Caracterização da peçonha de Bothrops pubescens através de técnicas proteômicas e avaliação da sua toxicidade em músculo biventer cervicis de pintainho.

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2022
Autor(a) principal: Rangel, Darlene Lopes lattes
Orientador(a): Pinto, Paulo Marcos lattes
Banca de defesa: Vinade, Lucia Helena do Canto lattes, Santos, Tiago Gomes dos lattes, Ligabue-Braun, Rodrigo lattes
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal do Pampa
Programa de Pós-Graduação: Doutorado em Ciências Biológicas
Departamento: Campus São Gabriel
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Serpentes
Peçonha
Espectrometria de massas
Toxinologia
Snakes
Venom
Mass spectrometry
Toxinology
Área do conhecimento CNPq:
CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS
Link de acesso: https://repositorio.unipampa.edu.br/jspui/handle/riu/9206
Resumo: O gênero Bothrops compreende várias espécies de serpentes que ocorrem no continente americano, do México até a Argentina. Envenenamento por serpentes do gênero Bothrops é caracterizado por efeitos locais, incluindo hemorragia, edema, dor e mionecrose, assim como efeitos sistêmicos como coagulopatias e falha renal. A composição do veneno de algumas espécies do gênero Bothrops já é conhecida através da venômica ou indiretamente através de estudos transcriptômicos. Bothrops pubescens é uma serpente peçonhenta de porte médio que ocorre restritamente no Rio Grande do Sul e Uruguai. Foi observado que a dieta desta serpente consiste em lacraias, anfíbios, lagartos, serpentes, mamíferos e aves e há variação ontogenética na dieta. Considerando o grande potencial das moléculas encontradas em peçonhas do gênero Bothrops, a ocorrência da espécie B. pubescens exclusivamente no Bioma Pampa e a falta de informações sobre a sua peçonha, esse estudo visou elucidar a composição da peçonha de B. pubescens através de técnicas proteômicas para uma completa caracterização da peçonha, assim como analisar o seu efeito sobre a junção neuromuscular biventer cervicis de pintainho. Para isso, realizamos análises de BUP, TDP e nTDP. Para a análise toxinológica o músculo biverter cervicis de pintainho foi exposto a peçonha de B. pubescens em diferentes concentrações. Com a técnica de BUP foram identificados 89 grupos proteicos pertencentes a 13 famílias de toxinas, já com a técnica de TDP foram identificadas 40 proteoformas únicas pertencentes a 6 famílias de toxinas. Também identificamos um complexo multi-proteofórmico de uma LAAO utilizando nTDP. Na análise da toxicidade da peçonha demonstramos que a peçonha de B. pubescens em altas concentrações é capaz de causar bloqueio neuromuscular total e irreversível frente a preparações isoladas de ave, já em concentrações reduzidas, produz um bloqueio parcial e reversível, demonstrando a sua toxicidade para o sistema nervoso somático.
