Avaliação da expressão gênica da via de sinalização celular notch em células do cumulus oophorus de pacientes com endometriose submetidas à fertilização in vitro

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2018
Autor(a) principal: Souza, Lisiane Knob de
Orientador(a): Cunha Filho, João Sabino Lahorgue da
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Células do cúmulo
Endometriose
Infertilidade
Palavras-chave em Inglês:
Cumulus cells
Infertility and Notch signaling pathway
Endometriosis
Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/188958
Resumo: Base teórica: A patogênese da endometriose e, principalmente, sua relação com a infertilidade ainda não é totalmente compreendida. Porém, a literatura evidencia alterações na foliculogênese. Entre os fatores envolvidos neste processo, está à sinalização celular Notch, que regula processos de diferenciação, proliferação e apoptose dos diversos tipos celulares encontrados nos folículos. Alterações nesta sinalização estão relacionadas a algumas síndromes e recentemente a algumas doenças ginecológicas. Apesar de existirem evidências de alterações do Notch em implantes endometrióticos, não há na literatura análise da expressão desta via em células do cumulus de pacientes com endometriose peritoneal. Objetivo: Analisar a expressão gênica da via de sinalização Notch em células do cumulus de pacientes com endometriose e sem endometriose (grupo controle). Métodos: Foram selecionadas pacientes com idade entre 25 a 40 anos submetidas à fertilização in vitro (FIV). Pacientes com endometriose peritoneal foram incluídas no grupo estudo, enquanto pacientes com infertilidade por fator tubário e/ou masculino foram incluídas no grupo controle. Após punção ovariana, as células do cumulus oophorus foram coletadas por microdissecção e armazenadas em RNAlater a -80°C até posterior extração do RNA, síntese do cDNA e análise da expressão gênica por qRT-PCR. Resultados: Um total de 28 pacientes foi incluído ao estudo, sendo 15 participantes do grupo controle (C) e 13 participantes do grupo endometriose (E). Os parâmetros demográficos idade e índice de massa corporal foram respectivamente para C e E de: 33.53±4.06 e 33.15±4.22 anos (P=0,811), 22.04±1,83 e 24.27±2,76 Kg/m2 (P=0,05). Os desfechos reprodutivos, respectivamente para C e E, número de MII foi de 8.3±3.5 e 11.3±4,5 (P=0,069), taxa de fertilização 72% e 74% (P=0,797), número de embriões transferidos para ambos os grupos foi de 2±0,5 (P=1,000) e a taxa de gestação foi de 42% e 33% (P=0,748). A quantificação relativa (RQ) para o grupo controle e endometriose para Notch1 foram, respectivamente, 1.000 e 0.564 (P=0.232), Notch2 RQ foi 1.000 e 0.975 (P=1,00), Notch3 RQ foi 1.000 e 1,059 (P=1,00) e Jag1 foi 1,000 e 0,510 (P=0,297). Conclusão: A expressão da via de sinalização notch não está alterada nas células do cumulus oophorus de pacientes com infertilidade e endometriose peritoneal, submetidas à FIV.
