L-asparaginase de Erwinia chrysanthemi expressa em sistema Pichia pastoris: otimização das condições de cultivo em biorreator.

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2025
Autor(a) principal: Ortenzio, Ygor Tadeu
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Biochemical reactors
Bioprocesses
Bioprocessos
Chemical engineering
Engenharia química
Proteínas recombinantes
Reatores bioquímicos
Recombinant proteins
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-22082025-074145/
Resumo: A L-asparaginase (ASNase) é o principal agente terapêutico no tratamento da leucemia linfoblástica aguda (LLA). Além disso, essa enzima representa 40% de todas as enzimas comercializadas na área da saúde, estando incluída na lista de medicamentos essenciais da Organização Mundial da Saúde (OMS). Esta tese descreve o processo de produção da ASNase recombinante de Erwinia chrysanthemi utilizando uma linhagem de Pichia pastoris capaz de realizar glicosilação semelhante à humana. Foram avaliados os efeitos do pH (3,0, 4,0, 5,0, 6,0 e 7,0) e de diferentes proporções de metanol e sorbitol (100% metanol, 80% metanol/20% sorbitol, 60% metanol/40% sorbitol, 40% metanol/60% sorbitol e 20% metanol/80% sorbitol; C-mol/C-mol) no processo de produção. Embora a otimização das condições não tenha alterado significativamente a expressão da enzima recombinante, a melhor condição de cultivo pH 7,0 e 40% metanol/60% sorbitol resultou em uma atividade volumétrica final de 1576 U.L¹ após 99 horas de processo, com um aumento de quase seis vezes na pureza da ASNase em relação ao total de proteínas no sobrenadante. Ademais, a adição de sorbitol na fase de indução reduziu a velocidade de consumo de oxigênio em 42%. Dessa forma, este estudo demonstra o potencial da combinação de diferentes estratégias para viabilizar a produção de ASNase recombinante em P. pastoris.
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