Tratamento de sementes de milho com emulsões e nanoemulsões de quitosana e óleo essencial de laranja doce: efeitos sobre o potencial fisiológico e controle de fungos

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2025
Autor(a) principal: Zacharias, Marina Barros
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11136/tde-12052025-152008/
Resumo: O tratamento de sementes com nanoemulsões, utilizando materiais biodegradáveis provenientes de resíduos agroindustriais, vem sendo explorado como uma alternativa sustentável para o controle de doenças em plantas. O objetivo foi avaliar o potencial fisiológico e a sanidade de sementes de milho tratadas com nanoemulsões e emulsões convencionais de quitosana associada a óleo essencial de laranja doce. Foram desenvolvidas emulsões e nanoemulsões à base de quitosana contendo óleo essencial de laranja doce (OEL) para determinação tanto do efeito in vitro em fungos isolados de sementes de milho, quanto do efeito na qualidade de sementes de milho de vigor mais alto e de vigor mais baixo tratadas com as formulações em duas épocas experimentais (após tratamento e após seis meses armazenadas). A caracterização das emulsões e nanoemulsões foi realizada pelo tamanho de partícula, índice de polidispersidade e potencial zeta, além da distribuição de tamanho e concentração de partículas e estabilidade física a longo prazo das nanoemulsões. Para o experimento in vitro, as emulsões convencionais (5%, 10%, 20% m/v) foram incorporadas ao meio de cultura batata-dextrose-agar em placas de Petri e discos de micélio dos fungos Fusarium verticillioides, Acremonium sp., Penicillium sp. e Aspergillus sp. foram dispostos no centro de cada placa, sendo o crescimento micelial avaliado ao longo de, respectivamente, 9, 10, 16 e 11 dias e o número de esporos no último dia de avalição mediante contagem em hemacitômetro. Para o tratamento das sementes de milho, foram utilizadas emulsões convencionais e nanoemulsões (10% e 20% m/v). A qualidade das sementes tratadas foi averiguada pela viabilidade (teste de germinação), vigor (teste de frio em rolo de papel com terra, envelhecimento acelerado com solução saturada de sal, análise computadorizada de plântulas, emergência de plântulas em areia, índice de velocidade de emergência e emergência de plântulas em campo), teor de água e sanidade (blotter test). O tamanho de partículas das emulsões a 10% (604,9 nm) e 20% (481,3 nm) foi aproximadamente duas vezes maior em relação ao tamanho das nanoemulsões a 10% (330,0 nm) e 20% (289,9 nm), respectivamente. Os índices de polidispersidade foram aceitáveis, variando de 0,175 a 0,338. As formulações se mantiveram estáveis por quatro meses, com potenciais zeta próximos de +30mV nas nanoemulsões 10% e 20%. No experimento in vitro, o aumento da concentração de OEL na solução de quitosana levou a uma redução progressiva no diâmetro das colônias de todos os fungos. O efeito fungistático máximo foi observado com 20% de OEL, com inibições do crescimento micelial de Fusarium verticillioides (76,6%), Acremonium sp. (68,0%), Penicillium sp. (68,7%) e Aspergillus sp. (80,5%). A esporulação foi praticamente ausente para Penicillium sp. e Acremonium sp., independentemente da concentração. Para Fusarium verticillioides e Aspergillus sp., a redução no número de esporos foi dependente da dose. O tratamento das sementes de vigor mais alto não interferiu na germinação e no vigor em todos os testes conduzidos nas duas épocas experimentais, adicionalmente a emulsão convencional 20% apresentou maior comprimento de parte aérea e comprimento total de plântulas e maior índice de vigor e de crescimento. O tratamento das sementes de vigor mais baixo avaliado na primeira época não interferiu na germinação e no vigor, no entanto a emulsão 20% reduziu o índice de velocidade de emergência e ambas as emulsões e nanoemulsões estimularam o comprimento de parte aérea das plântulas, não diferindo do tratamento fungicida. Na segunda época, para sementes de vigor mais baixo, as nanoemulsões