Validação das proteínas de vesículas extracelulares H2A e CSTA como potenciais biomarcadores para o câncer de mama triplo-negativo

• Ano de defesa: 2026
• Autor(a) principal: Alves, Débora de Lima
• Orientador(a): Zuccari, Debora Aparecida Pires de Campos
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (UNESP)
• Palavras-chave em Português: Mamas - Câncer; Marcadores bioquímicos; Proteínas; Vesículas extracelulares; Imuno-histoquímica
• Palavras-chave em Inglês: Breast - Cancer; Biochemical markers; Proteins; Extracellular vesicles; Immunohistochemistry
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11449/331142

O câncer de mama triplo-negativo (CMTN) é considerado um dos subtipos mais agressivos de câncer de mama (CM), caracterizado pela ausência de expressão dos receptores de estrogênio (RE), de progesterona (RP) e do fator de crescimento epidérmico humano 2 (HER2). Essa característica limita as opções terapêuticas e contribui para um prognóstico menos favorável, além de dificultar a identificação precoce da doença por meio de biomarcadores específicos. Nesse contexto, a busca de novos marcadores moleculares capazes de auxiliar no diagnóstico e no acompanhamento clínico do CMTN torna-se essencial. A biópsia líquida, que consiste na análise de fluidos biológicos para a detecção de moléculas, constitui uma abordagem promissora por ser um método de caráter minimamente invasivo e permitir o monitoramento dinâmico da doença. Entre os componentes detectáveis, destacam-se as vesículas extracelulares (VEs), estruturas que carregam proteínas, lipídios e ácidos nucleicos representativos de sua célula de origem e que têm sido investigadas como fontes de biomarcadores em diferentes tipos de câncer. Entre as proteínas identificadas em VEs, a histona H2A (H2A) e a cistatina A (CSTA) despertam interesse por sua possível associação com processos relacionados à tumorigênese. A H2A participa da organização da cromatina e da regulação da expressão gênica, podendo refletir alterações epigenéticas presentes em células tumorais. Já a CSTA atua como inibidora de proteases cisteínicas, participando de processos ligados à remodelação tecidual, invasão celular e progressão tumoral. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar a expressão das proteínas H2A e CSTA em VEs isoladas do plasma de pacientes e em amostras de tecido tumoral mamário, investigando seu potencial como biomarcadores para o CMTN. Foram coletadas amostras de 159 pacientes entre outubro de 2024 e julho de 2025 e, ao final, 150 foram elegíveis: 12 controles, 85 com lesões benignas e 53 com tumores malignos (15 Luminal A, 19 Luminal B, 6 HER2+ e 13 CMTN). As amostras foram organizadas em 21 pools. As VEs foram analisadas por meio de ensaio imunoenzimático (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA), e os tecidos tumorais foram avaliados por imuno-histoquímica. A quantificação por ELISA revelou diferenças estatisticamente significativas para ambas as proteínas, sendo a CSTA mais expressa no grupo Triplo-negativo em relação aos grupos Luminal A (p = 0,0055) e Benigno (p = 0,0022), e a H2A maior em relação aos grupos Luminal B (p = 0,0186), Benigno (p = 0,0018) e Controle (p = 0,0280). Na análise imuno-histoquímica, a CSTA apresentou maior expressão no grupo Triplo-negativo em comparação a todos os demais grupos (p < 0,0001). A H2A apresentou maior expressão em relação aos grupos Luminal A (p = 0,0484) e Benigno (p = 0,0046), com predomínio de marcação nuclear e citoplasmática maior em comparação ao grupo Luminal B (p = 0,0203). Em conjunto, os resultados indicam que as proteínas CSTA e H2A apresentam padrões de expressão associados ao CMTN, sugerindo potencial como candidatas a biomarcadores, embora estudos adicionais sejam necessários para confirmar o potencial diagnóstico e a aplicabilidade como biomarcadores.