Estrutura da secretina do pilus tipo IV de Xanthomonas citri

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Araujo, Gabriel Guarany de
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Xanthomonas; crio-microscopia eletrônica; cryo-electron microscopy; outer membrane vesicles; pilus tipo IV; secretin; secretina; type IV pilus; vesículas de membrana externa
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-28052025-150509/

Xanthomonas citri é o agente causador do cancro cítrico, uma doença significante para a citricultura mundial. Para sobreviver no ambiente e em seus hospedeiros, esta bactéria dispõe uma variedade de sistemas secretórios e apêndices extracelulares que permitem que colonize superfícies, adquira nutrientes, e possa estabeleçer a infecção. Um desses sistemas é o pilus tipo IV, filamentos retráteis que permitem motilidade sobre superfícies em diversas bactérias e que em X. citri também contribuem para formação de biofilmes e adesão a superfícies foliares. Estes filamentos são formados por múltiplas cópias da proteína PilA, e emergem da superfície da célula pelo canal de membrana externa formado por um oligômero de PilQ, membro da família das secretinas. Crio-microscopia eletrônica foi utilizada para determinar tanto a estrutura de PilQ, co-purificada em complexo com a proteína ligante de peptidoglicano TsaP, quanto do filamento do pilus tipo IV em si, a partir de amostras preparadas diretamente de culturas de X. citri. Estas estruturas são então descritas em comparação com homólogos estruturais determinados de patógenos humanos. Além disso, também foi realizada uma investigação das vesículas de membrana externa produzidas por X. citri, que são capazes de formar longos tubos membranosos. Imagens de crio-microscopia eletrônica revelaram diferentes estados dos tubos, indo de vesículas encadeadas até a presença de lumens continuamente fundidos. Vesículas purificadas foram caracterizadas por diferentes técnicas, revelando o seu enriquecimento relativo em receptores dependentes de TonB relacionados à aquisição de nutrientes, assim como a sua associação com sideróforos e atividades de esterase e protease. Desta forma, este trabalho lida com diferentes estruturas extracelulares de um fitopatógeno que podem influenciar a capacidade desta bactéria colonizar os seus hospedeiros vegetais.