Carotenoides por cultivo submerso de Rhodotorula Glutinis CCT-2186: estratégias de incremento da produção e aplicações em produtos cosméticos e alimentícios

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2024
Autor(a) principal: Lima, Julio Gabriel Oliveira de [UNESP]
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://hdl.handle.net/11449/257158
http://lattes.cnpq.br/0253222903740023
https://orcid.org/0000-0001-7403-5191
Resumo: Os carotenoides são colorantes naturais responsáveis pelas cores vibrantes, amarelo, laranja e vermelho em uma variedade de alimentos, principalmente, frutas e vegetais. Porém, esses compostos podem também ser produzidos por vias biotecnológicas pelos microrganismos. Algumas classes de carotenoides desempenham diversas funções na saúde humana devido à sua atividade antioxidante e à capacidade de atuarem como precursores da vitamina A, como é o caso do β-caroteno. Por conseguinte, os carotenoides são utilizados não apenas como colorantes naturais, mas também como aditivos nutricionais na indústria alimentícia. No entanto, obter esses compostos de fontes naturais com alto rendimento e pureza representa um desafio significativo, resultando em altos custos de produção. Dessa maneira, ferramentas estatísticas, como Modelos Polinomiais (MP) derivados de regressões múltiplas, podem auxiliar no aprimoramento desse processo, apesar dos desafios apresentados por sistemas não lineares. Assim, este estudo teve como objetivo incrementar a produção de carotenoides, com destaque para a torularodina, por cultivo submerso da levedura Rhodotorula glutinis CCT-2186, utilizando planejamentos experimentais. Para tanto, foi empregado delineamentos Plackett-Burman, e como primeiro resultado de interesse, a asparagina foi substituída do meio de cultivo por extrato de levedura. Posteriormente, através de estudos avaliando fontes de nitrogênio, o extrato de levedura foi substituído por extrato de malte pois o último levou a maior produção das moléculas de interesse. Além disso, a introdução do surfactante Tween 80 no meio de cultivo e a extensão do tempo de cultivo de 72 para 96 h aumentaram 377,68% a produção de torularodina, atingindo 2,097 mg/mL na melhor condição como segue (% m/v): dextrose (1), KH2PO4 (0,052), MgSO4.7H2O (0,052) e NH4NO3 (0,4), extrato de malte (0,793) com pH 5,0/96 h/30 °C. Adicionalmente, foi realizado um Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) com duas variáveis independentes, Tween 80 e extrato de malte, considerando a produção da torularodina como variável resposta. Os resultados preditos pelo modelo foram confrontados com preditos por Redes Neurais Artificiais (RNA), os quais indicaram a eficácia das previsões realizadas pela RNA quando comparadas aos valores experimentais. Isso ressalta o potencial das RNA quando os modelos polinomiais não atingem os resultados esperados. Posteriormente, em biorreator tipo tanque agitado obteve-se uma produção de torularodina 26,75% superior a melhor produção em agitador orbital. Além disso, os carotenoides presentes no extrato bruto foram isolados com níveis de pureza de 83,15% 80,63% e 81,88% para torularodina, toruleno e β-caroteno, respectivamente. Ademais, foi observado que o extrato era comporto por 57,39% de torularodina, 18,16% de toruleno e 24,45% de β-caroteno. Por fim, foi demonstrada a viabilidade de utilizar o extrato contendo carotenoides como colorante alimentício em gelatina comestível e como componente cosmético em sabonete líquido. Esses resultados demonstram que os estresses nutricionais, físicos e mecânicos aumentaram a produção de carotenoides por R. glutinis. Ademais, foi possível utilizar o extrato bruto em produtos cosméticos e alimentícios.
