Efeito do metotrexato veiculado por nanopartículas na ativação de inflamassomas na musculatura esquelética de ratos com infarto do miocárdio

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Santos, Anna Clara Consorti dos [UNESP]
• Orientador(a): Okoshi, Marina Politi [UNESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Infarto agudo do miocárdio; Inflamassomas; Músculo esquelético; Metotrexato; Nanopartículas
• Palavras-chave em Inglês: Acute myocardial infarction; Inflammasomes; Skeletal Muscle; Methotrexate; Nanoparticles
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11449/256765

Introdução: Após o infarto do miocárdio, substâncias liberadas de cardiomiócitos necróticos sensibilizam receptores de ligação a nucleotídeos como NLRP1, NLRP3 e NLRC4. A ativação destes receptores estimula inflamassomas e o processo de inflamação aguda. Os inflamassomas ativam a caspase-1 e clivam a IL1B, induzindo a produção de mediadores inflamatórios. A inflamação inicial é benéfica para a reparação do tecido cardíaco; entretanto, se persistente, pode intensificar o processo de remodelação cardíaca e pode levar à insuficiência cardíaca. A insuficiência cardíaca cursa com alterações em diversos órgãos e sistemas como a musculatura esquelética. O comportamento dos inflamassomas na musculatura esquelética após o infarto agudo do miocárdio (IAM) não está esclarecido. O metotrexato (MTX) é um imunomodulador relacionado a redução do risco de desenvolvimento de doenças cardiovasculares. O MTX associado a nanopartículas de núcleo lipídico (MTX-LDE) administrado 24 horas após a indução do IAM reduziu o processo inflamatório e melhorou a função cardíaca em ratos. Ainda não se sabe se o MTX pode influenciar a resposta imune à lesão do músculo esquelético associada à insuficiência cardíaca. Objetivo: Avaliar os efeitos da administração precoce e tardia de MTX-LDE na remodelação cardíaca e marcadores inflamatórios no músculo sóleo de ratos infartados. Métodos: Ratos Wistar machos submetidos a indução de infarto ou cirurgia fictícia foram separados nos grupos Sham (n=11), IAM (n=11), IAM-P (n=14) e IAM-T (n=12). No grupo IAM-P, o tratamento com MTX-LDE foi iniciado 24 horas após o IAM na dose de 1 mg/kg/semana via intraperitoneal e mantido por 10 semanas. No grupo IAM-T, o tratamento foi iniciado 3 semanas após a cirurgia e mantido por 7 semanas. Ecocardiograma foi realizado ao final do estudo; apenas ratos com área infartada do ventrículo esquerdo maior que 35% foram incluídos no estudo. A expressão de proteínas e genes de Nlrp1, Nlrp3, Nlrc4, proteína associada à apoptose com domínio CARD (Asc), Pro-Caspase-1, Caspase-1, Pro-Interleucina (Il)-1 beta, e Il1b foi quantificada por Western blotting e qPCR, respectivamente, no músculo sóleo. O trofismo do sóleo foi avaliado por morfometria. As comparações entre os grupos foram realizadas por análise de variância (ANOVA) complementada pelo teste de Bonferroni ou pelo teste de Kruskal-Wallis complementado por Dunn. Resultados: O tamanho do infarto não diferiu entre os grupos. O tratamento precoce ou tardio não alterou variáveis estruturais e funcionais do coração. A expressão proteica de Nlrp1 foi menor no grupo IAM-P que no Sham. Houve tendência (p=0,068) para a expressão proteica de Nlrc4 ser menor no grupo IAM-P que no Sham. O trofismo muscular e a expressão gênica e proteica de Nlrp3, Asc, Pro-Caspase-1, Caspase-1, Pro-Il1b e Il1b não diferiu entre os grupos. Conclusão: A administração precoce ou tardia de MTX-LDE não altera o processo de remodelação cardíaca pós-infarto em ratos. A administração precoce de MTX-LDE reduz o marcador de inflamação NLRP1 no músculo esquelético sóleo sem, no entanto, alterar o fenótipo muscular.