Metabolismo oxidativo, quimiotaxia e armadilhas extracelulares por neutrófilos expostos a estrogênios e progestagênios dos contraceptivos hormonais combinados

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Mendonça, Carlos Eduardo Ferareze
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Armadilhas extracelulares; Chemotaxis; Complement system; Contraceptives; Contraceptivos; Metabolismo oxidativo; Neutrófilos; Neutrophil extracelular traps; Neutrophils; Oxidative metabolism; Quimiotaxia; Sistema complemento
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60140/tde-05122024-085522/

O uso de contraceptivos hormonais combinados (CHC) é o método de contracepção mais difundido no mundo, tendo impacto positivo na saúde e inclusão social da mulher. Contudo, desde o seu advento nos anos 60, os CHC têm se somado aos fatores de risco de tromboembolismo venoso (TEV), que é a terceira causa mais comum de morte em todo o mundo. A contracepção resulta da ação dos componentes estrogênicos e progestagênicos nos CHC, os quais exercem um feedback negativo sobre a produção endógena de estrógeno e progesterona, inibindo a ovulação. As formulações mais recentes de CHC, destacando-se o 17β estradiol (E2) com acetato de nomesgestrol (NOMAC), têm apresentado risco relativo ao TEV igual ou discretamente menor quando comparadas àquelas contendo etinilestradiol (EE) e levonorgestrel (LNG), as quais foram introduzidas no mercado farmacêutico nos anos 70 e ainda estão em uso. Assim, a combinação EE/LNG tem sido a referência para a avaliação de novos estrogênios e progestagênios tanto para estudos sobre a fisiopatologia quanto para a epidemiologia do evento trombótico. O TEV resulta da desregulação nas interações entre endotélio vascular, coagulação e células e componentes da inflamação, tais como neutrófilos e sistema complemento, sendo, portanto, caracterizado como um processo de tromboinflamação ou imunotrombose. A compreensão do envolvimento das funções dos neutrófilos neste processo ainda não está completamente esclarecida. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito dos componentes hormonais EE, LNG, E2 e NOMAC, isolados ou combinados, sobre o metabolismo oxidativo, a quimiotaxia e a liberação de armadilhas extracelulares (NETs) dos neutrófilos. Para tanto, neutrófilos do sangue periférico de mulheres não usuárias de CHC foram previamente expostos aos hormônios isolados ou às combinações e, então, estimulados por vias dependentes ou independentes de receptor, com phorbol miristato acetato (PMA) ou Zimosan opsonizado por proteínas do complemento do soro humano normal (Zi/SHN), respectivamente. A citotoxicidade dos hormônios foi avaliada pelo teste de exclusão do azul de Tripan, redução do sal de tetrazólio amarelo e liberação da lactato desidrogenase. O metabolismo oxidativo foi avaliado pela produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) por método de quimioluminescência dependente de luminol e o consumo de oxigênio em câmara para oximetria; a quimiotaxia foi avaliada por microscopia do ensaio de migração em câmara de Boyden em resposta aos quimioatraentes n-formilmetionil-leucil-fenilalanina (fMLP) ou peptídeos do complemento; a expressão de receptores para complemento, CR1 e CR3, foi determinada por imunofenotipagem em citômetro de fluxo e a liberação de NETs por microscopia de epifluorescência confocal pela sobreposição dos corantes para DNA, mieloperoxidase e histona citrulinada. Os resultados da exposição dos neutrófilos aos hormônios foram: 1) Ausência de citotoxicidade; 2) Aumento da produção de ERO estimulada por PMA pelos neutrófilos expostos ao EE+LNG ou E2+NOMAC comparada àquela dos neutrófilos sem hormônios (controle); 3) Aceleração da cinética de produção de ERO estimulada por PMA por neutrófilos expostos ao EE+LNG, NOMAC ou E2+NOMAC quando comparados ao controle, bem como para os neutrófilos expostos ao NOMAC quando comparados ao LNG, e para aqueles expostos ao EE e estimulados por Zi/SHN quando comparados ao E2; 4) Nenhuma alteração na expressão de CR1 e CR3 foi observada; 5) A quimiotaxia dos neutrófilos expostos ao E2+NOMAC estimulada pelo fMLP foi menor comparada ao controle; 6) A liberação de NETs pelos neutrófilos expostos ao EE+LNG ou E2+NOMAC foi maior comparada ao controle. Em conjunto, os resultados mostram que a exposição às combinações EE+LNG e E2+NOMAC alteram a produção de ERO, quimiotaxia e liberação de NETs dos neutrófilos. Estas funções dos neutrófilos estão envolvidas na fisiopatologia da imunotrombose. Assim, os resultados apresentados podem contribuir para a compreensão das interações entre neutrófilos e coagulação, e trazer novas perspectivas para a redução do risco de TEV associado ao uso dos CHC.