Análise in vitro do potencial bioestimulador de colágeno da fibrina rica em plaquetas associada ao Matrixyl e ao Tetrapeptidio GEKG
| Ano de defesa: | 2025 |
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| Tipo de documento: | Dissertação |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
| Idioma: | por |
| Instituição de defesa: |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25149/tde-13082025-093122/ |
Resumo: | O envelhecimento cutâneo é um processo multifatorial que afeta diferentes estruturas e camadas faciais, resultando em perda de volume, flacidez e alterações na elasticidade. Bioestimuladores de colágeno são amplamente utilizados na prática clínica com o objetivo de reverter ou amenizar essas alterações. Entre os recursos disponíveis, destacam-se os concentrados plaquetários autólogos, como a Fibrina Rica em Plaquetas injetável (i-PRF), devido à sua biocompatibilidade, custo reduzido e capacidade de promover regeneração tecidual por meio de fatores de crescimento. Paralelamente, peptídeos sinalizadores como o Matrixyl (palmitoyl pentapeptídeo-4) e o GEKG (tetrapeptídeo-21) têm sido utilizados por estimularem a síntese de colágeno e outros componentes da matriz extracelular. Contudo, há escassez de estudos avaliando o uso combinado dessas substâncias, especialmente em formulações injetáveis. Diante disso, este estudo teve como objetivo investigar in vitro os efeitos sinérgicos da i-PRF associada aos peptídeos Matrixyl ou GEKG sobre a viabilidade celular e expressão gênica de fibroblastos dérmicos humanos. O delineamento experimental contemplou seis grupos de tratamento: grupo controle (meio de cultura padrão), i-PRF isolada, Matrixyl isolado, GEKG isolado, associação de i-PRF com Matrixyl e associação de i-PRF com GEKG. A viabilidade celular foi avaliada por ensaios de MTT, cristal violeta e RealTime-Glo, enquanto a expressão dos genes COL1A1, FN1 e HAS1 foi quantificada por RT-qPCR. Os resultados demonstraram que os peptídeos isolados apresentaram tendência à redução da viabilidade celular, especialmente em tempos prolongados, enquanto a i-PRF, isoladamente ou em associação, promoveu aumento significativo da viabilidade e da atividade metabólica celular. Em relação à expressão gênica, os grupos que combinaram i-PRF com peptídeos bioativos apresentaram aumento significativo na expressão de genes relacionados à matriz extracelular, particularmente após 72 horas de tratamento. Destaca-se o grupo i-PRF + GEKG, que apresentou os melhores resultados em termos de expressão gênica, indicando um efeito sinérgico promissor. Esses achados sugerem que a i-PRF pode mitigar possíveis efeitos deletérios dos peptídeos isolados, ao mesmo tempo em que potencializa sua ação bioestimuladora, reforçando a hipótese de que essa combinação representa uma alternativa segura e eficaz para aplicação clínica na regeneração e rejuvenescimento cutâneo. |
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Análise in vitro do potencial bioestimulador de colágeno da fibrina rica em plaquetas associada ao Matrixyl e ao Tetrapeptidio GEKGIn vitro analysis of the collagen biostimulating potential of platelet-rich fibrin associated with matrixyl and GEKG tetrapeptideColágeno tipo ICollagen type IFibrina rica em plaquetasPeptídeosPeptidesPlatelet-rich fibrinO envelhecimento cutâneo é um processo multifatorial que afeta diferentes estruturas e camadas faciais, resultando em perda de volume, flacidez e alterações na elasticidade. Bioestimuladores de colágeno são amplamente utilizados na prática clínica com o objetivo de reverter ou amenizar essas alterações. Entre os recursos disponíveis, destacam-se os concentrados plaquetários autólogos, como a Fibrina Rica em Plaquetas injetável (i-PRF), devido à sua biocompatibilidade, custo reduzido e capacidade de promover regeneração tecidual por meio de fatores de crescimento. Paralelamente, peptídeos sinalizadores como o Matrixyl (palmitoyl pentapeptídeo-4) e o GEKG (tetrapeptídeo-21) têm sido utilizados por estimularem a síntese de colágeno e outros componentes da matriz extracelular. Contudo, há escassez de estudos avaliando o uso combinado dessas substâncias, especialmente em formulações injetáveis. Diante disso, este estudo teve como objetivo investigar in vitro os efeitos sinérgicos da i-PRF associada aos peptídeos Matrixyl ou GEKG sobre a viabilidade celular e expressão gênica de fibroblastos dérmicos humanos. O delineamento experimental contemplou seis grupos de tratamento: grupo controle (meio de cultura padrão), i-PRF isolada, Matrixyl isolado, GEKG isolado, associação de i-PRF com Matrixyl e associação de i-PRF com GEKG. A viabilidade celular foi avaliada por ensaios de MTT, cristal violeta e RealTime-Glo, enquanto a expressão dos genes COL1A1, FN1 e HAS1 foi quantificada por RT-qPCR. Os resultados demonstraram que os peptídeos isolados apresentaram tendência à redução da viabilidade celular, especialmente em tempos prolongados, enquanto a i-PRF, isoladamente ou em associação, promoveu aumento significativo da viabilidade e da atividade metabólica celular. Em relação à expressão gênica, os grupos que combinaram i-PRF com peptídeos bioativos apresentaram aumento significativo na expressão de genes relacionados à matriz extracelular, particularmente após 72 horas de tratamento. Destaca-se o grupo i-PRF + GEKG, que apresentou os melhores resultados em termos de expressão