Estudos estruturais e termodinâmicos da lectina ligante de D-manose, KM+, por métodos espectroscópicos
| Ano de defesa: | 1999 |
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| Tipo de documento: | Tese |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
| Idioma: | por |
| Instituição de defesa: |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75131/tde-13032026-094928/ |
Resumo: | A lectina KM+ apresentou um espectro de dicroísmo circular (CD) novo e incomum que pôde ser explicado por um alto conteúdo de prolina, o qual estaria induzindo a deformação da estrutura-β e/ou voltas incomuns. Medidas de fluorescência resolvida no tempo da KM+, em pH 7,0, mostraram um decaimento biexponencial com τ1 = 2,3 e τ2 = 0,4 ns e esses resultados foram os mesmos na presença de D-manose, o açúcar ligante da KM+. A KM+ mostrou-se uma lectina muito rígida, sendo muito estável sob uma ampla variedade de condições de desnaturação (ureia, guanidina, hidrólise, pH, etc.). Somente a incubação por 60 minutos a 333-338 K (60-65°C) e pH básico extremo foram capazes de induzir mudanças conformacionais que puderam ser observadas por medidas de CD e fluorescência. Os dados de CD são típicos de desnaturação proteica associada a mudanças no estado global da molécula. |
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Estudos estruturais e termodinâmicos da lectina ligante de D-manose, KM+, por métodos espectroscópicosStructural and thermodynamic studies of the D-mannose-binding lectin, KM+, by spectroscopic methodscircular dichroismconformational stabilitydicroísmo circularestabilidade conformacional.fluorescencefluorescênciaKM+ lectinlectina KM+A lectina KM+ apresentou um espectro de dicroísmo circular (CD) novo e incomum que pôde ser explicado por um alto conteúdo de prolina, o qual estaria induzindo a deformação da estrutura-β e/ou voltas incomuns. Medidas de fluorescência resolvida no tempo da KM+, em pH 7,0, mostraram um decaimento biexponencial com τ1 = 2,3 e τ2 = 0,4 ns e esses resultados foram os mesmos na presença de D-manose, o açúcar ligante da KM+. A KM+ mostrou-se uma lectina muito rígida, sendo muito estável sob uma ampla variedade de condições de desnaturação (ureia, guanidina, hidrólise, pH, etc.). Somente a incubação por 60 minutos a 333-338 K (60-65°C) e pH básico extremo foram capazes de induzir mudanças conformacionais que puderam ser observadas por medidas de CD e fluorescência. Os dados de CD são típicos de desnaturação proteica associada a mudanças no estado global da molécula.KM+ lectin exhibited a novel and unusual circular dichroism (CD) spectrum that could be explained by a high proline content that would be inducing deformation of the β-structure and/or unusual turns. Time-resolved measurements of fluorescence of the KM+, at pH 7.0, showed a biexponential decay with τ1 = 2.3 and τ2 = 0.4 ns and these results were the same in the presence of D-mannose, the sugar binding of KM+. KM+ was shown to be a very rigid lectin, which was very stable under a broad variety of the denaturation conditions (urea, guanidine, hydrolysis, pH, etc.). Only incubation for 60 minutes at 333-338 K (60-65°C) and extreme basic pH were able to induce conformational changes which could be observed by CD and fluorescence measurements. Data from CD are typical of protein denaturation associated with changes in the overall state of the molecule.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPBeltramini, Leila MariaLucca, Rosemeire Aparecida da Silva de1999-03-12info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75131/tde-13032026-094928/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2026-03-16T13:11:10Zoai:teses.usp.br:tde-13032026-094928Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212026-03-16T13:11:10Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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A lectina KM+ apresentou um espectro de dicroísmo circular (CD) novo e incomum que pôde ser explicado por um alto conteúdo de prolina, o qual estaria induzindo a deformação da estrutura-β e/ou voltas incomuns. Medidas de fluorescência resolvida no tempo da KM+, em pH 7,0, mostraram um decaimento biexponencial com τ1 = 2,3 e τ2 = 0,4 ns e esses resultados foram os mesmos na presença de D-manose, o açúcar ligante da KM+. A KM+ mostrou-se uma lectina muito rígida, sendo muito estável sob uma ampla variedade de condições de desnaturação (ureia, guanidina, hidrólise, pH, etc.). Somente a incubação por 60 minutos a 333-338 K (60-65°C) e pH básico extremo foram capazes de induzir mudanças conformacionais que puderam ser observadas por medidas de CD e fluorescência. Os dados de CD são típicos de desnaturação proteica associada a mudanças no estado global da molécula. |
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