Avaliação de atividade antirretroviral de extratos e substâncias isoladas de Hypericum connatum frente ao vírus da imunodeficiência felina (FIV) como modelo experimental para o HIV

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2020
Autor(a) principal: Hepp, Rafaela Wachholz
Orientador(a): Von Poser, Gilsane Lino
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Palavras-chave em Inglês:
FIV
Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/220615
Resumo: O vírus da imunodeficiência felina (FIV), do gênero Lentivirus, foi descoberto em 1986 e, desde então, tem sido um modelo experimental promissor para o vírus da imunodeficiência humana (HIV) devido à similaridade estrutural, genômica e patogênica entre os vírus, já demonstrada por diversos autores. O FIV torna-se uma ferramenta para a avaliação de novos fármacos antirretrovirais. A necessidade de encontrar terapias alternativas ao HIV direcionou diversos autores a buscar novas moléculas, em diferentes organismos vivos, principalmente em vegetais superiores. Diversos estudos demonstram atividades biológicas de espécies do gênero Hypericum, como por exemplo, a atividade antidepressiva e a antiviral. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antirretroviral de extrato proveniente de H. connatum frente ao FIV e buscar a substância ativa responsável pela atividade. Para tanto, foram avaliados frente ao FIV: o extrato metanólico bruto, obtido das partes aéreas de H. connatum, frações obtidas por solventes de polaridade crescente e substâncias isoladas, majoritárias na fração de maior atividade antiviral. A composição química das frações foi determinada por HPLC e a fração acetato de etila foi submetida ao isolamento da substância quercitrina por coluna cromatográfica. A avaliação da atividade antiviral foi realizada pela quantificação do número de cópias de FIV no sobrenadante de cultivo celular infectado por PCR em tempo real (qPCR). O extrato metanólico bruto reduziu em 2431 × a carga viral de FIV em comparação ao controle viral. Das frações avaliadas, a fração acetato de etila foi a mais eficiente na inibição da replicação viral, tendo reduzido em 7809 × o número de cópias do vírus. A fração metanol também apresentou atividade antiviral (1466 ×). Os compostos majoritários encontrados em ambas frações por HPLC foram quercitrina e hiperosídeo, sendo a primeira a mais abundante na fração acetato de etila e isolada a partir dessa fração. Quercitrina e hiperosídeo foram testados frente ao FIV, e reduziram parcialmente a carga viral, apresentando resultado comparável ao fármaco Zidovudina (AZT).
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spelling Hepp, Rafaela WachholzVon Poser, Gilsane LinoRavazzolo, Ana Paula2021-05-08T04:40:11Z2020http://hdl.handle.net/10183/220615001125079O vírus da imunodeficiência felina (FIV), do gênero Lentivirus, foi descoberto em 1986 e, desde então, tem sido um modelo experimental promissor para o vírus da imunodeficiência humana (HIV) devido à similaridade estrutural, genômica e patogênica entre os vírus, já demonstrada por diversos autores. O FIV torna-se uma ferramenta para a avaliação de novos fármacos antirretrovirais. A necessidade de encontrar terapias alternativas ao HIV direcionou diversos autores a buscar novas moléculas, em diferentes organismos vivos, principalmente em vegetais superiores. Diversos estudos demonstram atividades biológicas de espécies do gênero Hypericum, como por exemplo, a atividade antidepressiva e a antiviral. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antirretroviral de extrato proveniente de H. connatum frente ao FIV e buscar a substância ativa responsável pela atividade. Para tanto, foram avaliados frente ao FIV: o extrato metanólico bruto, obtido das partes aéreas de H. connatum, frações obtidas por solventes de polaridade crescente e substâncias isoladas, majoritárias na fração de maior atividade antiviral. A composição química das frações foi determinada por HPLC e a fração acetato de etila foi submetida ao isolamento da substância quercitrina por coluna cromatográfica. A avaliação da atividade antiviral foi realizada pela quantificação do número de cópias de FIV no sobrenadante de cultivo celular infectado por PCR em tempo real (qPCR). O extrato metanólico bruto reduziu em 2431 × a carga viral de FIV em comparação ao controle viral. Das frações avaliadas, a fração acetato de etila foi a mais eficiente na inibição da replicação viral, tendo reduzido em 7809 × o número de cópias do vírus. A fração metanol também apresentou atividade antiviral (1466 ×). Os compostos majoritários encontrados em ambas frações por HPLC foram quercitrina e hiperosídeo, sendo a primeira a mais abundante na fração acetato de etila e isolada a partir dessa fração. Quercitrina e hiperosídeo foram testados frente ao FIV, e reduziram parcialmente a carga viral, apresentando resultado comparável ao fármaco Zidovudina (AZT).The feline immunodeficiency virus (FIV), from the Lentivirus genus, was discovered in 1986 and, since then, it has been a promising experimental model for the human immunodeficiency virus (HIV) due to the structural, genomic and pathogenic similarity between the viruses, already evidenced by many authors. FIV becomes a tool to evaluate new antiretrovirals drugs. The necessity of finding new therapies against HIV has influenced many researchers to search new molecules in different living organisms, mainly in superior plants. Several studies demonstrate biologicals activities of species from the Hypericum genus, for instance, antidepressant and antiviral activity. The aim of this study was to evaluate the antiretroviral activity of the extract from H. connatum against FIV and to search for the active substance responsible for the activity. Therefore, it was evaluated against FIV: the crude methanolic extract, obtained from the aerial parts of H. connatum, fractions of the extract obtained using increasing polarity solvents and major compounds isolated in the fraction with the best antiviral acitivity. The chemical composition was determined by HPLC and the ethyl acetate fraction was submitted to the isolation of the compound quercitrin by chromatographic column. The evaluation of the antiviral activity was performed by the quantification of viral particles by real time PCR (qPCR). The crude methanolic extract was able to reduce in 2431 × the viral load of FIV comparing to viral control. Of the evaluated fractions, the ethyl acetate fraction was the most efficient inhibiting the viral replication, reducing in 7809 × the number of viral copies. The methanolic fraction also showed antiviral activity (1466 ×). The major compounds found in both fractions were quercitrin and hyperoside, the former being the most abundant in the ethyl acetate and isolated from it. Quercitrin and hyperoside were tested against FIV, partially decreasing the viral load, showing comparable results to the zidovudine (AZT) drug.application/pdfporHypericumAntirretroviraisVírus da imunodeficiência felinaFarmáciaHypericum connatumFIVAntiviral activityQuercitrinHyperosideAvaliação de atividade antirretroviral de extratos e substâncias isoladas de Hypericum connatum frente ao vírus da imunodeficiência felina (FIV) como modelo experimental para o HIVinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisUniversidade Federal do Rio Grande do SulFaculdade de FarmáciaPrograma de Pós-Graduação em Ciências FarmacêuticasPorto Alegre, BR-RS2020mestradoinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGSinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)instacron:UFRGSTEXT001125079.pdf.txt001125079.pdf.txtExtracted Texttext/plain115231http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/220615/2/001125079.pdf.txt61ada3065ecd633c7a06d90aa8c820bbMD52ORIGINAL001125079.pdfTexto completoapplication/pdf1054488http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/220615/1/001125079.pdf6314461b63d2d9cab280ddb717d6d46bMD5110183/2206152022-07-06 04:57:49.361772oai:www.lume.ufrgs.br:10183/220615Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttps://lume.ufrgs.br/handle/10183/2PUBhttps://lume.ufrgs.br/oai/requestlume@ufrgs.br||lume@ufrgs.bropendoar:18532022-07-06T07:57:49Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)false
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