Atividade antibacteriana, sinérgica e antibiofilme de extrato etanólico de Mimosa tenuiflora (Fabaceae) frente a Staphyloccocus aureus de leite bovino

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2019
Autor(a) principal: CAVALCANTE, Marielly Bastos
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal Rural de Pernambuco
Rede Nordeste de Biotecnologia
Brasil
UFRPE
Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia (Renorbio)
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/8172
Resumo: Os Staphylococcus spp. com habilidade para formar biofilmes são cada vez mais conhecidos por causar infecções intramamárias persistentes e a busca por alternativas para inibir o desenvolvimento de biofilmes é fundamental, principalmente quando se utiliza plantas com potencial terapêutico. Desta forma, os objetivos desse estudo foram avaliar o efeito antimicrobiano, sinérgico e antibiofilme do extrato etanólico bruto de Mimosa tenuiflora (EEBMT) frente a Staphylococcus aureus produtores de biofilme, além de verificar a presença de bomba de efluxo como mecanismo de resistência dessas bactérias. Para a caracterização química dos compostos presentes no EEBMT, foram realizadas triagem fitoquímica e cromatografia líquida de ultra performance (UPLC). Testes fenotípicos foram utilizados para analisar a produção de biofilme, atividade antimicrobiana (com extrato etanólico e oxacilina) e antibiofilme, além do sinergismo (técnica de checkerboard) e presença de bomba de efluxo. A partir da análise do extrato foi possível identificar a presença de compostos fenólicos, antocianinas, derivados antracênicos e taninos hidrolisáveis. No teste fenotípico em microplacas, todos os isolados produziram biofilme. A atividade antimicrobiana do extrato vegetal e da oxacilina foi observada em 100% dos isolados. Com relação à formação de biofilme, o EEBMT foi eficaz durante a sua formação, porém não conseguiu reverter o biofilme quando o mesmo já estava consolidado. No checkerboard, foi possível observar que a associação do extrato com a oxacilina conseguiu reduzir a concentração bactericida mínima do antibiótico, mostrando que houve interação sinérgica entre ambos. Com relação à presença de bomba de efluxo, nenhum isolado foi positivo para o teste. Conclui-se que todos os Staphylococcus aureus utilizados nesse estudo apresentaram capacidade para produzir o biofilme, porém não apresentam bomba de efluxo. O extrato etanólico apresentou atividade antimicrobiana sobre todos os isolados e também mostrou ação contra biofilme em formação, não sendo eficaz contra biofilme já consolidado. A associação do EEBMT com oxacilina apresentou importante resultado sinérgico, sendo que a combinação das duas substâncias se mostrou mais eficaz quando comparado ao seu uso de forma isolada. A partir desses resultados, é possível considerar o extrato etanólico de M. tenuiflora como uma importante alternativa terapêutica, sendo promissora no combate a S. aureus formadores de biofilme.