id UNSP_309ee410d4c6beb2c85c71e5a794c53b
oai_identifier_str oai:repositorio.unesp.br:11449/257158
network_acronym_str UNSP
network_name_str Repositório Institucional da UNESP
repository_id_str
spelling Carotenoides por cultivo submerso de Rhodotorula Glutinis CCT-2186: estratégias de incremento da produção e aplicações em produtos cosméticos e alimentíciosCarotenoids by submerted cultivation of Rhodotorula Glutinis CCT-2186: strategies for increasing production and applications in cosmetic and food productsCarotenoides microbianosProdutos biotecnológicosBioativosBiossínteseMicrobial carotenoidsBiotechnological productsBioactive compoundsBiosynthesisOs carotenoides são colorantes naturais responsáveis pelas cores vibrantes, amarelo, laranja e vermelho em uma variedade de alimentos, principalmente, frutas e vegetais. Porém, esses compostos podem também ser produzidos por vias biotecnológicas pelos microrganismos. Algumas classes de carotenoides desempenham diversas funções na saúde humana devido à sua atividade antioxidante e à capacidade de atuarem como precursores da vitamina A, como é o caso do β-caroteno. Por conseguinte, os carotenoides são utilizados não apenas como colorantes naturais, mas também como aditivos nutricionais na indústria alimentícia. No entanto, obter esses compostos de fontes naturais com alto rendimento e pureza representa um desafio significativo, resultando em altos custos de produção. Dessa maneira, ferramentas estatísticas, como Modelos Polinomiais (MP) derivados de regressões múltiplas, podem auxiliar no aprimoramento desse processo, apesar dos desafios apresentados por sistemas não lineares. Assim, este estudo teve como objetivo incrementar a produção de carotenoides, com destaque para a torularodina, por cultivo submerso da levedura Rhodotorula glutinis CCT-2186, utilizando planejamentos experimentais. Para tanto, foi empregado delineamentos Plackett-Burman, e como primeiro resultado de interesse, a asparagina foi substituída do meio de cultivo por extrato de levedura. Posteriormente, através de estudos avaliando fontes de nitrogênio, o extrato de levedura foi substituído por extrato de malte pois o último levou a maior produção das moléculas de interesse. Além disso, a introdução do surfactante Tween 80 no meio de cultivo e a extensão do tempo de cultivo de 72 para 96 h aumentaram 377,68% a produção de torularodina, atingindo 2,097 mg/mL na melhor condição como segue (% m/v): dextrose (1), KH2PO4 (0,052), MgSO4.7H2O (0,052) e NH4NO3 (0,4), extrato de malte (0,793) com pH 5,0/96 h/30 °C. Adicionalmente, foi realizado um Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) com duas variáveis independentes, Tween 80 e extrato de malte, considerando a produção da torularodina como variável resposta. Os resultados preditos pelo modelo foram confrontados com preditos por Redes Neurais Artificiais (RNA), os quais indicaram a eficácia das previsões realizadas pela RNA quando comparadas aos valores experimentais. Isso ressalta o potencial das RNA quando os modelos polinomiais não atingem os resultados esperados. Posteriormente, em biorreator tipo tanque agitado obteve-se uma produção de torularodina 26,75% superior a melhor produção em agitador orbital. Além disso, os carotenoides presentes no extrato bruto foram isolados com níveis de pureza de 83,15% 80,63% e 81,88% para torularodina, toruleno e β-caroteno, respectivamente. Ademais, foi observado que o extrato era comporto por 57,39% de torularodina, 18,16% de toruleno e 24,45% de β-caroteno. Por fim, foi demonstrada a viabilidade de utilizar o extrato contendo carotenoides como colorante alimentício em gelatina comestível e como componente cosmético em sabonete líquido. Esses resultados demonstram que os estresses nutricionais, físicos e mecânicos aumentaram a produção de carotenoides por R. glutinis. Ademais, foi possível utilizar o extrato bruto em produtos cosméticos e alimentícios.Carotenoids are natural pigments responsible for the vibrant colors, yellow, orange, and red in a variety of foods, primarily fruits and vegetables. However, these compounds can also be produced through biotechnology by microorganisms. Some classes of carotenoids play various roles in human health due to their antioxidant activity and their ability to act as precursors of vitamin A, such as β-carotene. Consequently, carotenoids are used not only as natural colorants but also as nutritional additives in the food industry. However, obtaining these compounds from natural sources with high yield and purity represents a significant challenge, resulting in high production costs. Thus, statistical tools, like Polynomial Models (PM) derived from multiple regressions, can assist in improving this process, despite the challenges posed by nonlinear systems. Therefore, this study aimed to