Avaliação de extratos dos estágios evolutivos esquistossômulo, verme adulto e ovo no diagnóstico sorológico da esquistossomose mansoni em área de baixa endemicidade.
| Ano de defesa: | 2023 |
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Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-27032026-151220/ |
Resumo: | Os programas de controle da esquistossomose mansoni no Brasil obtiveram sucesso na redução da incidência de casos graves da doença. No entanto, ainda existem áreas com transmissão, nas quais indivíduos apresentam uma baixa carga parasitária. Nessas áreas, os diagnósticos pelos métodos parasitológicos se mostram pouco sensíveis, sendo assim, as técnicas sorológicas por apresentar alta sensibilidade podem aprimorar o diagnóstico da infecção por Schistosoma mansoni. Nesse contexto, como forma de contribuir para o avanço de novas metodologias diagnósticas, este trabalho utilizou extratos dos estágios evolutivos do parasito (esquistossômulo, verme adulto e ovo) como fontes de antígenos e comparou sua eficácia na detecção de anticorpos IgG anti-S. mansoni através do ensaio de ELISA no soro de indivíduos residentes numa área de baixa endemicidade. As amostras positivas pelo ELISA-IgG foram submetidas à técnica de Western Blotting, para identificação de frações proteicas imunodominantes presentes nos extratos utilizados. O extrato de verme apresentou os melhores parâmetros de diagnóstico no ensaio ELISA IgG, com sensibilidade de 93,3% e especificidade de 96,7%. Observou-se que, pela técnica de ELISA, os três extratos apresentaram desempenho semelhante quanto à positividade nas amostras testadas. Entre as amostras analisadas, 28% foram reagentes no ELISA IgG com o extrato de esquistossômulo, 30% com o extrato de verme e 30,5% com o extrato de ovo. Foram observadas bandas imunodominantes diferentes para os três extratos utilizados. As frações proteicas de 52, 28 e 110 kDa foram as que apresentaram os melhores parâmetros de diagnóstico nos extratos de esquistossômulo, verme adulto e ovo, respectivamente. Verificou-se que 62,1%, 69% e 62,5% das amostras reagentes pelo ELISA IgG foram confirmadas pelo WB no extrato de esquistossômulo, verme e ovo, respectivamente. Os presentes resultados demonstram que o extrato de verme adulto apresentou melhor desempenho no imunodiagnóstico, podendo ser utilizado na detecção da infecção por S. mansoni em uma área de baixa endemicidade. |
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Avaliação de extratos dos estágios evolutivos esquistossômulo, verme adulto e ovo no diagnóstico sorológico da esquistossomose mansoni em área de baixa endemicidade.Evaluation of extracts from the evolutionary stages of schistosomula, adult worm and egg in the serological diagnosis of schistosomiasis mansoni in an area of low endemicit.esquistossomose mansoni; baixa endemicidade; diagnóstico sorológico; ELISA; Western Blottingschistosomiasis mansoni; low endemicity; serological diagnosis; ELISA; Western BlottingOs programas de controle da esquistossomose mansoni no Brasil obtiveram sucesso na redução da incidência de casos graves da doença. No entanto, ainda existem áreas com transmissão, nas quais indivíduos apresentam uma baixa carga parasitária. Nessas áreas, os diagnósticos pelos métodos parasitológicos se mostram pouco sensíveis, sendo assim, as técnicas sorológicas por apresentar alta sensibilidade podem aprimorar o diagnóstico da infecção por Schistosoma mansoni. Nesse contexto, como forma de contribuir para o avanço de novas metodologias diagnósticas, este trabalho utilizou extratos dos estágios evolutivos do parasito (esquistossômulo, verme adulto e ovo) como fontes de antígenos e comparou sua eficácia na detecção de anticorpos IgG anti-S. mansoni através do ensaio de ELISA no soro de indivíduos residentes numa área de baixa endemicidade. As amostras positivas pelo ELISA-IgG foram submetidas à técnica de Western Blotting, para identificação de frações proteicas imunodominantes presentes nos extratos utilizados. O extrato de verme apresentou os melhores parâmetros de diagnóstico no ensaio ELISA IgG, com sensibilidade de 93,3% e especificidade de 96,7%. Observou-se que, pela técnica de ELISA, os três extratos apresentaram desempenho semelhante quanto à positividade nas amostras testadas. Entre as amostras analisadas, 28% foram reagentes no ELISA IgG com o extrato de esquistossômulo, 30% com o extrato de verme e 30,5% com o extrato de ovo. Foram observadas bandas imunodominantes diferentes para os três extratos utilizados. As frações proteicas de 52, 28 e 110 kDa foram as que apresentaram os melhores parâmetros de diagnóstico nos extratos de esquistossômulo, verme adulto e ovo, respectivamente. Verificou-se que 62,1%, 69% e 62,5% das amostras reagentes pelo ELISA IgG foram confirmadas pelo WB no extrato de esquistossômulo, verme e ovo, respectivamente. Os presentes resultados demonstram que o extrato de verme adulto apresentou melhor desempenho no imunodiagnóstico, podendo ser utilizado na detecção da infecção por S. mansoni em uma área de baixa endemicidade.Control programs for schistosomiasis mansoni in Brazil have been successful in reducing the incidence of severe cases of the disease. However, there are still areas with transmission, in which individuals have a low parasite load. In these areas, diagnoses by parasitological methods are not very sensitive, therefore, serological techniques, due to their high sensitivity, can improve the diagnosis of infection by Schistosoma mansoni. In this context, as a way of contributing to the advancement of new diagnostic methodologies, this work used extracts from the evolutionary stages of the parasite (schistosomula, adult worm and egg) as sources of antigens and compared their effectiveness in detecting anti-S. mansoni through the ELISA test on the serum of individuals residing in an area of low endemicity. Positive samples by ELISA-IgG were submitted to the Western Blotting technique to identify immunodominant protein fractions present in the extracts used. The worm extract showed the best diagnostic parameters in the ELISA IgG assay, with a sensitivity of 93.3% and specificity of 96.7%. It was observed that, using the ELISA technique, the three extracts showed similar performance in terms of positivity in the tested samples. Among the analyzed samples, 28% were reactive in the ELISA IgG with the schistosomulus extract, 30% with the worm extract and 30.5% with the egg extract. Different immunodominant bands were observed for the three extracts used. The protein fractions of 52, 28 and 110 kDa were the ones that presented the best diagnostic parameters in extracts of schistosomula, adult worm and egg, respectively. It was verified that 62.1%, 69% and 62.5% of the reactive samples by the IgG ELISA were confirmed by WB in the extract of schistosomula, worm and egg, respectively. The present results demonstrate that the adult worm extract performed better in immunodiagnosis and can be used in the detection of S. mansoni infection in an area of low endemicity.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPGryschek, Ronaldo Cesar BorgesMarques, Natália Regina2023-05-16info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-27032026-151220/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2026-04-01T18:47:02Zoai:teses.usp.br:tde-27032026-151220Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212026-04-01T18:47:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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