Desenvolvimento de procedimentos automatizados em fluxo para as determinações de uréia, proteína total e albumina em plasma de sangue animal
| Ano de defesa: | 2000 |
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| Tipo de documento: | Tese |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
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| Instituição de defesa: |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-09022026-150250/ |
Resumo: | Neste trabalho são propostos os desenvolvimentos de três procedimentos espectrofotométricos automatizados em fluxo para as determinações de uréia, proteina total e albumina em plasma de sangue animal. Os procedimentos foram desenvolvidos de forma evolutiva, iniciando-se por um sistema empregando injetor proporcional para a determinação de uréia, o qual incluía uma coluna contendo fragmentos da leguminosa feijão guandu (Cajanus cajan), fonte natural da enzima urease. O segundo sistema proposto era constituído de injetor proporcional e válvula solenóide para a determinação de proteína total, e possibilitava a diluição em linha das amostras. O terceiro procedimento desenvolvido foi baseado no conceito de multicomutação e amostragem binária. Com este sistema, uma alíquota da solução da amostra inserida era dividida através de dois percursos analíticos distintos, possibilitando as determinações de albumina e proteína total. Nos dois primeiros sistemas propostos foram utilizados espectrofotômetros comerciais e para o terceiro procedimento empregou-se um espectrofotômetro, construído no laboratório, à base de LED e fototransistor. O gerenciamento das soluções, referentes aos procedimentos empregando válvulas solenóides, bem como a aquisição dos dados eram realizados com um computador equipado com interface de controle, empregando um programa escrito em linguagem QuickBASIC 4.5. O sistema proposto para a determinação de uréia apresentou como principais características analíticas um r.s.d. de 1,36 % (n=10), frequência analítica de 30 determinações por hora e um coeficiente de correlação para a faixa de concentração entre 0 e 12,0 mmol L-1 de uréia de 0,9861. O sistema proposto para a determinação de proteína total apresentou r.s.d. de 2,8 % (n=10), frequência analítica de 76 determinações por hora e coeficiente de correlação para a faixa de concentração entre 0 e 20,0 g L-1 de proteína total de 0,998. Para o sistema sequencial visando as determinações de albumina e proteína total os r.s.d. calculados foram de 1,5 e 0,8 % (n=10), frequência analítica de 45 determinações para cada analito e coeficientes de correlação de 0,998 e 0,999, respectivamente para albumina e proteína total na faixa de concentração entre 0 e 15 g L-1 de albumina. Os resultados obtidos com os três sistemas propostos foram comparados com os respectivos métodos oficiais de análises, e aplicando-se o teste t-pareado não foi observada diferença significativa em níveis de confiança entre 90 e 95%. |
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Desenvolvimento de procedimentos automatizados em fluxo para as determinações de uréia, proteína total e albumina em plasma de sangue animalDevelopment of automated flow procedures for the determination of urea, total protein and albumin in animal blood plasmaalbuminalbuminamulticommutationmulticomutaçãoproteína totaltotal proteinureauréiaNeste trabalho são propostos os desenvolvimentos de três procedimentos espectrofotométricos automatizados em fluxo para as determinações de uréia, proteina total e albumina em plasma de sangue animal. Os procedimentos foram desenvolvidos de forma evolutiva, iniciando-se por um sistema empregando injetor proporcional para a determinação de uréia, o qual incluía uma coluna contendo fragmentos da leguminosa feijão guandu (Cajanus cajan), fonte natural da enzima urease. O segundo sistema proposto era constituído de injetor proporcional e válvula solenóide para a determinação de proteína total, e possibilitava a diluição em linha das amostras. O terceiro procedimento desenvolvido foi baseado no conceito de multicomutação e amostragem binária. Com este sistema, uma alíquota da solução da amostra inserida era dividida através de dois percursos analíticos distintos, possibilitando as determinações de albumina e proteína total. Nos dois primeiros sistemas propostos foram utilizados espectrofotômetros comerciais e para o terceiro procedimento empregou-se um espectrofotômetro, construído no laboratório, à base de LED e fototransistor. O gerenciamento das soluções, referentes aos procedimentos empregando válvulas solenóides, bem como a aquisição dos dados eram realizados com um computador equipado com interface de controle, empregando um programa escrito em linguagem QuickBASIC 4.5. O sistema proposto para a determinação de uréia apresentou como principais características analíticas um r.s.d. de 1,36 % (n=10), frequência analítica de 30 determinações por hora e um coeficiente de correlação para a faixa de concentração entre 0 e 12,0 mmol L-1 de uréia de 0,9861. O sistema proposto para a determinação de proteína total apresentou r.s.d. de 2,8 % (n=10), frequência analítica de 76 determinações por hora e coeficiente de correlação para a faixa de concentração entre 0 e 20,0 g L-1 de proteína total de 0,998. Para o sistema sequencial visando as determinações de albumina e proteína total os r.s.d. calculados foram de 1,5 e 0,8 % (n=10), frequência analítica de 45 determinações para cada analito e coeficientes de correlação de 0,998 e 0,999, respectivamente para albumina e proteína total na faixa de concentração entre 0 e 15 g L-1 de albumina. Os resultados obtidos com os três sistemas propostos foram comparados com os respectivos métodos oficiais de análises, e aplicando-se o teste t-pareado não foi observada diferença significativa em níveis de confiança entre 90 e 95%.In this work is proposed the development of three spectrophotometric automated flow procedures for urea, total protein and albumin determinations in animal blood plasma. Procedures were developed in a evolutive way, begining with a system emploing a proportional injector for urea determination. This system included an enzymatic column with pieces of guandu bean leguminous (Cajanus cajan), that is a natural source of urease enzyme. The second system proposed for total protein determination was constituted by a proportional injector and a three way solenoid valve (hibrid system), in order to perform the on-line diluition of the samples. The last one was based on multicommutation and binary sampling concepts. The sample volume inserted was splited and directed through two different analytical pathway, to allow both albumin and total protein determination. In the first and second proposed systems commercial spectrophotometers were employed. In the third one, a home made spectrophotometer based on LED and phototransistors was constructed and employed. To control valves switching, peristaltic pumping flow rate and to perfom data aquisition, a computer with interface control and a QuickBASIC 4.5 software was utilized. The proposed system for urea determination presented a r.s.d. 1.36 % (n=10), a analytical frequency of 30 determinations per hour and a 0.9861 correlation coefficient (0 to 12.0 mmol L-1 urea). The system for total protein determination presented a r.s.d. of 2.8 % (n=10), a analytical frequency of 76 determinations per hour and a 0.998 coefficient correlation between 0 to 20.0 g L-1 of total protein. The analytical features of the sequential system developed for albumin and total protein determination were r.s.d. of 1.5 and 0.8 % (n=10), 45 determinations per hour for each analyte and 0.998 and 0.999 correlation coefficients, respectively for albumin and total protein in the range of 0 to 15 g L-1. Results obtained with the three proposed systems were compared with the official methods and no significant difference was observed at 90 and 95% confidence level.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPReis, Boaventura Freire dosLuca, Gilmara Caseri de2000-11-28info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-09022026-150250/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2026-02-13T13:28:02Zoai:teses.usp.br:tde-09022026-150250Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212026-02-13T13:28:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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