gênica, indicando um efeito sinérgico promissor. Esses achados sugerem que a i-PRF pode mitigar possíveis efeitos deletérios dos peptídeos isolados, ao mesmo tempo em que potencializa sua ação bioestimuladora, reforçando a hipótese de que essa combinação representa uma alternativa segura e eficaz para aplicação clínica na regeneração e rejuvenescimento cutâneo.Cutaneous aging is a multifactorial process that affects various facial structures and layers, resulting in volume loss, skin laxity, and decreased elasticity. Collagen biostimulators are widely used in clinical practice to mitigate these changes. Among them, autologous platelet concentrates such as injectable Platelet-Rich Fibrin (i-PRF) stand out due to their biocompatibility, low cost, and capacity to promote tissue regeneration through the release of growth factors. Additionally, signaling peptides such as Matrixyl (palmitoyl pentapeptide-4) and GEKG (tetrapeptide-21) have been employed due to their ability to stimulate collagen synthesis and other components of the extracellular matrix. However, studies investigating their combined useespecially in injectable formulationsremain scarce. This study aimed to evaluate in vitro the synergistic effects of i-PRF in combination with Matrixyl or GEKG on the viability and gene expression of human dermal fibroblasts. The experimental design comprised six treatment groups: control (standard culture medium), i-PRF alone, Matrixyl alone, GEKG alone, i-PRF + Matrixyl, and i-PRF + GEKG. Cell viability was assessed using MTT, crystal violet, and RealTime-Glo assays, and gene expression of COL1A1, FN1, and HAS1 was measured by RT-qPCR. The results showed that peptides alone tended to reduce cell viability over time, while i-PRF, either alone or combined with peptides, significantly enhanced both viability and metabolic activity. Gene expression was significantly increased in groups treated with i-PRF and peptides, particularly after 72 hours, with the i-PRF + GEKG group showing the most robust response. These findings suggest that i-PRF may counteract potential deleterious effects of isolated peptides while enhancing their biostimulatory potential, supporting its use as a safe and effective strategy for clinical applications in skin regeneration and rejuvenation.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPBuzalaf, Marilia Afonso RabeloPaccola, Ana Giulia Lenci2025-06-18info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25149/tde-13082025-093122/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPReter o conteúdo por motivos de patente, publicação e/ou direitos autoriais.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-08-14T17:50:02Zoai:teses.usp.br:tde-13082025-093122Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-08-14T17:50:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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O envelhecimento cutâneo é um processo multifatorial que afeta diferentes estruturas e camadas faciais, resultando em perda de volume, flacidez e alterações na elasticidade. Bioestimuladores de colágeno são amplamente utilizados na prática clínica com o objetivo de reverter ou amenizar essas alterações. Entre os recursos disponíveis, destacam-se os concentrados plaquetários autólogos, como a Fibrina Rica em Plaquetas injetável (i-PRF), devido à sua biocompatibilidade, custo reduzido e capacidade de promover regeneração tecidual por meio de fatores de crescimento. Paralelamente, peptídeos sinalizadores como o Matrixyl (palmitoyl pentapeptídeo-4) e o GEKG (tetrapeptídeo-21) têm sido utilizados por estimularem a síntese de colágeno e outros componentes da matriz extracelular. Contudo, há escassez de estudos avaliando o uso combinado dessas substâncias, especialmente em formulações injetáveis. Diante disso, este estudo teve como objetivo investigar in vitro os efeitos sinérgicos da i-PRF associada aos peptídeos Matrixyl ou GEKG sobre a viabilidade celular e expressão gênica de fibroblastos dérmicos humanos. O delineamento experimental contemplou seis grupos de tratamento: grupo controle (meio de cultura padrão), i-PRF isolada, Matrixyl isolado, GEKG isolado, associação de i-PRF com Matrixyl e associação de i-PRF com GEKG. A viabilidade celular foi avaliada por ensaios de MTT, cristal violeta e RealTime-Glo, enquanto a expressão dos genes COL1A1, FN1 e HAS1 foi quantificada por RT-qPCR. Os resultados demonstraram que os peptídeos isolados apresentaram tendência à redução da viabilidade celular, especialmente em tempos prolongados, enquanto a i-PRF, isoladamente ou em associação, promoveu aumento significativo da viabilidade e da atividade metabólica celular. Em relação à expressão gênica, os grupos que combinaram i-PRF com peptídeos bioativos apresentaram aumento significativo na expressão de genes relacionados à matriz extracelular, particularmente após 72 horas de tratamento. Destaca-se o grupo i-PRF + GEKG, que apresentou os melhores resultados em termos de expressão gênica, indicando um efeito sinérgico promissor. Esses achados sugerem que a i-PRF pode mitigar possíveis efeitos deletérios dos peptídeos isolados, ao mesmo tempo em que potencializa sua ação bioestimuladora, reforçando a hipótese de que essa combinação representa uma alternativa segura e eficaz para aplicação clínica na regeneração e rejuvenescimento cutâneo. |
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