e emulsão 20% reduziram a germinação, embora a emulsão 10% não tenha interferido. A maioria dos parâmetros de vigor não foi afetada pelos tratamentos avaliados após seis meses, à exceção da emulsão 20% que proporcionou redução do vigor das sementes no teste de frio, emergência em areia e comprimento de raiz. O comprimento de raiz na segunda época também foi prejudicado pelas nanoemulsões, mas não foi afetado pela emulsão 10%, que ademais estimulou o comprimento de parte aérea das plântulas. Para a sanidade de sementes de vigor mais alto na primeira época, as emulsões (10% e 20%) e nanoemulsões (10% e 20%), respectivamente, reduziram Fusarium verticillioides em 84%, 71%, 89% e 79%, respectivamente, enquanto reduziram Acremonium sp. em 26%, 43%, 52% e 67%. Na segunda época, as emulsões (10% e 20%) e nanoemulsões (10% e 20%) reduziram Fusarium verticillioides em 65%, 78%, 82% e 81%, respectivamente; no entanto, nenhum controle foi observado para Acremonium sp. A baixa incidência de Aspergillus sp. provavelmente mascarou os efeitos dos tratamentos; além disso, os tratamentos contendo óleo essencial de laranja doce não apresentaram controle sobre Penicillium sp. em ambas as épocas experimentais para sementes de vigor mais alto. Para a sanidade de sementes de vigor mais baixo na primeira época, as emulsões (10% e 20%) e nanoemulsões (10% e 20%), respectivamente, reduziram Penicillium sp. em 96%, 85%, 88% e 88%. Também na primeira época, a concentração 10% (emulsão e nanoemulsão) reduziu Fusarium verticillioides em 75%, enquanto a concentração 20% resultou em redução de 86%. Na segunda época, as emulsões (10% e 20%) e nanoemulsões (10% e 20%) reduziram Penicillium sp. em 83%, 46%, 10% e 30%, respectivamente; no entanto, não houve redução em Fusarium verticillioides, Aspergillus sp. e Acremonium sp., possivelmente devido à baixa ocorrência desses fungos após seis meses de armazenamento. Os resultados obtidos neste estudo indicam o grande potencial das emulsões e nanoemulsões à base de quitosana contendo óleo essencial de laranja em direção a uma agricultura mais sustentável.
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Foram desenvolvidas emulsões e nanoemulsões à base de quitosana contendo óleo essencial de laranja doce (OEL) para determinação tanto do efeito in vitro em fungos isolados de sementes de milho, quanto do efeito na qualidade de sementes de milho de vigor mais alto e de vigor mais baixo tratadas com as formulações em duas épocas experimentais (após tratamento e após seis meses armazenadas). A caracterização das emulsões e nanoemulsões foi realizada pelo tamanho de partícula, índice de polidispersidade e potencial zeta, além da distribuição de tamanho e concentração de partículas e estabilidade física a longo prazo das nanoemulsões. Para o experimento in vitro, as emulsões convencionais (5%, 10%, 20% m/v) foram incorporadas ao meio de cultura batata-dextrose-agar em placas de Petri e discos de micélio dos fungos Fusarium verticillioides, Acremonium sp., Penicillium sp. e Aspergillus sp. foram dispostos no centro de cada placa, sendo o crescimento micelial avaliado ao longo de, respectivamente, 9, 10, 16 e 11 dias e o número de esporos no último dia de avalição mediante contagem em hemacitômetro. Para o tratamento das sementes de milho, foram utilizadas emulsões convencionais e nanoemulsões (10% e 20% m/v). A qualidade das sementes tratadas foi averiguada pela viabilidade (teste de germinação), vigor (teste de frio em rolo de papel com terra, envelhecimento acelerado com solução saturada de sal, análise computadorizada de plântulas, emergência de plântulas em areia, índice de velocidade de emergência e emergência de plântulas em campo), teor de água e sanidade (blotter test). O tamanho de partículas das emulsões a 10% (604,9 nm) e 20% (481,3 nm) foi aproximadamente duas vezes maior em relação ao tamanho das nanoemulsões a 10% (330,0 nm) e 20% (289,9 nm), respectivamente. Os índices de polidispersidade foram aceitáveis, variando de 0,175 