Efeito da Tanshinona-IIa-sulfonato, um inibidor ectostérico da catepsina k, na osteoclastogênese induzida por LPS

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Vasconcelos, Victor Hugo Fernandes [UNESP]
• Orientador(a): Souza, Pedro Paulo de
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (UNESP)
• Palavras-chave em Português: Osteoclastos; Catepsina k; Lipopolissacarídeo
• Palavras-chave em Inglês: Osteoclasts; Cathepsin k; Lipopolysaccharides
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11449/329805

A Tanshinona-IIa-sulfonato (T06) é um derivado da Tanshinona IIA, substância natural da Salvia miltiorrhiza (Danshen), uma erva utilizada na Medicina Tradicional Chinesa. Essa classe de compostos emergiu recentemente como fármacos promissores na redução do fenótipo osteoporótico. Tais compostos são capazes de inibir especificamente a atividade colagenolítica da Catepsina K, enzima lisossomal secretada pelos osteoclastos que participa da degradação da fase orgânica da matriz óssea, sem interferir na osteoclastogênese induzida por RANKL. Entretanto, ainda não foi investigado o efeito da T06 sobre a diferenciação e atividade de osteoclastos induzidos por lipopolissacarídeo (LPS). O objetivo do presente trabalho foi investigar o efeito da T06 sobre a osteoclastogênese induzida por LPS in vitro. Para isso, macrófagos foram obtidos de medula óssea (BMMs) de camundongos e a viabilidade avaliada após exposição à variadas concentrações de tanshinona [0,25-5μM], utilizando o ensaio de redução do MTT. As células foram estimuladas à diferenciação com MCSF, RANKL e/ou LPS na presença ou ausência de T06 por 4 dias, em placa de 96 poços. Sobre discos de osso, BMMs foram primadas com RANKL e estimuladas com LPS na presença ou ausência de T06 [1μM]. As células foram fotogradas em microscopia de campo claro, para contagem de células TRAP+, e de fluorescência, para visualização dos anéis de actina. O sobrenadante da cultura foi coletado para quantificação de citocinas inflamatórias. Os resultados desse trabalho mostraram que T06 modulou positivamente a osteoclastogênese induzida por LPS em placas de cultura, sendo esse resultado estatisticamente relevante (p<0,05) nas concentrações [2,5 e 0,5μM]. Osteclastos induzidos por LPS e tratados com T06 apresentaram anéis de actina normais. Em discos de osso, o tratamento com T06 [1μM] aumentou significativamente a quantidade de células multinucleadas TRAP+. A indução da osteoclastogênese com LPS aumentou os níveis de citocinas inflamatórias (TNF, IL-6 e MCP-1), enquanto o tratamento com T06 não interferiu nesse mecanismo.