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Envenenamento por serpentes do gênero Bothrops é caracterizado por efeitos locais, incluindo hemorragia, edema, dor e mionecrose, assim como efeitos sistêmicos como coagulopatias e falha renal. A composição do veneno de algumas espécies do gênero Bothrops já é conhecida através da venômica ou indiretamente através de estudos transcriptômicos. Bothrops pubescens é uma serpente peçonhenta de porte médio que ocorre restritamente no Rio Grande do Sul e Uruguai. Foi observado que a dieta desta serpente consiste em lacraias, anfíbios, lagartos, serpentes, mamíferos e aves e há variação ontogenética na dieta. Considerando o grande potencial das moléculas encontradas em peçonhas do gênero Bothrops, a ocorrência da espécie B. pubescens exclusivamente no Bioma Pampa e a falta de informações sobre a sua peçonha, esse estudo visou elucidar a composição da peçonha de B. pubescens através de técnicas proteômicas para uma completa caracterização da peçonha, assim como analisar o seu efeito sobre a junção neuromuscular biventer cervicis de pintainho. Para isso, realizamos análises de BUP, TDP e nTDP. Para a análise toxinológica o músculo biverter cervicis de pintainho foi exposto a peçonha de B. pubescens em diferentes concentrações. Com a técnica de BUP foram identificados 89 grupos proteicos pertencentes a 13 famílias de toxinas, já com a técnica de TDP foram identificadas 40 proteoformas únicas pertencentes a 6 famílias de toxinas. Também identificamos um complexo multi-proteofórmico de uma LAAO utilizando nTDP. Na análise da toxicidade da peçonha demonstramos que a peçonha de B. pubescens em altas concentrações é capaz de causar bloqueio neuromuscular total e irreversível frente a preparações isoladas de ave, já em concentrações reduzidas, produz um bloqueio parcial e reversível, demonstrando a sua toxicidade para o sistema nervoso somático.The Bothrops genus comprises several species of snakes that occur in the American continent, from Mexico to Argentina. Envenomation by snakes of the Bothrops genus is characterized by local effects, including hemorrhage, swelling, pain, and myonecrosis, as well as systemic effects such as coagulopathies and renal failure. The venom composition of some Bothrops species is already known through venomics or indirectly through transcriptomic studies. Bothrops pubescens is a medium-sized venomous snake that occurs exclusively in Rio Grande do Sul and Uruguay. It was observed that its diet consists of centipedes, amphibians, lizards, snakes, mammals and birds and there is ontogenetic variation in the diet. Considering the great potential of the molecules found in Bothrops venoms, the occurrence of B. pubescens exclusively in the Pampa Biome and the lack of information about its venom, this study aimed to elucidate the composition of the venom of B. pubescens through proteomic techniques, as well as to analyze its effect on the chick biventer cervicis neuromuscular junction. For this, we performed BUP, TDP and nTDP analyses. For toxinological analysis, chick biverter cervicis was exposed to B. pubescens venom at different concentrations. With the BUP technique, 89 protein groups belonging to 13 families of toxins were identified, while with the TDP technique, 40 unique proteoforms belonging to 6 families of toxins were identified. We also identified a multi-proteoform complex of a LAAO using nTDP. In the analysis of the venom’s toxicity, we demonstrated that the venom of B. pubescens in high concentrations is capable of causing total and irreversible neuromuscular blockade against isolated preparations of birds, but in reduced concentrations, it produces a partial and reversible blockade, demonstrating its toxicity for the somatic nervous systemporUniversidade Federal do PampaDoutorado em Ciências BiológicasUNIPAMPABrasilCampus São GabrielCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICASSerpentesPeçonhaEspectrometria de massasToxinologiaSnakesVenomMass spectrometryToxinologyCaracterização da peçonha de Bothrops pubescens através de técnicas proteômicas e avaliação da sua toxicidade em músculo biventer cervicis de pintainho.info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIPAMPAinstname:Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA)instacron:UNIPAMPAORIGINALCaracterização da peçonha de Bothrops pubescens através de técnicas.pdfCaracterização da peçonha de Bothrops pubescens através de técnicas.pdfapplication/pdf2725352https://repositorio.unipampa.edu.br/bitstreams/2d033a84-3f64-4e0a-8d83-29086b45a933/downloadb8b3c58f3eb3f2c89bde37d108bd8620MD51trueAnonymousREADLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81854https://repositorio.unipampa.edu.br/bitstreams/601691f4-8a1d-4e14-ac08-a2538805600c/downloadc9ad5aff503ef7873c4004c5b07c0b27MD52falseAnonymousREADriu/92062024-05-21 20:45:31.796open.accessoai:repositorio.unipampa.edu.br:riu/9206https://repositorio.unipampa.edu.brRepositório InstitucionalPUBhttp://dspace.unipampa.edu.br:8080/oai/requestsisbi@unipampa.edu.bropendoar:2024-05-21T20:45:31Repositório Institucional da UNIPAMPA - Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA)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