Análise química e morfológica da dentina hipersensível exposta a soluções contendo epigalocatequina 3-galato encapsulada em nanopartículas de quitosana
| Ano de defesa: | 2025 |
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| Tipo de documento: | Dissertação |
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Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58133/tde-25072025-111449/ |
Resumo: | O objetivo deste estudo foi investigar in vitro o efeito na estrutura química e morfológica da dentina hipersensível tratada com soluções contendo epigalocatequina 3-galato (EGCG) e quitosana, por meio da análise de Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier com acessório de refletância atenuada (FTIR-ATR), Espectroscopia de Raios-X por Dispersão de Energia (EDS) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) para avaliação de número de túbulos dentinários, e mensuração da área de túbulos dentinários abertos (ODT). Para o estudo, foram utilizados espécimes de dentina radicular bovina em formato circular, com 6 mm de diâmetro, e 1 mm de espessura. Para simular a dentina hipersensível, os espécimes foram imersos em EDTA (0,5M) por 5 minutos para abertura dos túbulos dentinários. Posteriormente, os espécimes de dentina hipersensível foram divididos em 6 grupos (n=6) de acordo com a solução empregada: EGCG encapsulada em nanopartículas de quitosana (Nchi + EGCG); Nanopartículas de quitosana (Nchi); EGCG; Elmex Sensitive (Controle positivo); água deionizada (controle negativo), e sem aplicação de solução. A aplicação das soluções para tratamento da dentina hipersensível, foi realizada com auxílio de microbrush (2 minutos), em seguida submetidos a imersão em ácido cítrico (2 minutos, 0,3%, pH 2,45, 5ml) seguido da imersão em saliva artificial (60 minutos), 4 vezes por dia (15:00; 16:00; 17:00; 18:00) durante 7 dias. Os dados quantitativos tiveram sua distribuição e a homogeneidade dos dados foram verificadas usando o teste de Kolmogorov e Smirnov. A ANOVA e teste Tukey foram utilizados para análise dos dados. Os espectros obtidos por meio do FTIR das amostras tratadas com as soluções de Nchi + EGCG, EGCG, Nchi, e Elmex sensitive demonstraram aumento na intensidade nas bandas de fosfato, carbonato, amida Tipo I, II, e III em relação a dentina sem aplicação da solução, enquanto o grupo tratado com água deionizada apresentou a menor intensidade nessas mesmas bandas. A análise de EDS encontrou menores valores de razão Ca/P para os grupos tratados com as soluções Nchi, Nchi +EGCG, e água deionizada, enquanto Elmex sensitve teve a melhor performance entre as soluções experimentais. Para a análise em MEV o número de túbulos não demonstrou diferenças (P>0,05), contudo para análise de área de ODT, as soluções de Nchi + EGCG (p=0,00), e EGCG (p=0,001), demonstraram as menores áreas em relação aos demais grupos, indicando obliteração tubular. Conclui-se que a solução Nchi + EGCG alterou a estrutura química e morfológica da dentina hipersensível, através da intensificação das ligações do colágeno, e pela redução da área de túbulos dentinários abertos. |
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Análise química e morfológica da dentina hipersensível exposta a soluções contendo epigalocatequina 3-galato encapsulada em nanopartículas de quitosanaChemical and morphological analysis of hypersensitive dentin exposed to experimental solutions containing epigallocatechin-3-gallate encapsulated in chitosan nanoparticlesAnálise químicaChemical analysisChitosanDentinDentin hypersensitivityDentinaEGCGEGCGHipersensibilidade da dentinaQuitosanaO objetivo deste estudo foi investigar in vitro o efeito na estrutura química e morfológica da dentina hipersensível tratada com soluções contendo epigalocatequina 3-galato (EGCG) e quitosana, por meio da análise de Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier com acessório de refletância atenuada (FTIR-ATR), Espectroscopia de Raios-X por Dispersão de Energia (EDS) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) para avaliação de número de túbulos dentinários, e mensuração da área de túbulos dentinários abertos (ODT). Para o estudo, foram utilizados espécimes de dentina radicular bovina em formato circular, com 6 mm de diâmetro, e 1 mm de espessura. Para simular a dentina hipersensível, os espécimes foram imersos em EDTA (0,5M) por 5 minutos para abertura dos túbulos dentinários. Posteriormente, os espécimes de dentina hipersensível foram divididos em 6 grupos (n=6) de acordo com a solução empregada: EGCG encapsulada em nanopartículas de quitosana (Nchi + EGCG); Nanopartículas de quitosana (Nchi); EGCG; Elmex Sensitive (Controle positivo); água deionizada (controle negativo), e sem aplicação de solução. A aplicação das soluções para tratamento da dentina hipersensível, foi realizada com auxílio de microbrush (2 minutos), em seguida submetidos a imersão em ácido cítrico (2 minutos, 0,3%, pH 2,45, 5ml) seguido da imersão em saliva artificial (60 minutos), 4 vezes por dia (15:00; 16:00; 17:00; 18:00) durante 7 dias. Os dados quantitativos tiveram sua distribuição e a homogeneidade dos dados foram verificadas usando o teste de Kolmogorov e Smirnov. A ANOVA e teste Tukey foram utilizados para análise dos dados. Os espectros obtidos por meio do FTIR das amostras tratadas com as soluções de Nchi + EGCG, EGCG, Nchi, e Elmex sensitive demonstraram aumento na intensidade nas bandas de fosfato, carbonato, amida Tipo I, II, e III em relação a dentina sem aplicação da solução, enquanto o grupo tratado com água deionizada apresentou a menor intensidade nessas mesmas bandas. A análise de EDS encontrou menores valores de razão Ca/P para os grupos tratados com as soluções Nchi, Nchi +EGCG, e água deionizada, enquanto Elmex sensitve teve a melhor performance entre as soluções experimentais. Para a análise em MEV o número de túbulos não demonstrou diferenças (P>0,05), contudo para análise de área de ODT, as soluções de Nchi + EGCG (p=0,00), e EGCG (p=0,001), demonstraram as menores áreas em relação aos demais grupos, indicando obliteração tubular. Conclui-se que a solução Nchi + EGCG alterou a estrutura química e morfológica da dentina hipersensível, através da intensificação das ligações do colágeno, e pela redução da área de túbulos dentinários abertos.The aim of this study was to investigate, in vitro, the effect of solutions containing epigallocatechin 3-gallate (EGCG) and chitosan on the chemical and morphological structure of hypersensitive dentin. This was achieved through the analysis of Fourier Transform Infrared Spectroscopy with Attenuated Total Reflectance (FTIR-ATR), Energy Dispersive X-ray Spectroscopy (EDS), and Scanning Electron Microscopy (SEM) to evaluate the number of dentinal tubules and measure the area of open dentinal tubules (ODT). Bovine root dentin specimens, circular in shape, with a diameter of 6 mm and a thickness of 1 mm, were used for the study. To simulate hypersensitive dentin, the specimens were immersed in EDTA (0.5 M) for 5 minutes to open the dentinal tubules. Subsequently, the hypersensitive dentin specimens were divided into 6 groups (n = 6) according to the treatment solution: EGCG encapsulated in chitosan nanoparticles (Nchi + EGCG), chitosan nanoparticles (Nchi), EGCG, Elmex Sensitive (positive control), deionized water (negative control), and no solution application. The treatment solutions were applied using a microbrush (2 minutes), followed by immersion in citric acid (2 minutes, 0.3%, pH 2.45, 5 mL) and artificial saliva (60 minutes), four times per day (3:00 PM, 4:00 PM, 5:00 PM, 6:00 PM) for 7 days. The distribution and homogeneity of the quantitative data were assessed using the Kolmogorov-Smirnov test. ANOVA and the Tukey test were used for data analysis. FTIR spectra of the samples treated with Nchi + EGCG, EGCG, Nchi, and Elmex Sensitive solutions showed increased intensity in the phosphate, carbonate, and amide bands (Type I, II, and III) compared to untreated