Avaliação da ação antibiofilme de soluções de ácido peracético 2,5 mg/mL, de cloreto de cetilpiridínio 0,5 mg/mL e de N-acetilcisteína 160 mg/mL nas superfícies da resina acrílica e da liga metálica de cobalto-cromo

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2024
Autor(a) principal: Moraes, Leonardo Guedes da Silva
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58131/tde-06112024-100343/
Resumo: Investigar a ação antibiofilme de soluções higienizadoras para Prótese Parcial Removível é de extrema importância para a saúde dos portadores destas próteses. O objetivo deste estudo foi comparar o efeito das soluções em biofilme multiespécie constituído por Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, Candida albicans e Candida glabrata, desenvolvido sobre as superfícies da resina acrílica e da liga metálica que compõem a estrutura de PPR. A amostra do experimento foi composta por 208 espécimes circulares, sendo 104 de resina acrílica termopolimerizável (RA) e 104 metálicos de cobalto-cromo (Co-Cr) (&#7443;14 mm x 4 mm). Os especímes foram confeccionados, numerados aleatoriamente e distribuídos em 4 grupos de imersão: AP - ácido peracético a 2,5 mg/mL (10 minutos); CPC - cloreto de cetilpiridínio a 0,5 mg/mL (10 minutos); NAC - N-acetilcisteína a 160 mg/mL (30 minutos); PBS - controle (30 minutos). Os espécimes foram avaliados quanto à contagem de Unidades Formadoras de Colônia (UFC) (n=9), à avaliação da atividade metabólica do biofilme (método XTT) (n=9), quantificação da área recoberta por microrganismos vivos e mortos (Live/Dead) (n=2), quantificação da área recoberta por matriz extracelular do biofilme (SPE; microscopia de fluorescência, MF) (n=2) e análise qualitativa da morfologia e superfície do biofilme (microscopia eletrônica de varredura, MEV) (n=1). Os dados obtidos foram testados quanto à normalidade e à homogeneidade de variância e, baseado nos resultados, foram aplicados ANOVA e pós-teste de Tukey, Mann-Whitney ou Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn com ajuste de Bonferroni (&alpha;=0,05). AP zerou a contagem de UFC/mL para C. albicans, C. glabrata e S. mutans em ambos os materiais, enquanto NAC obteve o mesmo resultado apenas para S. mutans. No ensaio de XTT, AP zerou a atividade metabólica do biofilme em Co-Cr, enquanto em RA, apresentou menor valor com diferença significante em relação a CPC (p<0,001). No Live/Dead, em RA para biofilme total, NAC apresentou maiores valores de área recoberta por microrganismo que CPC (p=0,014) e PBS (p=0,010) sem diferença para AP, enquanto em biofilme vivo PBS apresentou maiores valores que AP (p<0,001), CPC (p=0,003) e NAC (p<0,001). Em Co-Cr, para biofilme total, AP apresentou menores valores que CPC, NAC e PBS (p<0,001), enquanto para biofilme vivo, PBS apresentou maiores valores que AP, CPC e NAC (p<0,001). Quanto à SPE, em RA, CPC apresentou os menores valores de área recoberta que NAC (p=0,017), enquanto em Co-Cr, CPC e NAC apresentaram maiores valores que AP (p<0,001) e PBS (p<0,001). A análise de MEV apontou a aderência de biofilme uniforme após imersão nas soluções experimentais, porém AP apresentou espaços vazios maiores entre os aglomerados de biofilme, para ambos os materiais. A solução de ácido peracético a 2,5 mg/mL apresentou a mais efetiva ação antibiofilme, enquanto as soluções de cloreto de cetilpiridínio e N-Acetilcisteína tiveram ação antibiofilme intermediária, com diminuição da viabilidade celular, porém sem remoção do biofilme multiespécie. Nenhuma das soluções avaliadas foi capaz de remover completamente o biofilme aderido às superfícies da resina acrílica termopolimerizável e da liga metálica de Co-Cr.
