Análise dos genes CYP1A2, CYP3A4 e CYP3A5 na resposta à quimioterapia, no processo de tumorigênese e no microambiente metastático do osteossarcoma

• Ano de defesa: 2016
• Autor(a) principal: Paolillo, Alini Trujillo [UNIFESP]
• Orientador(a): Toledo, Silvia Regina Caminada de [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300002h6c3
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: Osteossarcoma; Citocromo p-450; Expressão gênica; Linhagens de osteossarcoma
• Palavras-chave em Inglês: Osteosarcoma; Cytochrome p-450; Gene expression; Osteosarcoma cell line
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=2972409; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/47485

Introdução: O osteossarcoma (OS) é um tumor ósseo maligno, derivado do mesênquima primitivo e entre os tumores ósseos é o que apresenta maior incidência em adolescentes. O tratamento de OS continua o mesmo desde a década de 1980 e as taxas de sobrevidas não melhoraram desde então, assim,o investimento científico tem sido em pesquisa translacional concentrado na identificação de conhecimento biológico do tumor e identificação de novos alvos terapêuticos. Objetivo: Investigar a expressão de genes CYP (Citocromo P-450) em OS e avaliar se esses genes tem algum papel na resposta ao tratamento e no microambiente para estabelecimento do OS, visto que as enzimas CYP medeiam a ativação metabólica de pré-carcinógenos e participam da ativação e inativação de drogas quimioterápicas. O estudo também teve como objetivo a investigação da modulação dessa expressão após o tratamento de linhagens celulares de OS com quimioterápicos. Métodos: As expressões dos genes CYP1A2, CYP3A4 e CYP3A5 foram investigadas nas amostras dos pacientes, totalizando 135 amostras provenientes de biópsia (pré-quimioterapia), cirurgia de ressecção tumoral (pós-quimioterapia), osso adjacente ao tumor (tecido não maligno), metástase pulmonar e pulmão adjacente a metástase (tecido não maligno). Como amostras calibradoras foram utilizados tecidos ósseo e pulmonar, de indivíduos saudáveis e RNAs de pulmão, de indivíduo saudável e adquirido comercialmente. As expressões dos genes CYP também foram investigadas nas linhagens celulares de OS (Saos-2, MG-63, KHOS, U2-OS e M-OS), assim como a modulação dessa expressão quando as células foram desafiadas com drogas quimioterápicas utilizadas no tratamento do OS (cisplatina, doxorrubicina e metotrexato) com exposições individuais e em conjunto. Resultados: Observou-se um aumento de expressão de CYP1A2 nas amostras de pulmão adjacente a metástase em relação ao calibrador desse tecido (p=0.0256) e uma baixa expressão de CYP3A4 nas amostras de biópsia em relação ao calibrador desse tecido (p=0.0314). Além disso, altas expressões de CYP1A2 e CYP3A4 em amostras de cirurgia foram associadas com melhor sobrevida livre de evento (p=0.0244) e a bons respondedores (p=0.0484), respectivamente; e altas expressões de CYP1A2, CYP3A4 e CYP3A5 foram associadas com eventos de toxicidade. Por fim, foi observada uma modulação na expressão desses genes nas linhagens celulares tratadas com as drogas quimioterápicas. Conclusão: Os achados deste estudo sugerem que os genes CYP desempenham um importante papel tanto na tumorigênese deste tumor, em sítios primário e metastático, quanto na resposta ao tratamento em OS.