dentin, while the group treated with deionized water exhibited the lowest intensity in these same bands. EDS analysis revealed lower Ca/P ratios in the groups treated with Nchi, Nchi + EGCG, and deionized water, while Elmex Sensitive demonstrated the best performance among the experimental solutions. SEM analysis showed no significant differences (P > 0.05) in the number of dentinal tubules; however, for the ODT area analysis, the Nchi + EGCG (p = 0.00) and EGCG (p = 0.001) solutions exhibited the smallest areas compared to the other groups, indicating tubule obliteration. In conclusion, the Nchi + EGCG solution altered the chemical and morphological structure of hypersensitive dentin by intensifying collagen bonding and reducing the area of open dentinal tubules.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPCorona, Silmara Aparecida MiloriBepu, Davi Ariel Nobuo2025-02-18info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58133/tde-25072025-111449/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-08-13T14:43:02Zoai:teses.usp.br:tde-25072025-111449Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-08-13T14:43:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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O objetivo deste estudo foi investigar in vitro o efeito na estrutura química e morfológica da dentina hipersensível tratada com soluções contendo epigalocatequina 3-galato (EGCG) e quitosana, por meio da análise de Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier com acessório de refletância atenuada (FTIR-ATR), Espectroscopia de Raios-X por Dispersão de Energia (EDS) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) para avaliação de número de túbulos dentinários, e mensuração da área de túbulos dentinários abertos (ODT). Para o estudo, foram utilizados espécimes de dentina radicular bovina em formato circular, com 6 mm de diâmetro, e 1 mm de espessura. Para simular a dentina hipersensível, os espécimes foram imersos em EDTA (0,5M) por 5 minutos para abertura dos túbulos dentinários. Posteriormente, os espécimes de dentina hipersensível foram divididos em 6 grupos (n=6) de acordo com a solução empregada: EGCG encapsulada em nanopartículas de quitosana (Nchi + EGCG); Nanopartículas de quitosana (Nchi); EGCG; Elmex Sensitive (Controle positivo); água deionizada (controle negativo), e sem aplicação de solução. A aplicação das soluções para tratamento da dentina hipersensível, foi realizada com auxílio de microbrush (2 minutos), em seguida submetidos a imersão em ácido cítrico (2 minutos, 0,3%, pH 2,45, 5ml) seguido da imersão em saliva artificial (60 minutos), 4 vezes por dia (15:00; 16:00; 17:00; 18:00) durante 7 dias. Os dados quantitativos tiveram sua distribuição e a homogeneidade dos dados foram verificadas usando o teste de Kolmogorov e Smirnov. A ANOVA e teste Tukey foram utilizados para análise dos dados. Os espectros obtidos por meio do FTIR das amostras tratadas com as soluções de Nchi + EGCG, EGCG, Nchi, e Elmex sensitive demonstraram aumento na intensidade nas bandas de fosfato, carbonato, amida Tipo I, II, e III em relação a dentina sem aplicação da solução, enquanto o grupo tratado com água deionizada apresentou a menor intensidade nessas mesmas bandas. A análise de EDS encontrou menores valores de razão Ca/P para os grupos tratados com as soluções Nchi, Nchi +EGCG, e água deionizada, enquanto Elmex sensitve teve a melhor performance entre as soluções experimentais. Para a análise em MEV o número de túbulos não demonstrou diferenças (P>0,05), contudo para análise de área de ODT, as soluções de Nchi + EGCG (p=0,00), e EGCG (p=0,001), demonstraram as menores áreas em relação aos demais grupos, indicando obliteração tubular. Conclui-se que a solução Nchi + EGCG alterou a estrutura química e morfológica da dentina hipersensível, através da intensificação das ligações do colágeno, e pela redução da área de túbulos dentinários abertos. |
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