TsTX-V, uma nova neurotoxina do veneno do escorpião Tityus serrulatus: isolamento e caracterização parcial química e eletrofarmacológica

• Ano de defesa: 1991
• Autor(a) principal: Arantes, Eliane Candiani
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Não informado.
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-19032026-141525/

Os venenos de escorpiões tem sido extensivamente estudados principalmente devido à importância de seus efeitos sobre canais iônicos de células excitáveis. A fração XI do veneno de T. serrulatus, obtida através de cromatografia do extrato aquoso tamponado em coluna de CM-celulose- 52, utilizando tampão bicarbonato de amônio pH 7,8 como eluente, causa grande prolongamento do potencial de ação do nervo vago de coelho (MILL et alii, 1985). Com o objetivo de isolar o componente desta fração responsável por este efeito a mesma foi recromatografada em coluna de CM-celulose-52, utilizando três concentrações (0,1M, 0,2M e 0,3M) de NH4HCO3. Desta recromatografia foram obtidas três frações, XI-1, XI-2 e XI-3. As frações XI-1 e XI-2 foram consideradas puras por apresentarem: pico de eluição simétrico, banda eletroforética única nas eletroforeses com SDS ou sem SDS e na focalização isoelétrica, e apenas um resíduo amino-terminal. 1) Toxina XI-1 (TsTX): representa aproximadamente 20% da fração XI, possui PM-mínimo 6.670, seqüência N-terminal Lys-Lys-Asx-Gly- Tyr-Pro-Val..., pI = 7,4, DL50 endovenosa = 102 ± 16 µg/kg (camundongo). Como a fração XI, também causa prolongamento do componente B do potencial de ação do nervo vago de coelho. Sua composição em aminoácidos e seqüência N-terminal inicial identificam-na com a TsTX (COUTINHO NETTO, 1975). 2) Toxina XI-2 (TsTX-V): é o componente mais abundante da fração XI (47%), possui PM-mínimo 7.230, seqüencia N-terminal Lys-His-Asx-Gly-Tyr-Pro-Val-Glx-Gly-Asx-Asx..., pI = 8,0, DL50 endovenosa = 94 ± 7 mg/kg (camundongo). Causa prolongado efeito hipertensor em ratos anestesiados, provavelmente devido a liberação de mediadores pelas supra-renais e terminações adrenérgicas periféricas. É a principal responsável pelo prolongamento do componente B do PA causado pela fração XI. Seu efeito é visível a partir da concentração de 0,03 mg/ml, e em concentrações maiores que 0,3 mg/ml causa também significativa despolarização do nervo. Seu efeito é abolido pela TTX, mas não por despolarização induzida por aumento de [K+] no meio externo. Concluímos que a mesma é, provavelmente, uma toxina do tipo α. Sua composição em aminoácidos e sequência N-terminal é diferente das outras toxinas de T. serrulatus já descritas, e foi denominada TsTX-V. Outras toxinas purificadas neste trabalho: 3) Toxina XIII (TsTX-I ou TsTX-Y): obtida diretamente da cromatografia do extrato aquoso tamponado. Foi parcialmente caracterizada por ARANTES et alii (1989) e identificou-se com a TsTX-I (TOLEDO e NEVES, 1976) ou TsTX-Y (POSSANI et alii, 1977). Possui DL50 endovenosa = 76 ± 9 mg/kg (camundongo) e pI = 9,7. Em nervo vago de coelho causa redução da amplitude dos componentes B e C do PA, e um pequeno prolongamento do componente B. 4) Toxina IX-4 (TsTX-III): obtida da recromatografia da fração IX. Possui PM-mínimo 6.710, N-terminal Lys, DL50 endovenosa 321 ± 30 mg/kg (camundongo) e composição em aminoácidos semelhante à da toxina III-8 (POSSANI et alii, 1981), denominada TsTX-III (SAMPAIO et alii, 1991). Não alterou o PA composto do nervo vago de coelho na concentração de 1,0 mg/ml. 5) Toxina IX-5 (TsTX-II): obtida da recromatografia da fração IX. Possui PM-mínimo 7.320, N-terminal Gly, e composição em aminoácidos semelhante à da toxina T1vI (SAMPAIO et alii, 1983), denominada TsTX-II (SAMPAIO et alii, 1991). Não alterou o PA composto do nervo vago de coelho na concentração de 1,0 mg/ml. 6) Toxina X-2 (TsTX-IV): é o componente mais abundante da fração X (63%), possui PM-mínimo 6.450, N-terminal Lys, DL50 endovenosa 826 ± 156 mg/kg (camundongo), e composição em aminoácidos semelhante à da TsTX-IV (ARANTES et alii, 1989). Não alterou o PA composto do nervo vago de coelho na concentração de 1,0 mg/ml.