESPEscola Paulista de Medicina (EPM)Ciência Cirúrgica InterdisciplinarCirurgia ExperimentalOxigenação HiperbáricaORIGINALTESE DOUTORADO FABRICIO VALANDRO RECH .pdfTESE DOUTORADO FABRICIO VALANDRO RECH 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InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestbiblioteca.csp@unifesp.bropendoar:34652024-07-26T10:21:32Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo 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description Objetivos: estudar o efeito da oxigenação hiperbárica em retalhos cutâneos randômicos em ratos através da avaliação imunoistoquímica da expressão do VEGF-A para presença de vasos sanguíneos e da Caspase 3 Clivada para identificação das células em apoptose. Métodos: Quarenta ratos (Rattus norvegicus albinus, linhagem Wistar) foram distribuídos em quatro grupos: GE (n = 10), submetidos a anestesia geral, epilação e simulação de OHB; GER (n=10) submetidos a anestesia geral, epilação, ao retalho cutâneo e a simulação de OHB; GE/OHB (n = 10), submetidos a anestesia geral, epilação e as sessões de OHB; e GER/OHB (n = 10), submetidos a anestesia geral, epilação, ao retalho cutâneo e as sessões de OHB. Os animais foram observados durante todo o experimento, durante sete dias. No oitavo dia os animais foram anestesiados, foram colhidas biópsias cutâneas incisionais e, os animais foram eutanasiados. As amostras cutâneas foram processadas para análise imunoistoquímica. Resultados: Os resultados morfométricos indicaram a quantidade de vasos sanguíneos e as células em apoptose presentes nas três regiões dos retalhos. Identificou-se vasos sanguíneos visibilizados pelo VEGF-A, com grande quantidade de vasos em todas as regiões (proximal, media e distal) do retalho de pele referente aos animais pertencentes dos grupos GE e GE/OHB, apresentando aproximadamente a mesma quantidade de vasos sanguíneos nas três regiões estudadas, ou seja, não identificou-se diferenças estatisticamente significantes. Em relação aos animais dos grupos GE/R e GER/OHB, houve diminuição da vascularização em especial na porção mais distal do retalho, em ambos os grupos, porém com quantificação de vasos maior em todas as regiões no grupo GER/OHB (p<0,05). Na quantificação das células reativas a caspase 3 clivada, para identificação das células em apoptose dos grupos GE e GE/OHB houve aproximadamente a mesma quantidade de células reativas, nas três regiões estudadas, ou seja, não se identificou diferenças estatisticamente significantes entre as regiões. Os grupos GER e GER/OHB têm maior número de células em apoptose, sendo que as áreas localizadas na região distal do retalho eram bem evidentes e a quantidade de células em apoptose em maior número do que na região proximal. Notou-se maior número de células em apoptose no grupo GER em todas as regiões observadas quando comparadas ao grupo GER/OHB (p<0,05). Conclusões: A pesquisa permitiu constatar que a oxigenação hiperbárica tem efeito protetor nos retalhos randômicos no modelo experimental proposto, atendendo a seus princípios teóricos. A avaliação microscópica mostrou que a oxigenação hiperbárica esteve associada a maior quantidade de vasos sanguíneos e mostrou efeitos moduladores favoráveis sobre a concentração de figuras de apoptose em todas as regiões do retalho cutâneo randômico.
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