Avaliação de diferentes meios para maturação in vitro de oócitos imaturos procedentes de ciclos de reprodução assistida
| Ano de defesa: | 2024 |
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| Tipo de documento: | Dissertação |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
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| Instituição de defesa: |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
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| País: |
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17145/tde-20022025-102431/ |
Resumo: | A infertilidade conjugal é um problema de saúde pública com crescente prevalência na população, levando muitos casais a procurarem tratamentos de Reprodução Assistida. No entanto, em alguns casos, mesmo após a estimulação ovariana controlada (EOC), não é possível obter oócitos maduros capazes de serem fertilizados, devido a assincronia folicular. O objetivo principal deste estudo foi estabelecer estratégias para maturação in vitro (MIV) de oócitos imaturos, e os objetivos específicos incluíram: avaliar dois meios de cultivo para MIV de oócitos imaturos em estadio de vesícula germinativa e metáfase I, analisar a taxa de maturação e a morfologia oocitária, e avaliar marcadores citoplasmáticos, nucleares e mitocondriais de qualidade oocitária. É um estudo experimental desenvolvido no Centro de Reprodução Humana do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo, no qual foram incluídas mulheres com idade entre 18 e 40 anos, com diferentes causas de infertilidade. As pacientes foram submetidas a EOC e os complexos cumulus-oócitos foram coletados. Os oócitos imaturos foram divididos em dois grupos: o grupo I, no qual foi realizada a MIV bifásica, utilizando um meio comercial personalizado, suplementado com peptídeo natriurético tipo C na pré-MIV, e hormônio anfirregulina na MIV; e o grupo II, no qual foi realizado a MIV convencional, cuja base foi um meio convencional, suplementado, principalmente, com hormônio do crescimento. Em relação ao grupo I, a taxa de maturação foi de 33,33%, e no grupo II, a taxa foi relativamente superior, visto que 52,56% dos oócitos alcançaram o estadio de metáfase II, apesar de não haver diferenças estatísticas. Através da microscopia confocal, foi possível observar que a MIV pode influenciar o fuso meiótico dos oócitos maturados in vitro, ao passo que a técnica parece não interferir negativamente na distribuição mitocondrial dos oócitos. Os dados mostram que este método de MIV pode ser promissor para o resgate de oócitos imaturos procedentes de ciclos de fertilização in vitro, visto que é possível maximizar o número de oócitos viáveis para fertilização. No entanto, são necessários estudos maiores para comprovar a eficiência da MIV de resgate. |
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Avaliação de diferentes meios para maturação in vitro de oócitos imaturos procedentes de ciclos de reprodução assistidaEvaluation of different media for in vitro maturation of immature oocytes from assisted reproduction cyclesIn vitro maturationFuso meióticoImmature oocytesMaturação in vitroMaturação oocitáriaMeiotic spindleMitochondriaMitocôndriasOócitos imaturosOocyte maturationOocyte rescueResgate de oócitosA infertilidade conjugal é um problema de saúde pública com crescente prevalência na população, levando muitos casais a procurarem tratamentos de Reprodução Assistida. No entanto, em alguns casos, mesmo após a estimulação ovariana controlada (EOC), não é possível obter oócitos maduros capazes de serem fertilizados, devido a assincronia folicular. O objetivo principal deste estudo foi estabelecer estratégias para maturação in vitro (MIV) de oócitos imaturos, e os objetivos específicos incluíram: avaliar dois meios de cultivo para MIV de oócitos imaturos em estadio de vesícula germinativa e metáfase I, analisar a taxa de maturação e a morfologia oocitária, e avaliar marcadores citoplasmáticos, nucleares e mitocondriais de qualidade oocitária. É um estudo experimental desenvolvido no Centro de Reprodução Humana do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo, no qual foram incluídas mulheres com idade entre 18 e 40 anos, com diferentes causas de infertilidade. As pacientes foram submetidas a EOC e os complexos cumulus-oócitos foram coletados. Os oócitos imaturos foram divididos em dois grupos: o grupo I, no qual foi realizada a MIV bifásica, utilizando um meio comercial personalizado, suplementado com peptídeo natriurético tipo C na pré-MIV, e hormônio anfirregulina na MIV; e o grupo II, no qual foi realizado a MIV convencional, cuja base foi um meio convencional, suplementado, principalmente, com hormônio do crescimento. Em relação ao grupo I, a taxa de maturação foi de 33,33%, e no grupo II, a taxa foi relativamente superior, visto que 52,56% dos oócitos alcançaram o estadio de metáfase II, apesar de não haver diferenças estatísticas. Através da microscopia confocal, foi possível observar que a MIV pode influenciar o fuso meiótico dos oócitos maturados in vitro, ao passo que a técnica parece não interferir negativamente na distribuição mitocondrial dos oócitos. Os dados mostram que este método de MIV pode ser promissor para o resgate de oócitos imaturos procedentes de ciclos de fertilização in vitro, visto que é possível maximizar o número de oócitos viáveis para fertilização. No entanto, são necessários estudos maiores para comprovar a eficiência da MIV de resgate.Marital infertility is a public health problem with increasing prevalence in the population, leading many couples to seek Assisted Reproduction treatments. However, in some cases, even after controlled ovarian stimulation (EOC), it is not possible to obtain mature oocytes capable of being fertilized, due to follicular asynchrony. The main objective of this study was to establish strategies for in vitro maturation (IVM) of immature oocytes, and the specific objectives included: evaluating two culture media for IVM of immature oocytes at the germinal vesicle stage and metaphase I, analyzing the maturation rate and oocyte morphology, and evaluate cytoplasmic, nuclear and mitochondrial markers of oocyte quality. It is an experimental study developed at the Human Reproduction Center of the Hospital das Clínicas of the Faculty of Medicine of Ribeirão Preto of the University of São Paulo, in which women aged between 18 and 40 years old, with different causes of infertility, were included. Patients underwent EOC and cumulus-oocyte complexes were collected. The immature oocytes were divided into two groups: group I, in which biphasic IVM was performed, using a customized commercial medium, supplemented with type C natriuretic peptide in pre-IMV, and amphiregulin hormone in IVM; and group II, in which conventional IVM was performed, based on a conventional medium, supplemented mainly with growth hormone. In relation to group I, the maturation rate was 33.33%, and in group II, the rate was relatively higher, since 52.56% of the oocytes reached the metaphase II stage, although there were no statistical differences. Using confocal microscopy, it was possible to observe that IVM can influence the meiotic spindle of oocytes matured in vitro, while the technique does not appear to negatively interfere with the mitochondrial distribution of oocytes. The data show that this IVM method may be promising for rescuing immature oocytes from in vitro fertilization cycles, as it is possible to maximize the number of viable oocytes for fertilization. However, larger studies are needed to prove the efficiency of rescue IVM.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPFurtado, Cristiana Libardi MirandaReis, Rosana Maria dosMorato, Ana Luiza Camargos2024-10-08info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17145/tde-20022025-102431/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-04-24T18:18:02Zoai:teses.usp.br:tde-20022025-102431Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-04-24T18:18:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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