Efeitos inibidores de proteases extraídos de plantas, EcTI, BbKI e CrataBL, sobre o desenvolvimento da abiogênese
| Ano de defesa: | 2013 |
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Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
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Resumo: | Embora a angiogenese seja essencial para a progressão de muitas doenças, como o câncer, existem outras condições patológicas, como isquemia, nas quais está reduzida. Assim, são necessários ferramentas terapêuticas que atuem sobre este processo. Apesar.· do pouco conhecimento sobre o controle da angiogênese, sabe-se que o microambiente tecidual e várias proteases exercem grande influência sobre esse evento. Dessa forma, o " objetivo desse trabalho foi investigar o efeito de inibidores de proteases, EcTI, rBbKI e CrataBL, purificados de plantas, sobre os processos que levam à angiogênese. Os resultados indicaram que EcTI 100 urnol/L reduziu 35% da viabilidade de células HUVEC, rBbKI reduziu em 65% e CrataBL aumentou em quase 50%. Além disso, apenas 10 umol/L desta proteína, em ensaio in vitro de formação de tubo, foi capaz de aumentar em 150% o número de estruturas angiogênicas, em contraste com EcTI 100 umol/L e rBbKI 60 urnol/L que reduziram em 30% e 70 %, respectivamente. Além disso, CrataBL atua como um potente quimioatraente, operando como compostos semelhantes ao VEGF, aumentando a migração e invasão celular em ensaio in vitro, enquanto EcTI e rBbKI e reduziram a mobilidade celular. Tomados em conjunto, estes resultados indicam o potencial uso terapêutico de BbKI e EcTI em doenças onde ocorre uma exacerbação do processo angiogênico, tal como o câncer; e CrataBL em doenças relacionadas com a deficiência de perfusão de sangue, como a isquemia e os infartos. |
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Os resultados indicaram que EcTI 100 urnol/L reduziu 35% da viabilidade de células HUVEC, rBbKI reduziu em 65% e CrataBL aumentou em quase 50%. Além disso, apenas 10 umol/L desta proteína, em ensaio in vitro de formação de tubo, foi capaz de aumentar em 150% o número de estruturas angiogênicas, em contraste com EcTI 100 umol/L e rBbKI 60 urnol/L que reduziram em 30% e 70 %, respectivamente. Além disso, CrataBL atua como um potente quimioatraente, operando como compostos semelhantes ao VEGF, aumentando a migração e invasão celular em ensaio in vitro, enquanto EcTI e rBbKI e reduziram a mobilidade celular. Tomados em conjunto, estes resultados indicam o potencial uso terapêutico de BbKI e EcTI em doenças onde ocorre uma exacerbação do processo angiogênico, tal como o câncer; e CrataBL em doenças relacionadas com a deficiência de perfusão de sangue, como a isquemia e os infartos. Although angiogenesis is essential for progression of several diseases, like cancer, there are other pathological conditions, such ischemia, where angiogenesis is reduced. Therefore, compounds that act on this process are needed as therapeutic tools. Despite little knowledge about angiogenesis control, data show that tissue microenvironment and several proteases exert great influence in this process. This work aimed to investigate the effect of protease inhibitors, EcTI, rBbKI and CrataBL, purified from different plants, on the process that lead to angiogenesis, like migration invasion, adhesion and tube formation. The results indicated that CrataBL 100 umol/L increase in almost 50% the endothelial cell (HUVEC) viability, whereas EcTI and rBbKI, in same concentration, reduced in 35% and 65% respectively. In addition, only 10 umol/L of CrataBL, in in vitro tube formation assay, was able to increase in 150% the number of angiogenic structures; the opposite of EcTI (100 umol/L), as well as rBbKI (60 umol/L) that reduced 30% and 70% respectively. Moreover, CrataBL acts as a potent chemoattractant, operating as VEGF-like compounds, increasing cell migration and invasion in in vitro assay; while EcTI and rBbKI reduced the cell mobility. The investigation of signaling pathways, indicate that the Src-FAK pathway is involved with the effects of EcTI and CrataBL. HUVEC cells activate adaptive process to the stress caused by EcTI, like activation of Akt, related to cell survival. Already CrataBL demonstrated cytoprotective effect, activating MAPK pathway, like p38 and ERK. Taken together, these results indicate the potential therapeutic use of BbKI and EcTI in diseases where there is an exacerbation of the angiogenic process, such as cancer; and CrataBL, in diseases related to deficiency of blood perfusion, like ischemia.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)CNPq:130055/2012-3FAPESP: 2009/53766-5FAPESP: 2010/19045-6148 f.BATISTA, Fabricio Pereira. Efeitos inibidores de proteases extraídos de plantas, EcTI, BbKI e CrataBL, sobre o desenvolvimento da agiogenese. 2013. 148 f. Dissertação (Mestrado em Biologia Molecular) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2013.http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/48141https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=149172ark:/48912/001300001s9jvporUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)info:eu-repo/semantics/openAccessInibidores de proteasesIsquemiaNeoplasiasSinalização celularCrataBLECTIBbKIEfeitos inibidores de proteases extraídos de plantas, EcTI, BbKI e CrataBL, sobre o desenvolvimento da abiogêneseEffects of the plants protease inhibitors, EcTI, BbKI and CrataBL, on the development of angiogenesisinfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESPSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)Ciências Biológicas (Biologia Molecular)Ciências biológicasBioquímicaORIGINALFabricio Pereira Batista.pdfapplication/pdf4068922https://repositorio.unifesp.br/bitstreams/6c712c0e-f922-4d41-98e0-4b0a8a65ddf3/download4ebce555430f62ac6c0477b84c4c7585MD5111600/481412024-09-05 12:30:21.989oai:repositorio.unifesp.br:11600/48141https://repositorio.unifesp.brRepositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestbiblioteca.csp@unifesp.bropendoar:34652024-09-05T12:30:21Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false |
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