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O objetivo deste estudo foi comparar o efeito das soluções em biofilme multiespécie constituído por Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, Candida albicans e Candida glabrata, desenvolvido sobre as superfícies da resina acrílica e da liga metálica que compõem a estrutura de PPR. A amostra do experimento foi composta por 208 espécimes circulares, sendo 104 de resina acrílica termopolimerizável (RA) e 104 metálicos de cobalto-cromo (Co-Cr) (&#7443;14 mm x 4 mm). Os especímes foram confeccionados, numerados aleatoriamente e distribuídos em 4 grupos de imersão: AP - ácido peracético a 2,5 mg/mL (10 minutos); CPC - cloreto de cetilpiridínio a 0,5 mg/mL (10 minutos); NAC - N-acetilcisteína a 160 mg/mL (30 minutos); PBS - controle (30 minutos). Os espécimes foram avaliados quanto à contagem de Unidades Formadoras de Colônia (UFC) (n=9), à avaliação da atividade metabólica do biofilme (método XTT) (n=9), quantificação da área recoberta por microrganismos vivos e mortos (Live/Dead) (n=2), quantificação da área recoberta por matriz extracelular do biofilme (SPE; microscopia de fluorescência, MF) (n=2) e análise qualitativa da morfologia e superfície do biofilme (microscopia eletrônica de varredura, MEV) (n=1). Os dados obtidos foram testados quanto à normalidade e à homogeneidade de variância e, baseado nos resultados, foram aplicados ANOVA e pós-teste de Tukey, Mann-Whitney ou Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn com ajuste de Bonferroni (&alpha;=0,05). AP zerou a contagem de UFC/mL para C. albicans, C. glabrata e S. mutans em ambos os materiais, enquanto NAC obteve o mesmo resultado apenas para S. mutans. No ensaio de XTT, AP zerou a atividade metabólica do biofilme em Co-Cr, enquanto em RA, apresentou menor valor com diferença significante em relação a CPC (p<0,001). No Live/Dead, em RA para biofilme total, NAC apresentou maiores valores de área recoberta por microrganismo que CPC (p=0,014) e PBS (p=0,010) sem diferença para AP, enquanto em biofilme vivo PBS apresentou maiores valores que AP (p<0,001), CPC (p=0,003) e NAC (p<0,001). Em Co-Cr, para biofilme total, AP apresentou menores valores que CPC, NAC e PBS (p<0,001), enquanto para biofilme vivo, PBS apresentou maiores valores que AP, CPC e NAC (p<0,001). Quanto à SPE, em RA, CPC apresentou os menores valores de área recoberta que NAC (p=0,017), enquanto em Co-Cr, CPC e NAC apresentaram maiores valores que AP (p<0,001) e PBS (p<0,001). A análise de MEV apontou a aderência de biofilme uniforme após imersão nas soluções experimentais, porém AP apresentou espaços vazios maiores entre os aglomerados de biofilme, para ambos os materiais. A solução de ácido peracético a 2,5 mg/mL apresentou a mais efetiva ação antibiofilme, enquanto as soluções de cloreto de cetilpiridínio e N-Acetilcisteína tiveram ação antibiofilme intermediária, com diminuição da viabilidade celular, porém sem remoção do biofilme multiespécie. Nenhuma das soluções avaliadas foi capaz de remover completamente o biofilme aderido às superfícies da resina acrílica termopolimerizável e da liga metálica de Co-Cr.Investigating the antibiofilm action of disinfectant solutions for Removable Partial Dentures (RPD) is of utmost importance for the health of the wearers. The aim of this study was to compare the effect of solutions on multispecies biofilm composed of Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, Candida albicans and Candida glabrata, developed on the surfaces of heat-polymerizing acrylic resin (AR) and cobalt-chromium alloy (Co-Cr) that compose RPD\'s structure. The experiment sample consisted of 208 circular specimens, consisting of 104 AR and 104 Co-Cr specimens (&#7443;14 mm x 4 mm). The specimens were fabricated, randomly numbered, and distributed into 4 immersion groups: PA - peracetic acid at 2.5 mg/mL (10 minutes); CPC - cetylpyridinium chloride at 0.5 mg/mL (10 minutes); NAC - N-Acetylcysteine at 160 mg/mL (30 minutes); PBS - PBS (control, 30 minutes). The specimens were evaluated for the count of Colony-Forming Units (CFU) (n=9), biofilm metabolic activity (XTT method) (n=9), quantification of the area covered by live and dead microorganisms (Live/Dead) (n=2), quantification of the area covered by the biofilm extracellular matrix (EPS; fluorescence microscopy, FM) (n=2), and qualitative analysis of biofilm\'s morphology and surface (scanning electron microscopy, SEM) (n=1). Data were tested for normality and variance homogeneity and based on the results, ANOVa and Tukey\'s post-test, Mann-Whitney or Kruskal-Wallis and Dunn\'s post-test with Bonferroni adjustment were applied (&alpha;=0.05). PA reduced CFU/mL count to zero for C. albicans, C. glabrata and S. mutans in both surfaces, while NAC achieved the same results only for S. mutans. For the XTT assay, PA eliminated metabolic activity of the biofilm on Co-Cr, while in AR demonstrated a significantly lower value compared to CPC (p<0.001). For Live/Dead, in AR for the total biofilm, NAC demonstrated higher values of area covered by