Estudo comparativo da utilização de diferentes fixadores na preservação histológica e descrição morfológica das glândulas de veneno da pele da perereca Trachycephalus mesophaeus

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2022
Autor(a) principal: Silva, Adriano Bauer Costa da
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-15062022-110316/
Resumo: As coleções biológicas constituem uma das mais importantes ferramentas para obtenção de informações sobre a biodiversidade. Nas coleções zoológicas de vertebrados, um dos meios clássicos de preservação de espécimes é através de fixação em solução aquosa de formaldeído a 10% (ou formalina), seguida de preservação em etanol 70%. A formalina pode ser considerada como um bom fixador de tecidos biológicos, ainda que não chegue a níveis de preservação morfológica suficientemente refinada para a utilização da microscopia eletrônica, o que necessariamente requer o uso de fixadores mais precisos contendo glutaraldeído. Por outro lado, com a aplicação da biologia molecular, tornaram-se cada vez mais frequentes os estudos que necessitam da preservação do DNA de amostras, principalmente retiradas do músculo ou do fígado, visando o acesso à sistemática molecular. Essas amostras, porém, devem necessariamente ser fixadas em etanol, não podendo ter contato com fixadores aldeídicos. Para tanto, muitos pesquisadores zoólogos passaram a fixar os espécimes coletados em campo diretamente no etanol 70%, capaz de preservar o DNA das amostras. Essa prática se tornou especialmente comum durante expedições de campo para coleta de anfíbios, talvez devido à pouca sobrevida dos espécimes coletados e à grande permeabilidade e fragilidade cutâneas, que permitem que esses animais sejam rapida e facilmente fixados em etanol 70%. No entanto, essa prática fornece material inadequadamente fixado às coleções zoológicas, muitas vezes inviabilizando o seu aproveitamento para possíveis estudos morfológicos. Entre os anfíbios, a pele é diferenciada em cada espécie considerada, o que a torna um bom material para a avaliação das condições de preservação morfológica. Dessa forma, visando à conscientização dos curadores de coleções e dos pesquisadores responsáveis pela coleta de animais no campo, a proposta desse estudo é a avaliação comparativa da preservação morfológica em uma espécie de perereca da Mata Atlântica, Trachycephalus mesophaeus, submetida à preservação pelo uso de diferentes agentes fixadores. Em paralelo, utilizamos as peles preservadas em fixador contendo glutaraldeído para realizarmos um estudo morfológico detalhado da pele dessa perereca, principalmente no que se refere às glândulas de veneno e às glândulas mucosas.
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A formalina pode ser considerada como um bom fixador de tecidos biológicos, ainda que não chegue a níveis de preservação morfológica suficientemente refinada para a utilização da microscopia eletrônica, o que necessariamente requer o uso de fixadores mais precisos contendo glutaraldeído. Por outro lado, com a aplicação da biologia molecular, tornaram-se cada vez mais frequentes os estudos que necessitam da preservação do DNA de amostras, principalmente retiradas do músculo ou do fígado, visando o acesso à sistemática molecular. Essas amostras, porém, devem necessariamente ser fixadas em etanol, não podendo ter contato com fixadores aldeídicos. Para tanto, muitos pesquisadores zoólogos passaram a fixar os espécimes coletados em campo diretamente no etanol 70%, capaz de preservar o DNA das amostras. Essa prática se tornou especialmente comum durante expedições de campo para coleta de anfíbios, talvez devido à pouca sobrevida dos espécimes coletados e à grande permeabilidade e fragilidade cutâneas, que permitem que esses animais sejam rapida e facilmente fixados em etanol 70%. No entanto, essa prática fornece material inadequadamente fixado às coleções zoológicas, muitas vezes inviabilizando o seu aproveitamento para possíveis estudos morfológicos. Entre os anfíbios, a pele é diferenciada em cada espécie considerada, o que a torna um bom material para a avaliação das condições de preservação morfológica. Dessa forma, visando à conscientização dos curadores de coleções e dos pesquisadores responsáveis pela coleta de animais no campo, a proposta desse estudo é a avaliação comparativa da preservação morfológica em uma espécie de perereca da Mata Atlântica, Trachycephalus mesophaeus, submetida à preservação pelo uso de diferentes agentes fixadores. Em paralelo, utilizamos as peles preservadas em fixador contendo glutaraldeído para realizarmos um estudo morfológico detalhado da pele dessa perereca, principalmente no que se refere às glândulas de veneno e às glândulas mucosas.Biological collections are important tools for obtaining information about biodiversity. In vertebrate zoological collections, one of most classic methods of specimen preservation is through fixation using 10% aqueous formaldehyde solution (or formalin), followed by 70% ethanol preservation. Formalin can be considered a good fixative of biological tissues, although it does not reach sufficiently refined morphological preservation levels for electron microscopy, which necessarily requires the use of more accurate glutaraldehyde-containing fixatives. On the other hand, application of molecular biology studies requiring DNA preservation especially of muscle or liver samples aiming to access the molecular systematics, have become increasingly frequent. DNA samples, however, cannot have contact with aldehyde fixatives and necessarily must be preserved in ethanol. For this reason, aiming at the preservation of DNA, many zoologists are fixing field specimens directly in 70% ethanol. This practice has become especially common in field expeditions for amphibian collection, perhaps due to the poor survival of the collected specimens and the high skin permeability and fragility that allow these animals to be quickly and easily fixed in 70% ethanol. This practice, however, provides material badly fixed to zoological collections, often turning its use impossible for morphological purposes. Among amphibians, the skin is differentiated in each species considered, which makes it a good material for the evaluation of morphological preservation conditions. Thus, aiming at the awareness of the zoological collection curators and of field researchers, the main purpose of this study is the comparative evaluation of the morphological preservation in a common tree frog species of the Atlantic Rainforest, Trachycephalus mesophaeus, submitted to preservation using different fixative agents. In parallel, we used the skin preserved with glutaraldehyde-containing fixative to perform a detailed morphological study of the skin of this tree frog, especially regarding the poison and mucous glands.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPJared, Carlos Alberto Goncalves SilvaSilva, Adriano Bauer Costa da2022-04-05info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-15062022-110316/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2022-08-19T13:46:23Zoai:teses.usp.br:tde-15062022-110316Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212022-08-19T13:46:23Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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