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Métodos: Foram selecionadas pacientes com idade entre 25 a 40 anos submetidas à fertilização in vitro (FIV). Pacientes com endometriose peritoneal foram incluídas no grupo estudo, enquanto pacientes com infertilidade por fator tubário e/ou masculino foram incluídas no grupo controle. Após punção ovariana, as células do cumulus oophorus foram coletadas por microdissecção e armazenadas em RNAlater a -80°C até posterior extração do RNA, síntese do cDNA e análise da expressão gênica por qRT-PCR. Resultados: Um total de 28 pacientes foi incluído ao estudo, sendo 15 participantes do grupo controle (C) e 13 participantes do grupo endometriose (E). Os parâmetros demográficos idade e índice de massa corporal foram respectivamente para C e E de: 33.53±4.06 e 33.15±4.22 anos (P=0,811), 22.04±1,83 e 24.27±2,76 Kg/m2 (P=0,05). Os desfechos reprodutivos, respectivamente para C e E, número de MII foi de 8.3±3.5 e 11.3±4,5 (P=0,069), taxa de fertilização 72% e 74% (P=0,797), número de embriões transferidos para ambos os grupos foi de 2±0,5 (P=1,000) e a taxa de gestação foi de 42% e 33% (P=0,748). A quantificação relativa (RQ) para o grupo controle e endometriose para Notch1 foram, respectivamente, 1.000 e 0.564 (P=0.232), Notch2 RQ foi 1.000 e 0.975 (P=1,00), Notch3 RQ foi 1.000 e 1,059 (P=1,00) e Jag1 foi 1,000 e 0,510 (P=0,297). Conclusão: A expressão da via de sinalização notch não está alterada nas células do cumulus oophorus de pacientes com infertilidade e endometriose peritoneal, submetidas à FIV.Background: The pathogenesis of endometriosis and the relationship with infertility remain unclear. However, alterations in folliculogenesis have been described. Among the factors involved in folliculogenesis, there is the cellular notch signaling pathway which modulated proliferation, differentiation and survival of different types of cells within follicles. Notch disorders are related to some syndromes and, recently, to some gynecological diseases. Although the existence of evidences of altered Notch in endometrial implants, there is no study of Notch pathway genes expression in cumulus cells of patients with peritoneal endometriosis. Objective To analyze the Notch signaling pathway genes expression in cumulus cells of patients with endometriosis and without endometriosis (control group). Methods We selected patients between 25 and 40 years old that were going under in vitro fertilization (IVF). Patients with peritoneal endometriosis were included in study group, while patients with tubal and/or male factors were included in control group. After ovarian puncture, cumulus oophorus cells were collected by microdissection and stored in RNAlater in -80°C to posterior RNA extraction, cDNA synthesis and gene expression analysis by qRT-PCR. Results: 28 patients were included to the study, being 15 patients in control group (C) and 13 patients in endometriosis (E) group. Demographic parameters age (years-old) and body mass index (kg/m2) to C and E was, respectively, 33.53±4.06 and 33.15±4.22 (P=0,811), 22.04±1.83 and 24.27±2.76 (P=0,05). IVF outcomes to C and E were: number of MII 8.3±3.5 and 11.3±4.5 (P=0,069), fertilization rate of 72% and 74% (P=0,797), number of transferred embryos for both groups was 2±0.5 (P=1,000), pregnancy rate was 42% and 33% (P=0,748). Notch1 RQ to control group and endometriosis group was, respectively, 1.000 and 0.564 (P=0.232), Notch2 RQ was 1.000 and 0.975 (P=1,000), Notch3 RQ was 1.000 and 1,059 (P=1,000) and Jag1 was 1,000 and 0,510 (P=0,297). Conclusion: The Notch family and its ligand were not altered in cumulus oophorus cells of infertile patients with peritoneal endometriosis undergoing IVF.application/pdfporCélulas do cúmuloEndometrioseInfertilidadeCumulus cellsInfertility and Notch signaling pathwayEndometriosisAvaliação da expressão gênica da via de sinalização celular notch em células do cumulus oophorus de pacientes com endometriose submetidas à fertilização in vitroinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisUniversidade Federal do Rio Grande do SulFaculdade de MedicinaPrograma de Pós-Graduação em Medicina: Ciências MédicasPorto Alegre, BR-RS2018mestradoinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGSinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)instacron:UFRGSTEXT001086072.pdf.txt001086072.pdf.txtExtracted Texttext/plain83011http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/188958/2/001086072.pdf.txt42edce595116da76f31da7a5a4a0ed83MD52ORIGINAL001086072.pdfTexto completoapplication/pdf4886058http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/188958/1/001086072.pdfbe1a33ce9bf04af60f6f51838f1d5c27MD5110183/1889582024-08-24 06:43:08.794257oai:www.lume.ufrgs.br:10183/188958Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttps://lume.ufrgs.br/handle/10183/2PUBhttps://lume.ufrgs.br/oai/requestlume@ufrgs.br||lume@ufrgs.bropendoar:18532024-08-24T09:43:08Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)false
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