microorganisms than CPC (p=0.014) and PBS (p=0.010) without difference for PA, while live biofilm, PBS presented higher values than PA (p<0.001), CPC (p=0.003) and NAC (p<0.001). In Co-Cr, for total biofilm, PA demonstrated lower values than CPC, NAC and PBS (p<0.001), while for live biofilm, PBS presented higher values than PA, CPC and NAC (p<0.001). Regarding EPS, for AR, CPC demonstrated lower values of covered area than NAC (p=0.017), while for Co-Cr, CPC and NAC presented higher values than PA (p<0.001) and PBS (p<0.001). SEM analysis indicated uniform biofilm adherence after immersion in experimental solutions, however, PA exhibited larger empty spaces between the biofilm clusters for both materials. Peracetic acid demonstrated the most effective antibiofilm action, while cetylpyridinium chloride and N-Acetylcisteine exhibited intermediate antibiofilm action. However, none of the agents were able to completely remove the biofilm adhered to the surfaces of heat-polymerizing acrylic resin and Co-Cr alloy.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPSouza, Valéria Oliveira Pagnano deMoraes, Leonardo Guedes da Silva2024-03-26info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58131/tde-06112024-100343/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2024-11-14T20:23:02Zoai:teses.usp.br:tde-06112024-100343Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212024-11-14T20:23:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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Evaluation of antibiofilm action of peracetic acid 2,5 mg/mL, cetylpyridinium chloride 0,5 mg/mL and N-acetylcysteine 160 mg/mL solutions on acrylic resin and cobalt-chromium alloy surfaces
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description Investigar a ação antibiofilme de soluções higienizadoras para Prótese Parcial Removível é de extrema importância para a saúde dos portadores destas próteses. O objetivo deste estudo foi comparar o efeito das soluções em biofilme multiespécie constituído por Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, Candida albicans e Candida glabrata, desenvolvido sobre as superfícies da resina acrílica e da liga metálica que compõem a estrutura de PPR. A amostra do experimento foi composta por 208 espécimes circulares, sendo 104 de resina acrílica termopolimerizável (RA) e 104 metálicos de cobalto-cromo (Co-Cr) (&#7443;14 mm x 4 mm). Os especímes foram confeccionados, numerados aleatoriamente e distribuídos em 4 grupos de imersão: AP - ácido peracético a 2,5 mg/mL (10 minutos); CPC - cloreto de cetilpiridínio a 0,5 mg/mL (10 minutos); NAC - N-acetilcisteína a 160 mg/mL (30 minutos); PBS - controle (30 minutos). Os espécimes foram avaliados quanto à contagem de Unidades Formadoras de Colônia (UFC) (n=9), à avaliação da atividade metabólica do biofilme (método XTT) (n=9), quantificação da área recoberta por microrganismos vivos e mortos (Live/Dead) (n=2), quantificação da área recoberta por matriz extracelular do biofilme (SPE; microscopia de fluorescência, MF) (n=2) e análise qualitativa da morfologia e superfície do biofilme (microscopia eletrônica de varredura, MEV) (n=1). Os dados obtidos foram testados quanto à normalidade e à homogeneidade de variância e, baseado nos resultados, foram aplicados ANOVA e pós-teste de Tukey, Mann-Whitney ou Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn com ajuste de Bonferroni (&alpha;=0,05). AP zerou a contagem de UFC/mL para C. albicans, C. glabrata e S. mutans em ambos os materiais, enquanto NAC obteve o mesmo resultado apenas para S. mutans. No ensaio de XTT, AP zerou a atividade metabólica do biofilme em Co-Cr, enquanto em RA, apresentou menor valor com diferença significante em relação a CPC (p<0,001). No Live/Dead, em RA para biofilme total, NAC apresentou maiores valores de área recoberta por microrganismo que CPC (p=0,014) e PBS (p=0,010) sem diferença para AP, enquanto em biofilme vivo PBS apresentou maiores valores que AP (p<0,001), CPC (p=0,003) e NAC (p<0,001). Em Co-Cr, para biofilme total, AP apresentou menores valores que CPC, NAC e PBS (p<0,001), enquanto para biofilme vivo, PBS apresentou maiores valores que AP, CPC e NAC (p<0,001). Quanto à SPE, em RA, CPC apresentou os menores valores de área recoberta que NAC (p=0,017), enquanto em Co-Cr, CPC e NAC apresentaram maiores valores que AP (p<0,001) e PBS (p<0,001). A análise de MEV apontou a aderência de biofilme uniforme após imersão nas soluções experimentais, porém AP apresentou espaços vazios maiores entre os aglomerados de biofilme, para ambos os materiais. A solução de ácido peracético a 2,5 mg/mL apresentou a mais efetiva ação antibiofilme, enquanto as soluções de cloreto de cetilpiridínio e N-Acetilcisteína tiveram ação antibiofilme intermediária, com diminuição da viabilidade celular, porém sem remoção do biofilme multiespécie. Nenhuma das soluções avaliadas foi capaz de remover completamente o biofilme aderido às superfícies da resina acrílica termopolimerizável e da liga metálica de Co-Cr.
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