Os impactos dos plastificantes de preocupação emergente – BPS e BPAF – na espermatogênese, reprodução, qualidade espermática e desenvolvimento do zebrafish (Danio rerio)

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Costa, Daniel Fernandes da [UNESP]
• Orientador(a): Nóbrega, Rafael Henrique [UNESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: bisfenóis; BPA; endócrino; contaminantes; epigenética
• Palavras-chave em Inglês: bisphenols; BPA; endocrine; contaminants; epigenetics
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11449/257685

O Bisfenol A (BPA) é um plastificante amplamente utilizado que tem sido extensivamente estudado devido à sua ação adversa no eixo hipotálamo-pituitária-gonadal (HPG). Bisfenóis alternativos, como o bisfenol-S (BPS) e o bisfenol-AF (BPAF), foram desenvolvidos para substituir o BPA. Estudos recentes demonstraram que estes compostos também podem atuar como desreguladores endócrinos. Dito isso, o objetivo desta tese foi estudar os efeitos do BPS e BPAF na reprodução dos machos de zebrafish (Danio rerio) após exposição de explantes testiculares (ex vivo) e in vivo. Para tanto, machos adultos de zebrafish foram expostos aos análogos do BPA, o BPS e o BPAF por 14 dias, em concentrações ambientalmente relevantes distintas. Além disso, também realizamos exposição ex vivo utilizando explantes testiculares tratados com concentrações crescentes de BPS e BPAF por 7 dias. Em seguida, avaliamos a espermatogênese ex vivo e in vivo por meio de análise histomorfométrica das células germinativas e de expressão gênica, quantificando uma série de genes envolvidos na função gonadal. Posteriormente, in vivo, ainda avaliamos os efeitos na produção do hormônio androgênico 11-KT e na qualidade espermática. Além disso, realizamos reprodução dos machos expostos com fêmeas não tratadas, e avaliamos possíveis efeitos intergeracionais nos embriões/larvas, analisando a eclosão, o desenvolvimento, a sobrevivência e a expressão gênica da prole (F1). Por fim, os mesmos parâmetros foram investigados em embriões/larvas diretamente expostos ao BPS ou BPAF. Nossos resultados mostraram pela primeira vez em peixes um efeito androgênico do BPS na produção hormonal, elevando a concentração plasmática do 11-KT. Em relação aos testículos, encontramos desregulação da função testicular, em geral, os tratamentos ex vivo e in vivo com BPS e BPAF alteraram a expressão gênica de enzimas esteroidogênicas (cyp19a1a, star e cyp7a1) e enzimas de regulação epigenética. Em relação aos dados histomorfométricos, a exposição ex vivo ao BPS e ao BPAF reduziu a frequência de cistos de espermatócitos primários em paquíteno. in vivo, aumentou os cistos meióticos (espermatócitos) e pós-meióticos (espermátides), indicando estímulo para o término da meiose. No grupo BPS, este estímulo levou a uma produção anormal de espermatozoides. No entanto, o efeito androgênico do BPS não se refletiu na qualidade do esperma e na viabilidade dos embriões, que foram impactadas negativamente. Também observamos ações adversas dos contaminantes na qualidade espermática, reduzindo a motilidade. Na geração F1, houve um atraso acentuado nas taxas de eclosão, aumento de malformações e mortalidade. Embriões/larvas diretamente expostos ao BPS ou BPAF não exibiram alterações no desenvolvimento, porém apresentaram estímulo de expressão de genes relacionados ao estrógeno (esr1, cyp19a1b e vgt1). Ao todo, nossos dados indicam que o BPS e o BPAF podem ter efeitos epigenéticos e afetar a reprodução, desregulando a esteroidogênese e a espermatogênese. O presente trabalho encontrou evidências de efeito intergeracional dos contaminantes na informação paterna. Este estudo fornece suporte à hipótese de que o BPS e o BPAF exercem efeitos epigenéticos e impactam negativamente a reprodução, alterando a esteroidogênese e a espermatogênese. No geral, fornecemos maiores informações sobre as consequências dos bisfenóis alternativos, BPS e BPAF, na fisiologia e reprodução dos peixes.