increase the production of carotenoids, especially torularhodin, by submerged cultivation of the yeast Rhodotorula glutinis CCT-2186, using experimental design. To this end, Plackett-Burman designs were employed, and as a first result of interest, asparagine was replaced in the culture medium with yeast extract. Subsequently, through studies on nitrogen sources, yeast extract was replaced with malt extract as the latter led to higher production of the molecules of interest. Additionally, the introduction of the surfactant Tween 80 in the culture medium and the extension of the cultivation time from 72 to 96 h increased torularhodin production by 377.68%, reaching 2.097 mg/mL in the best- condition as follows (% w/v): dextrose (1), KH2PO4 (0.052), MgSO4.7H2O (0.052), and NH4NO3 (0.4), malt extract (0.793) with pH 5.0/96 h/30 °C. Furthermore, a Central Composite Rotational Design (CCRD) was performed with two independent variables, Tween 80 and malt extract, considering torularhodin production as the response variable. The results predicted by the model were compared with those predicted by Artificial Neural Networks (ANN). The comparison indicated the effectiveness of the predictions made by ANN when compared to experimental values. This highlights the potential of ANN when polynomial models do not achieve the expected results. Subsequently, in a stirred tank bioreactor the torularhodin production was 26.75% higher than the best condition obtained in orbital shaker. Additionally, the carotenoids present in the crude extract were isolated with purity levels of 83.15%, 80.63%, and 81.88% for torularhodin, torulene, and β-carotene, respectively. Furthermore, it was observed that the extract was composed of 57.39% torularhodin, 18.16% torulene, and 24.45% β-carotene. Finally, the feasibility of using the extract containing carotenoids as a food colorant in edible gelatin and as a component in cosmetic liquid soap was demonstrated. These results show that nutritional, physical, and mechanical stresses increased carotenoid production by R. glutinis. Moreover, it was possible to use the crude extract in cosmetic and food products.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)FAPESP: 2022/10809-0FAPESP: 2021/06686-8Universidade Estadual Paulista (Unesp)Santos-Ebinuma, Valéria de Carvalho [UNESP]Universidade Estadual Paulista (Unesp)Lima, Julio Gabriel Oliveira de [UNESP]2024-08-26T13:31:13Z2024-08-26T13:31:13Z2024-07-30info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://hdl.handle.net/11449/25715833004030081P7http://lattes.cnpq.br/0253222903740023https://orcid.org/0000-0001-7403-5191porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNESPinstname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)instacron:UNESP2025-03-29T05:03:39Zoai:repositorio.unesp.br:11449/257158Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.unesp.br/oai/requestrepositoriounesp@unesp.bropendoar:29462025-03-29T05:03:39Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)false
dc.title.none.fl_str_mv Carotenoides por cultivo submerso de Rhodotorula Glutinis CCT-2186: estratégias de incremento da produção e aplicações em produtos cosméticos e alimentícios
Carotenoids by submerted cultivation of Rhodotorula Glutinis CCT-2186: strategies for increasing production and applications in cosmetic and food products
title Carotenoides por cultivo submerso de Rhodotorula Glutinis CCT-2186: estratégias de incremento da produção e aplicações em produtos cosméticos e alimentícios
spellingShingle Carotenoides por cultivo submerso de Rhodotorula Glutinis CCT-2186: estratégias de incremento da produção e aplicações em produtos cosméticos e alimentícios
Lima, Julio Gabriel Oliveira de [UNESP]
Carotenoides microbianos
Produtos biotecnológicos
Bioativos
Biossíntese
Microbial carotenoids
Biotechnological products
Bioactive compounds
Biosynthesis
title_short Carotenoides por cultivo submerso de Rhodotorula Glutinis CCT-2186: estratégias de incremento da produção e aplicações em produtos cosméticos e alimentícios
title_full Carotenoides por cultivo submerso de Rhodotorula Glutinis CCT-2186: estratégias de incremento da produção e aplicações em produtos cosméticos e alimentícios
title_fullStr Carotenoides por cultivo submerso de Rhodotorula Glutinis CCT-2186: estratégias de incremento da produção e aplicações em produtos cosméticos e alimentícios
title_full_unstemmed Carotenoides por cultivo submerso de Rhodotorula Glutinis CCT-2186: estratégias de incremento da produção e aplicações em produtos cosméticos e alimentícios
title_sort Carotenoides por cultivo submerso de Rhodotorula Glutinis CCT-2186: estratégias de incremento da produção e aplicações em produtos cosméticos e alimentícios
author Lima, Julio Gabriel Oliveira de [UNESP]
author_facet Lima, Julio Gabriel Oliveira de [UNESP]
