Desenvolvimento, caracterização e aplicação de marcadores microssatélites para estudos populacionais em Scaptotrigona bipunctata</i (Hymenoptera, Apidae, Meliponina)

• Ano de defesa: 2012
• Autor(a) principal: Alvarenga, Paulo Emílio Ferreira e
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Scaptotrigona bipunctata; Biblioteca enriquecida de DNA; Enriched library; Estrutura populacional; Genética de populações; Meliponina; Meliponíneos; Meliponines; Microsatellite; Microssatélites; Population genetics; Population structure; SSR
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59131/tde-16042025-114346/

As abelhas da tribo Meliponini, conhecidas como abelhas indígenas sem ferrão, são encontradas em áreas tropicais e subtropicais e estão entre os principais polinizadores da flora brasileira. Todas são abelhas generalistas. A maioria das espécies está ameaçada de extinção devido à fragmentação dos ecossistemas onde vivem, causada principalmente pelo desmatamento para as monoculturas e criação de gado. Scaptotrigona bipunctata vive em troncos ocos de árvores vivas ou mortas, compõe colônias populosas e estoca grande quantidade de alimento. As abelhas são pretas e de um porte pequeno. São encontradas nos estados do sul e sudeste brasileiros, principalmente. O uso de marcadores moleculares em estudos de genética de populações cresceu muito em produtividade com o advento da manipulação do DNA. Os microssatélites foram descobertos na década de 1980 e, graças às suas características, são próprios para o emprego em uma série de estudos populacionais. O objetivo desse trabalho foi desenvolver um conjunto de locos microssatélites de S. bipunctata para ser utilizado em futuros estudos populacionais, de manejo e conservação da espécie. Paralelamente, procuramos caracterizar os locos microssatélites quanto ao número de alelos, heterozigose esperada e observada; testar a possibilidade de transferência dos locos microssatélites desenvolvidos para S. bipunctata para outras espécies de abelha indígena sem ferrão; caracterizar a distribuição das frequências alélicas dos microssatélites aqui desenvolvidos em S. bipunctata e usá-los para inferir a estruturação populacional da espécie. Foi produzido um conjunto de 13 pares de primers microssatélites, utilizando a técnica de biblioteca genômica enriquecida. Esses primers foram caracterizados utilizando 20 abelhas não relacionadas de 20 ninhos naturais coletados em Muzambinho (MG), Ribeirão Preto (SP), Franca (SP), Apucarana (PR), Rio Bonito do Iguaçu (PR), Campo Alegre (SC), Rio do Sul (SC) e Porto Alegre (RS). Todos os 13 pares de primers desenhados e sintetizados tiveram sucesso na amplificação. O número de alelos por loco variou de 2 a 11 (média de 4,5). A heterozigose esperada variou de 0,14 a 0,85 e a heterozigose observada variou de 0,15 a 0,70. Os valores de Conteúdo de Informação de Polimorfismo variaram de 0,180 até 0,804. Não foram detectados indícios significativos de ligação entre os locos desenvolvidos. O teste de possibilidade de transferência dos primers de S. bipunctata para outras espécies de meliponíneos demonstrou que as sequências que flanqueiam as regiões microssatélites são conservadas, uma vez que a maioria dos pares de primers amplificou em outras espécies testadas (11 espécies). Foi detectada estruturação intrapopulacional, interpopulacional e entre clusters de S. bipunctata. Os resultados obtidos neste trabalho mostram que os primers desenvolvidos para S. bipunctata são bem informativos e adequados para futuros estudos de diversidade genética, estrutura populacional, agregação de ninhos, conservação e manejo, filogeografia e parentesco.