Análisis inmunohistoquímico del fenotipo celular del retinoblastoma utilizando marcadores de células neurales y gliales

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2015
Autor(a) principal: Orellana de Alonzo, María Eugenia [UNIFESP]
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
dARK ID: ark:/48912/001300001r6bt
Idioma: spa
Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Neoplasias da retina
Genética
Retinoblastoma
Neuroglia
Células tumorais cultivadas
Imunohistoquímica
Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=2735239
https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/47722
Resumo: El retinoblastoma es el tumor maligno intraocular más frecuente en la edad pediátrica. Este estudio tiene la finalidad de determinar el origen del retinoblastoma en una serie de casos y correlacionar estos hallazgos con factores pronósticos histopatológicos conocidos. Métodos: Treinta y nueve casos de retinoblastoma fueron diagnosticados y analizados con inmunohistoquímica, utilizando marcadores de anticuerpos monoclonales contra células retinianas inmaduras (SOX-2: SRY-box containing gene 2), contra células retinianas maduras (MAP2: microtubule-associated protein 2) y contra células gliales maduras (GFAP: proteína acido gliofibrilar). Se evaluaron las características histopatológicas de los casos: grado de diferenciación, presencia de siembras vítreas, e invasión a coroides/esclera, nervio óptico y cámara anterior. Dos líneas celulares conocidas de retinoblastoma (WERI-1 y Y79) también fueron estudiadas, utilizando los tres marcadores mencionados. Resultados: La expresión de SOX-2 fue positiva en 97,4% de los casos de retinoblastoma, mientras que el marcador MAP2 se expresó positivamente en 59% de los mismos. La inmunotinción para GFAP fue positiva, exclusivamente en los astrocitos estromales reactivos. No hubo correlación entre los factores pronósticos histopatológicos y los marcadores inmunohistoquímicos evaluados. Las líneas celulares mostraron positividad para SOX-2 (90% en WERI-1 y 70% en Y79), positividad del 90% para MAP2 en las células WERI-1 e Y79 y, negatividad para GFAP en ambas líneas celulares. Conclusión: La mayoría de los retinoblastomas de esta serie expresaron marcadores de células neurales inmaduras, más que marcadores de células neurales maduras. Las líneas celulares WERI-1 y Y79 mostraron inmunomarcaje en porcentajes similares para ambos marcadores neurales. Por tanto, estos resultados confirman el origen neural de este tumor en particular. En adición, la ausencia de positividad a GFAP en las células tumorales descarta una diferenciación astrocitaria en el retinoblastoma.
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Se evaluaron las características histopatológicas de los casos: grado de diferenciación, presencia de siembras vítreas, e invasión a coroides/esclera, nervio óptico y cámara anterior. Dos líneas celulares conocidas de retinoblastoma (WERI-1 y Y79) también fueron estudiadas, utilizando los tres marcadores mencionados. Resultados: La expresión de SOX-2 fue positiva en 97,4% de los casos de retinoblastoma, mientras que el marcador MAP2 se expresó positivamente en 59% de los mismos. La inmunotinción para GFAP fue positiva, exclusivamente en los astrocitos estromales reactivos. No hubo correlación entre los factores pronósticos histopatológicos y los marcadores inmunohistoquímicos evaluados. Las líneas celulares mostraron positividad para SOX-2 (90% en WERI-1 y 70% en Y79), positividad del 90% para MAP2 en las células WERI-1 e Y79 y, negatividad para GFAP en ambas líneas celulares. Conclusión: La mayoría de los retinoblastomas de esta serie expresaron marcadores de células neurales inmaduras, más que marcadores de células neurales maduras. Las líneas celulares WERI-1 y Y79 mostraron inmunomarcaje en porcentajes similares para ambos marcadores neurales. Por tanto, estos resultados confirman el origen neural de este tumor en particular. En adición, la ausencia de positividad a GFAP en las células tumorales descarta una diferenciación astrocitaria en el retinoblastoma. Retinoblastoma é o tumor maligno intra-ocular mais comum na infância. Este estudo visa determinar a origem do retinoblastoma em um número de casos e correlacionar essos achados com fatores prognósticos e histopatológicos conhecidos. Métodos: Trinta e nove casos de retinoblastoma foram diagnosticados e analisados com imunohistoquímica usando marcadores de anticorpos monoclonais contra as células de retina imaturas (SOX-2: SRY-box containing gene 2), contra as células da retina maturas (MAP2: