Colágeno aniônico: propriedades físico-químicas, estruturas e comportamento biológico

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2000
Autor(a) principal: Bet, Marcos Roberto
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-26022026-111306/
Resumo: Este trabalho descreve a preparação de materiais de colágeno com diferentes densidades de carga superficial. O objetivo foi avaliar as propriedades físico-químicas, estruturais e o comportamento biológico destes materiais, em função da densidade de carga superficial e do pH. Os materiais nativos foram preparados por métodos convencionais, enquanto que as superfícies com densidade de cargas variáveis foram obtidas por hidrólise alcalina seletiva dos grupos carboxiamidas dos resíduos de asparaginas e glutaminas, presentes na molécula de tropocolágeno. Os materiais foram caracterizados por titulação potenciométrica, espectroscopia no infravermelho, medidas de estabilidade térmica e tensão superficial, ensaios de embebição em água, microscopia eletrônica de varredura (MEV), estabilidade à colagenase e por ensaios preliminares in vitro com cultura de células. Os resultados de titulação potenciométrica mostraram que a pH 7,4, superfícies de cargas negativas variáveis podem ser obtidas com um incremento de até 130 cargas totais, em relação à estrutura nativa. Os resultados de espectroscopia no infravermelho confirmaram a preservação da estrutura secundária da unidade básica do polímero, o tropocolágeno. Os valores de estabilidade térmica diminuíram progressivamente em função do tempo de tratamento alcalino e do pH e as micrografias de MEV mostraram que a organização macromolecular (fibrilas) do colágeno nativo é alterada significativamente após 96 h de hidrólise alcalina, para dar origem a estruturas amorfas. Resultados de tensão superficial, embebição em água e estabilidade à colagenase mostraram-se dependentes da densidade de carga da molécula de colágeno, que é alterada pelo incremento de grupos carboxilas na molécula de colágeno e consequentemente também do pH. Ensaios preliminares com cultura de células mostraram que estas conseguem aderir e crescer normalmente, tanto em membranas de colágeno nativo como hidrolisado. Estes resultados experimentais mostram que o controle da hidrólise de grupos carboxiamidas da matriz colagênica permite a obtenção de materiais colagênicos com propriedades estruturais e físico-químicas controladas para aplicações biomédicas.
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Os materiais foram caracterizados por titulação potenciométrica, espectroscopia no infravermelho, medidas de estabilidade térmica e tensão superficial, ensaios de embebição em água, microscopia eletrônica de varredura (MEV), estabilidade à colagenase e por ensaios preliminares in vitro com cultura de células. Os resultados de titulação potenciométrica mostraram que a pH 7,4, superfícies de cargas negativas variáveis podem ser obtidas com um incremento de até 130 cargas totais, em relação à estrutura nativa. Os resultados de espectroscopia no infravermelho confirmaram a preservação da estrutura secundária da unidade básica do polímero, o tropocolágeno. Os valores de estabilidade térmica diminuíram progressivamente em função do tempo de tratamento alcalino e do pH e as micrografias de MEV mostraram que a organização macromolecular (fibrilas) do colágeno nativo é alterada significativamente após 96 h de hidrólise alcalina, para dar origem a estruturas amorfas. Resultados de tensão superficial, embebição em água e estabilidade à colagenase mostraram-se dependentes da densidade de carga da molécula de colágeno, que é alterada pelo incremento de grupos carboxilas na molécula de colágeno e consequentemente também do pH. Ensaios preliminares com cultura de células mostraram que estas conseguem aderir e crescer normalmente, tanto em membranas de colágeno nativo como hidrolisado. Estes resultados experimentais mostram que o controle da hidrólise de grupos carboxiamidas da matriz colagênica permite a obtenção de materiais colagênicos com propriedades estruturais e físico-químicas controladas para aplicações biomédicas.This work describes the preparation of collagen materials with different superficial charge density. The aim of this study was to evaluate the physical chemical and structural properties and the biological behavior of these materials as function of superficial charge density and pH. The native materials were prepared by conventional methods while those with variable superficial charge density were obtained by alkaline selective hydrolysis of carboxyamide groups of asparagine and glutamine residues, present in tropocollagen molecule. The materials were characterized by potentiometric titration, infrared spectroscopy, thermal stability, surface tension, water absorption, scanning electron microscopy (SEM), collagenase stability and by preliminary in vitro cellular culture assay. The potentiometric titration results showed that at pH 7.4 the variable negative charge surfaces could be obtained with an increment until 130 charges, compared with the native structures. The infrared spectra guarantee the secondary structure of the basic unity of the polymer, the tropocollagen, was preserved. The thermal stability decreased with increasing of the alkaline treatment time and SEM micrographs showed that macromolecular assembly (fibrils) of the native collagen is significantly altered after 96 hours of alkaline hydrolysis leading to the amorphous structures. The surface tension, water absorption and collagenase stability results were dependent on the charge density of the collagen molecule. These were altered by increment in carboxyl group in the collagen molecule and pH too. Preliminary cellular culture assay revealed a normal adhesion and growth on the surface of both hydrolysed and native collagen. These experimental results show that the controlled hydrolysis of carboxyamides of collagen matrices may provide collagen materials with controlled structural and physicochemical properties for biomedical applications.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPGoissis, GilbertoBet, Marcos Roberto2000-04-14info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-26022026-111306/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2026-03-02T14:54:02Zoai:teses.usp.br:tde-26022026-111306Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212026-03-02T14:54:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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