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Santos-Ebinuma, Valéria de Carvalho [UNESP]
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.contributor.author.fl_str_mv Lima, Julio Gabriel Oliveira de [UNESP]
dc.subject.por.fl_str_mv Carotenoides microbianos
Produtos biotecnológicos
Bioativos
Biossíntese
Microbial carotenoids
Biotechnological products
Bioactive compounds
Biosynthesis
topic Carotenoides microbianos
Produtos biotecnológicos
Bioativos
Biossíntese
Microbial carotenoids
Biotechnological products
Bioactive compounds
Biosynthesis
description Os carotenoides são colorantes naturais responsáveis pelas cores vibrantes, amarelo, laranja e vermelho em uma variedade de alimentos, principalmente, frutas e vegetais. Porém, esses compostos podem também ser produzidos por vias biotecnológicas pelos microrganismos. Algumas classes de carotenoides desempenham diversas funções na saúde humana devido à sua atividade antioxidante e à capacidade de atuarem como precursores da vitamina A, como é o caso do β-caroteno. Por conseguinte, os carotenoides são utilizados não apenas como colorantes naturais, mas também como aditivos nutricionais na indústria alimentícia. No entanto, obter esses compostos de fontes naturais com alto rendimento e pureza representa um desafio significativo, resultando em altos custos de produção. Dessa maneira, ferramentas estatísticas, como Modelos Polinomiais (MP) derivados de regressões múltiplas, podem auxiliar no aprimoramento desse processo, apesar dos desafios apresentados por sistemas não lineares. Assim, este estudo teve como objetivo incrementar a produção de carotenoides, com destaque para a torularodina, por cultivo submerso da levedura Rhodotorula glutinis CCT-2186, utilizando planejamentos experimentais. Para tanto, foi empregado delineamentos Plackett-Burman, e como primeiro resultado de interesse, a asparagina foi substituída do meio de cultivo por extrato de levedura. Posteriormente, através de estudos avaliando fontes de nitrogênio, o extrato de levedura foi substituído por extrato de malte pois o último levou a maior produção das moléculas de interesse. Além disso, a introdução do surfactante Tween 80 no meio de cultivo e a extensão do tempo de cultivo de 72 para 96 h aumentaram 377,68% a produção de torularodina, atingindo 2,097 mg/mL na melhor condição como segue (% m/v): dextrose (1), KH2PO4 (0,052), MgSO4.7H2O (0,052) e NH4NO3 (0,4), extrato de malte (0,793) com pH 5,0/96 h/30 °C. Adicionalmente, foi realizado um Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) com duas variáveis independentes, Tween 80 e extrato de malte, considerando a produção da torularodina como variável resposta. Os resultados preditos pelo modelo foram confrontados com preditos por Redes Neurais Artificiais (RNA), os quais indicaram a eficácia das previsões realizadas pela RNA quando comparadas aos valores experimentais. Isso ressalta o potencial das RNA quando os modelos polinomiais não atingem os resultados esperados. Posteriormente, em biorreator tipo tanque agitado obteve-se uma produção de torularodina 26,75% superior a melhor produção em agitador orbital. Além disso, os carotenoides presentes no extrato bruto foram isolados com níveis de pureza de 83,15% 80,63% e 81,88% para torularodina, toruleno e β-caroteno, respectivamente. Ademais, foi observado que o extrato era comporto por 57,39% de torularodina, 18,16% de toruleno e 24,45% de β-caroteno. Por fim, foi demonstrada a viabilidade de utilizar o extrato contendo carotenoides como colorante alimentício em gelatina comestível e como componente cosmético em sabonete líquido. Esses resultados demonstram que os estresses nutricionais, físicos e mecânicos aumentaram a produção de carotenoides por R. glutinis. Ademais, foi possível utilizar o extrato bruto em produtos cosméticos e alimentícios.
publishDate 2024
dc.date.none.fl_str_mv 2024-08-26T13:31:13Z
2024-08-26T13:31:13Z
2024-07-30
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/11449/257158
33004030081P7
http://lattes.cnpq.br/0253222903740023
https://orcid.org/0000-0001-7403-5191
url https://hdl.handle.net/11449/257158
http://lattes.cnpq.br/0253222903740023
https://orcid.org/0000-0001-7403-5191
identifier_str_mv 33004030081P7
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Estadual Paulista (Unesp)
publisher.none.fl_str_mv Universidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UNESP
instname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)
instacron:UNESP
instname_str Universidade Estadual Paulista (UNESP)
instacron_str UNESP
institution UNESP
reponame_str Repositório Institucional da UNESP
collection Repositório Institucional da UNESP
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)
repository.mail.fl_str_mv repositoriounesp@unesp.br
_version_ 1854954435740958720