Peptídeo ligante à proteína catiônica de eosinófilo no diagnóstico da esofagite eosinofílica e seu potencial terapêutico na alergia

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Souza, Tafarel Andrade de
• Orientador(a): Goulart Filho, Luiz Ricardo
• Banca de defesa: Mineo, José Roberto, Cunha Junior, Jair Pereira da, Castro, Ana Paula Beltran Moschione
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Uberlândia
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-graduação em Genética e Bioquímica
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Proteína catiônica eosinofílica; Phage display; Diagnóstico; Esofagite eosinofílica; IgE-independente; Eosinophilic cationic protein; Diagnostic; Eosinophilic esophagitis; IgE-independent
• Área do conhecimento CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA::GENETICA HUMANA E MEDICA
• Link de acesso: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/28613; http://dx.doi.org/10.14393/ufu.te.2019.2240

A esofagite eosinofílica (EEo) é uma condição inflamatória do esôfago caracterizada pela presença de um grande número de eosinófilos. Atualmente, o diagnóstico da EEo é baseado em procedimentos endoscópicos invasivos para o exame histopatológico. Nesse contexto, nosso objetivo foi selecionar e validar peptídeos com potencial para serem usados na detecção de EEo. Para tanto, foi realizada uma análise comparativa da proteômica, utilizando espectrometria de massa (LC-MS/MS), de biópsias esofágicas de pacientes pediátricos com esofagite eosinofílica, doença do refluxo gastroesofágico e pacientes controle, que mostrou a proteína catiônica eosinofílica (PCE) regulada positivamente em pacientes EEo. Em seguida, a tecnologia de Phage Display foi utilizada para selecionar peptídeos contra a PCE e doze clones de fagos foram selecionados após três ciclos de biopanning. Destes clones, o clone de fago (E5) com maior reatividade contra a PCE foi capaz de distinguir, no muco esofágico, a esofagite eosinofílica, doença do refluxo gastroesofágico e pacientes controles através do ensaio ELISA em 94 pacientes pediátricos, alcançando a sensibilidade de 84,62%, especificidade de 82,72%, e AUC 0,84. Este é o primeiro estudo que demonstra a detecção da proteína catiônica eosinofílica usando peptídeos selecionados por phage display e pode ser uma ferramenta de diagnóstico útil para a detecção de pacientes EEo. Além disso, na abordagem terapêutica, o peptídeo (E5) demonstrou ser capaz de diminuir a degranulação independente de IgE. O alinhamento desse peptídeo com proteínas importantes de granulócitos, principalmente de mastócitos, reforçam a possibilidade desse peptídeo mimetizar receptores importantes para a degranulação de mastócitos. E, após a análise pela espectrometria de massa (LC-MS/MS) do sobrenadante da condição de degranulação independente de IgE, foram encontradas 79 proteínas exclusivas, as quais fornecem informações importantes para um melhor entendimento da alergia mediada por mastócitos, bem como o estudo de alvos biológicos que sirvam como estratégias diagnósticas e/ou terapêuticas no futuro.