microtubule-associated protein 2) e contra as células gliais maturas (GFAP: glial fibrillar acidic protein). Foram avaliadas características microscópicas dos casos (grau de diferenciação, presença de semeadura vítrea, invasão de coróide / esclera, nervo óptico e câmara anterior). Duas linhas celulares de retinoblastoma (WERI-1 e Y79) também foram testadas, utilizando os três marcadores. Resultados: A expressão de SOX-2 foi positiva em 97,4% dos casos de retinoblastoma, enquanto MAP2 foi positivo em 59% dos casos. GFAP foi apenas positivo no estroma (astrócitos reativos). Não houve correlação entre preditores histopatológicos e marcadores imunohistoquímicos avaliados. As linhagens celulares mostraram positividade para SOX-2 (90% em WERI-1 e 70% das células Y79). Ambas as linhagens celulares se mostraram fortemente positivas con MAP2 (90%), enquanto não houve expressão de GFAP em nenhuma das linhas celulares estudadas. Conclusões: A maioria das células de retinoblastoma desta série de casos expressa marcadores de células retinianas imaturas, além de marcadores de células maduras. As linhas celulares Y79 e WERI-1 apresentaram imunomarcação para ambos os marcadores neurais em percentagens semelhantes a dos casos avaliados. Desta manera, estes resultados confirmam a origem neural do tumor em particular. Alem disso, a ausência de células positivas para GFAP no tumor descarta diferenciação de astrócitos em retinoblastoma. Retinoblastoma is the most common intraocular malignant tumor in childhood yet its origin remains unclear. It has been shown that retinoblastoma cells express both mature and immature retinal markers. An immunohistochemical analysis of the cell origin of this particular tumor may yield valuable insight into disease progression. This study aims to determine the origin of retinoblastoma in a large case series and correlate these findings with histopathological prognostic factors. Methods: Thirty nine retinoblastoma cases were histopathologicaly diagnosed and further analyzed by immunohistochemistry using monoclonal antibodies against immature retinal cell marker (SOX-2: SRY-box containing gene 2), mature retinal cell marker (MAP2: microtubule-associated protein 2), and glial cell marker (GFAP: glial fibrillary acidic protein). Histopathological features, including pattern of growth, differentiation, vitreous seeding, choroidal/scleral, optic nerve, and anterior chamber invasion, were evaluated. Two retinoblastoma cell lines were studied using immunocytochemistry staining, with the same markers. Results: Expression of SOX-2 was strong in 97.4% of retinoblastoma cases, while MAP-2 was expressed in 59% of cases. Immunostaining for GFAP was consistent across all cases; positive exclusively in reactive stromal astrocytes interspersed amongst tumor cells. There was no correlation between histopathological prognostic factors and the immunohistochemical markers. Retinoblastoma cell lines showed strong positivity for SOX2 (WERI-1cells 90% and in 70% of Y79 cells). MAP2 was positive in WERI-1 cells and Y79 cells (90%). GFAP was completely negative in both cell lines. Conclusion: These results suggest that the majority of retinoblastomas and the RB cell lines expressed immature rather than mature retinal cell markers. Therefore, these results indicate a neural origin of this particular tumor. In addition, the absence of GFAP positivity in tumor cells further suggests a retinal cell origin of retinoblastoma.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Burnier Júnior, Miguel Noel Nascente [UNIFESP]http://lattes.cnpq.br/4487521900423032Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Orellana de Alonzo, María Eugenia [UNIFESP]2018-07-30T11:45:03Z2018-07-30T11:45:03Z2015-03-31info:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion132 f.application/pdfhttps://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=2735239ORELLANA DE ALONZO, María Eugenia. Análisis inmunohistoquímico del fenotipo celular del retinoblastoma utilizando marcadores de células neurales y gliales. 2015. 132 f. Tese (Doutorado em Oftalmologia) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2015.https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/47722ark:/48912/001300001r6btspaSão Pauloinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESP2025-05-28T10:45:31Zoai:repositorio.unifesp.br:11600/47722Repositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestbiblioteca.csp@unifesp.bropendoar:34652025-05-28T10:45:31Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false
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