Isolamento de microvesículas e sua caracterização proteomica no veneno da abelha Apis mellifera

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Domingues, Adailson Henrique [UNESP]
• Orientador(a): Santos, Lucilene Delazari dos [UNESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Envenenamento por abelhas; Análise proteômica; Microveísulas extracelulares; Espectrometria de massas; Nanoparticle tracking analysis
• Palavras-chave em Inglês: Bee poisoning; Proteomic analysis; Extracellular microvehicles; Mass spectrometry; Nanoparticle tracking analysis
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11449/255797

Conforme foram ocorrendo a multiplicação e propagação das abelhas africanizadas aumentaram acentuadamente os acidentes apílicos no Brasil, fazendo com que as autoridades de saúde pública incluíssem este acidente como objeto de vigilância sanitária. Cerca de 8,24% do número total de acidentes causados por animais peçonhentos no Brasil são provocados por múltiplas ferroadas de abelhas. Diante do crescente número de casos clínicos por acidentes por abelhas africanizadas e, consequentemente de óbitos, despertou-se a necessidade de se dispor de um tratamento eficaz. Assim, a equipe de pesquisadores do Centro de Veneno de Animais Peçonhentos – CEVAP/SP em parceria com o Instituto Vital Brazil (RJ), desenvolveram um soro antiapílico, o qual foi testado em um estudo clínico fase I/II em pacientes que sofreram múltiplas ferroadas de abelhas africanizadas. Neste contexto, os estudos de venômica realizados por nosso grupo de pesquisa, evidenciaram que mesmo após a soroterapia específica desses pacientes, ainda existem toxinas do veneno da abelha no sangue dos pacientes tratados após a alta médica. Diante dessa observação clínica e tendo em vista estudos já publicados na literatura sobre a presença de microvesículas no veneno de serpentes, postularam-se hipóteses sobre a presença do veneno da abelha Apis mellifera presente na corrente sanguínea dos pacientes deste estudo clínico: “O veneno da abelha foi liberado na corrente sanguínea dos pacientes tardiamente pois estavam encapsulados em microvesículas oriundas do próprio veneno?” ou “O veneno da abelha foi liberado na corrente sanguínea dos pacientes tardiamente pois estavam encapsulados em microvesículas formadas pelo próprio organismo dos pacientes por meio do brotamento de microvilos na fagocitose celular dos antígenos circulantes após o acidente?”. Assim, o objetivo desse trabalho foi isolar as microvesículas extracelulares do veneno de Apis mellifera, quantificar e mensurar seus diâmetros, além de descrever o perfil proteico total dessas microvesículas por meio da estratégia de análise proteômica. Os resultados que foram obtidos neste trabalho evidenciaram múltiplas proteínas, onde dentre as 4 frações analisadas em laboratório, somente a fração 1 e 2 resultaram e expressaram conteúdo proteico, enzimático e fragmentos peptídicos. Muitas proteínas foram encontradas, e analisadas sua relação com o envenenamento provenientes das abelhas africanizadas Apis mellifera, em que o processo de atuação de tais proteínas ainda deixa dúvidas sobre os conceitos de seus impactos no corpo humano. Desta forma, supoe-se que, as microvesiculas presentes no veneno da abelha Apis mellifera são frutos do desprendimento de brotos membranares de orgãos/tecidos durante sua vida, os quais podem ser conduzidos para a glandula de veneno pela proximidade que a mesma tem com o intestino deste inseto. Dentre várias proteínas encontradas a proteína acid phosphatase type 7 (Fosfatase ácida tipo 7) juntamente com a proteína Fosfatase 1H, têm relação ao envenenamento das abelhas africanizadas Apis mellifera, induz reações de toxidade que são inoculadas durante a ferroada no momento de defesa das abelhas melíferas, conduzido o acometido a reações alérgicas após envenenamento da apitoxina. Por fim os resultados obtidos neste trabalho serão de grande contribuição para próximos estudos envolvendo as proteínas caracterizadas nas microvesículas.