Avaliação morfológica, imunoistoquímica e molecular da musculatura de uretra de ratas após trauma induzido e estimulação elétrica de assoalho pélvico

• Ano de defesa: 2016
• Autor(a) principal: Franco, Gisela Rosa [UNIFESP]
• Orientador(a): Castro, Rodrigo de Aquino [UNIFESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300002gn62
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: Incontinência urinária; Uretra; Vagina; terapia por estimulação elétrica
• Palavras-chave em Inglês: Incontinence; Uretra; Vagina; Therapy electrical stimulation
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=3633001; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/47047

Introdução: danos aos componentes da uretra, com consequente redução da pressão intra-uretral, estão associados à fisiopatologia da incontinência urinária. O trauma do assoalho pélvico induzido em animais provoca hipóxia, isquemia e desarranjo estrutural dos tecidos uretrais. A eletroestimulação é uma modalidade fisioterapéutica capaz de aumentar a pressão intra-uretral, tendo sua efetividade comprovada no tratamento da incontinência urinária. Contudo, as modificações imunohistoquímicas e moleculares da uretra decorrentes do trauma do assoalho pélvico por 12h, bem como do efeito da corrente elétrica utilizada na recuperação do tecido lesado, ainda são desconhecidas. Desta forma, propusemo-nos a avaliar os efeitos do trauma do assoalho pélvico nos componentes da uretra de ratas em diferentes períodos após o trauma, e os efeitos da corrente elétrica nos componentes da uretra de ratas aplicada após o trauma. Métodos: foram extraídas as uretras de 5 grupos de ratas: 1) controle sem trauma; 2) com trauma induzido com sacrifício das ratas e extração das uretras após 1 hora do trauma; 3) com trauma induzido com sacrifício das ratas e extração das uretras após 7 dias do trauma; 4) com trauma induzido com sacrifício das ratas e extração das uretras após 30 dias do trauma; 5) com trauma induzido, tratamento com eletroestimulação, sacrifício das ratas e extração das uretras após 30 dias do trauma. O modelo de trauma do assoalho pélvico ocorreu por meio de dilatação vaginal (DV), mantida por 12 horas intermitentes. O tratamento com eletroestimulação foi realizado por meio de sonda endovaginal, totalizando 12 sessões alternadas durante 30 dias. As amostras das uretras foram processadas e estudadas quanto à (1) morfologia e estrutura dos tecidos conjuntivo, nervoso e vascular, por meio das análises histológicas e imunohistoquímicas; (2) expressão de genes e proteínas envolvidos no metabolismo dos componentes da uretra, por meio de R T- qPCR e Western Blotting respectivamente. Resultados: uma hora após a DV a análise histológica da uretra mostrou consistente desorganização tecidual. Nesse mesmo período observamos aumento significante da expressão dos genes VEGF, NGF, COL1a1 e Mki67 (p=0,004, p=0,009 e p=0,03, respectivamente). Sete dias após a DV a expressão do gene COL1a1 permaneceu aumentada (p = 0,009), e a expressão do gene COL3a1 passou a ter aumento em relação ao grupo controle (p = 0,009). A imunoexpressão do COL3 também aumentou em relação ao grupo controle (p = 0,03). O grupo com 30 dias após o trauma por DV continuou a apresentar aumento da imunoexpressão de COL3a1 (p = 0,02), em relação ao grupo controle. O grupo que recebeu tratamento com eletroestimulação após a DV apresentou aumento da expressão gênica de COL1a1 em relação ao grupo 30 dias após o trauma (p = 0,036). Conclusão: identificamos mudanças agudas e alterações persistentes no perfil gênico, morfológico e imunohistoquímico nos componentes do tecido uretral com o modelo de trauma por 12h intermitentes, que revelam um tecido em recuperação 30 dias após a lesão. Observamos que o tratamento com eletroestimulação não beneficiou a recuperação dos componentes da matriz extracelular, bem como os fatores de crescimento VEGF e NGF.