Efeito biológicos da Chalcona T4 na osteoclastogênese: estudo in vitro

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Matos, Iolanda Augusta Fernandes de [UNESP]
• Orientador(a): Stabili, Morgana Rodrigues Guimarães [UNESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Chalcona; Osteoclastos; Células RAW 264.7; Peptídeos e proteinas de sinalização intracelular
• Palavras-chave em Inglês: Chalcone; Osteoclasts; RAW 264.7 cells; Intracellular signaling peptides and proteins
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/218002

As chalconas são um grupo de compostos fenólicos com inúmeras atividades biológicas e potencial para o tratamento de diversas doenças. Estudos clínicos e pré-clínicos têm demonstrado a efetividade de derivados chalcônicos naturais e sintéticos no tratamento de doenças inflamatórias como câncer e artrite reumatoide, e em doenças osteolíticas como osteoporose e tumores ósseos. As chalconas podem modular a inflamação e o turnover ósseo através de diferentes mecanismos, incluindo inibição da produção de citocinas, regulação de vias de sinalização intracelular, e modulação da atividade de fatores de transcrição. Corroborando as evidências indicando as propriedades anti osteolíticas das chalconas, recentemente nosso grupo de pesquisa demonstrou que a chalcona T4, uma novo derivado chalcônico sintético, inibiu a perda óssea inflamatória em um modelo experimental de periodontite em ratos. Apesar dos dados promissores demonstrando o potencial do composto na modulação da reabsorção óssea, informações sobre os mecanismos moleculares envolvidos na ação da chalcona T4 sobre a diferenciação e atividade dos osteoclastos não foram investigados. Considerando que o entendimento dos mecanismos biológicos de um composto pode não apenas aumentar sua segurança farmacológica, como também indicar sua utilização para diferentes doenças que envolvam a modulação de alvos biológicos comuns, o presente estudo avaliou os efeitos da chalcona sobre a osteoclastogênese, e os mecanismos moleculares subjacentes. A diferenciação e atividade de células pré-osteoclásticas (RAW 264.7) foi estimulada por RANKL, e as células tratadas com diferentes concentrações da chalcona T4, em diferentes períodos durante o processo de diferenciação. Os efeitos do composto sobre a diferenciação e atividade dos osteoclastos foram avaliados pela coloração do anel de actina e determinação das áreas de lacunas de reabsorção, respectivamente. A expressão de marcadores gênicos relacionados a osteoclastogênese (Nfatc1, Oscar, Trap, Mmp-9 e Catepsina k),) foi avaliada por RT-qPCR, e o status de ativação das vias (MAPK, AKT e NF-kB) por western blot. O potencial do composto sobre a diferenciação osteogênica foi investigado utilizando células pré-osteoblásticas (MC3T3-E1), através da formação de nódulos de mineralização (alizarin red). Os resultados mostraram que a chalcona T4 reduziu a diferenciação e atividade dos osteoclastos induzida por RANKL, suprimiu a expressão de Oscar, Trap e Mmp-9, e reduziu a ativação de ERK e AKT, de maneira dose-dependente. A formação de matriz mineralizada também foi estimulada marcadamente pelo composto. Estes resultados nos permitem concluir que a chalcona T4 é capaz de reduzir a osteoclastogênese através de efeitos mediados pela modulação de vias de sinalização intracelular importantes na diferenciação e atividade dos osteoclastos, indicando o potencial do composto no tratamento de doenças osteolíticas.