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Para a caracterização química dos compostos presentes no EEBMT, foram realizadas triagem fitoquímica e cromatografia líquida de ultra performance (UPLC). Testes fenotípicos foram utilizados para analisar a produção de biofilme, atividade antimicrobiana (com extrato etanólico e oxacilina) e antibiofilme, além do sinergismo (técnica de checkerboard) e presença de bomba de efluxo. A partir da análise do extrato foi possível identificar a presença de compostos fenólicos, antocianinas, derivados antracênicos e taninos hidrolisáveis. No teste fenotípico em microplacas, todos os isolados produziram biofilme. A atividade antimicrobiana do extrato vegetal e da oxacilina foi observada em 100% dos isolados. Com relação à formação de biofilme, o EEBMT foi eficaz durante a sua formação, porém não conseguiu reverter o biofilme quando o mesmo já estava consolidado. No checkerboard, foi possível observar que a associação do extrato com a oxacilina conseguiu reduzir a concentração bactericida mínima do antibiótico, mostrando que houve interação sinérgica entre ambos. Com relação à presença de bomba de efluxo, nenhum isolado foi positivo para o teste. Conclui-se que todos os Staphylococcus aureus utilizados nesse estudo apresentaram capacidade para produzir o biofilme, porém não apresentam bomba de efluxo. O extrato etanólico apresentou atividade antimicrobiana sobre todos os isolados e também mostrou ação contra biofilme em formação, não sendo eficaz contra biofilme já consolidado. A associação do EEBMT com oxacilina apresentou importante resultado sinérgico, sendo que a combinação das duas substâncias se mostrou mais eficaz quando comparado ao seu uso de forma isolada. A partir desses resultados, é possível considerar o extrato etanólico de M. tenuiflora como uma importante alternativa terapêutica, sendo promissora no combate a S. aureus formadores de biofilme.Staphylococcus spp. with ability to form biofilms are increasingly known to cause persistent intramammary infections and the search for alternatives to inhibit the development of biofilms is critical, especially when using plants with therapeutic potential. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial, synergistic and antibiofilm effect of the crude ethanolic extract of Mimosa tenuiflora (CEEMT) against Staphylococcus aureus biofilm producers, in addition to verify the presence of efflux pump as mechanism of resistance of these bacteria. For the chemical characterization of the compounds present in CEEMT, phytochemical screening and ultra-performance liquid chromatography (UPLC) were performed. Phenotypic tests were used to analyze biofilm production, antimicrobial activity (with ethanolic extract and oxacillin) and antibiofilm, as well as synergism (checkerboard technique) and presence of efflux pump. From the analysis of the extract it was possible to identify the presence of phenolic compounds, anthocyanins, anthracene derivatives and hydrolysable tannins In the phenotypic test in microplates, all the isolates produced biofilm. The antimicrobial activity of the plant extract and oxacillin was observed in 100% of the isolates. Regarding biofilm formation, CEEMT was effective during its formation, but it was not able to revert the biofilm when it was already consolidated. In the checkerboard, it was possible to observe that the association of the extract with oxacillin was able to reduce the minimum bactericidal concentration of the antibiotic, showing that there was synergic interaction between both. Regarding the presence of efflux pump, no isolates were positive for the test. It is concluded that all the Staphylococcus aureus used in this study had the capacity to produce the biofilm, but did not present efflux pump. The ethanolic extract presented antimicrobial activity on all the isolates and also showed action against biofilm in formation, not being effective against already consolidated biofilm. Regarding the presence of efflux pump, no isolates were positive for the test. It is concluded that all the Staphylococcus aureus used in this study had the capacity to produce the biofilm, but did not present efflux pump. The association of EEBMT with oxacillin presented an important synergetic result, and the combination of the two substances proved to be more effective when compared to its use in isolation. From these results, it is possible to consider the ethanolic extract of M. tenuiflora as an important therapeutic alternative, being promising in the fight against S. aureus biofilm forming agents.Universidade Federal Rural de PernambucoRede Nordeste de BiotecnologiaBrasilUFRPEPrograma de Pós-Graduação em Biotecnologia (Renorbio)COSTA, Mateus Matiuzzi daQUEIROZ, Mário Adriano ÁvilaPEIXOTO, Rodolfo de MoraesMATOS, Maria Helena Tavares deRODRIGUES, Rafael Torres de SouzaCAVALCANTE, Marielly Bastos2019-08-22T14:28:00Z2019-01-31info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfCAVALCANTE, Marielly Bastos. Atividade antibacteriana, sinérgica e antibiofilme de extrato etanólico de Mimosa tenuiflora (Fabaceae) frente a Staphyloccocus aureus de leite bovino. 2019. 110 f. Tese (Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia (Renorbio)) - Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife.http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/8172porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPEinstname:Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE)instacron:UFRPE2019-08-22T14:28:00Zoai:tede2:tede2/8172Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede/PUBhttp://www.tede2.ufrpe.br:8080/oai/requestbdtd@ufrpe.br ||bdtd@ufrpe.bropendoar:2019-08-22T14:28Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPE - Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE)false
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