a 0,338. As formulações se mantiveram estáveis por quatro meses, com potenciais zeta próximos de +30mV nas nanoemulsões 10% e 20%. No experimento in vitro, o aumento da concentração de OEL na solução de quitosana levou a uma redução progressiva no diâmetro das colônias de todos os fungos. O efeito fungistático máximo foi observado com 20% de OEL, com inibições do crescimento micelial de Fusarium verticillioides (76,6%), Acremonium sp. (68,0%), Penicillium sp. (68,7%) e Aspergillus sp. (80,5%). A esporulação foi praticamente ausente para Penicillium sp. e Acremonium sp., independentemente da concentração. Para Fusarium verticillioides e Aspergillus sp., a redução no número de esporos foi dependente da dose. O tratamento das sementes de vigor mais alto não interferiu na germinação e no vigor em todos os testes conduzidos nas duas épocas experimentais, adicionalmente a emulsão convencional 20% apresentou maior comprimento de parte aérea e comprimento total de plântulas e maior índice de vigor e de crescimento. O tratamento das sementes de vigor mais baixo avaliado na primeira época não interferiu na germinação e no vigor, no entanto a emulsão 20% reduziu o índice de velocidade de emergência e ambas as emulsões e nanoemulsões estimularam o comprimento de parte aérea das plântulas, não diferindo do tratamento fungicida. Na segunda época, para sementes de vigor mais baixo, as nanoemulsões e emulsão 20% reduziram a germinação, embora a emulsão 10% não tenha interferido. A maioria dos parâmetros de vigor não foi afetada pelos tratamentos avaliados após seis meses, à exceção da emulsão 20% que proporcionou redução do vigor das sementes no teste de frio, emergência em areia e comprimento de raiz. O comprimento de raiz na segunda época também foi prejudicado pelas nanoemulsões, mas não foi afetado pela emulsão 10%, que ademais estimulou o comprimento de parte aérea das plântulas. Para a sanidade de sementes de vigor mais alto na primeira época, as emulsões (10% e 20%) e nanoemulsões (10% e 20%), respectivamente, reduziram Fusarium verticillioides em 84%, 71%, 89% e 79%, respectivamente, enquanto reduziram Acremonium sp. em 26%, 43%, 52% e 67%. Na segunda época, as emulsões (10% e 20%) e nanoemulsões (10% e 20%) reduziram Fusarium verticillioides em 65%, 78%, 82% e 81%, respectivamente; no entanto, nenhum controle foi observado para Acremonium sp. A baixa incidência de Aspergillus sp. provavelmente mascarou os efeitos dos tratamentos; além disso, os tratamentos contendo óleo essencial de laranja doce não apresentaram controle sobre Penicillium sp. em ambas as épocas experimentais para sementes de vigor mais alto. Para a sanidade de sementes de vigor mais baixo na primeira época, as emulsões (10% e 20%) e nanoemulsões (10% e 20%), respectivamente, reduziram Penicillium sp. em 96%, 85%, 88% e 88%. Também na primeira época, a concentração 10% (emulsão e nanoemulsão) reduziu Fusarium verticillioides em 75%, enquanto a concentração 20% resultou em redução de 86%. Na segunda época, as emulsões (10% e 20%) e nanoemulsões (10% e 20%) reduziram Penicillium sp. em 83%, 46%, 10% e 30%, respectivamente; no entanto, não houve redução em Fusarium verticillioides, Aspergillus sp. e Acremonium sp., possivelmente devido à baixa ocorrência desses fungos após seis meses de armazenamento. Os resultados obtidos neste estudo indicam o grande potencial das emulsões e nanoemulsões à base de quitosana contendo óleo essencial de laranja em direção a uma agricultura mais sustentável.The treatment of seeds with nanoemulsions using biodegradable materials derived from agro-industrial waste is being explored as a sustainable alternative for controlling plant diseases. The aim was to evaluate the physiological potential and health of corn seeds treated with nanoemulsions and conventional emulsions of chitosan combined with sweet orange essential oil. Emulsions and nanoemulsions based on chitosan containing sweet orange essential oil (OEO) were developed to determine both the in vitro effect on fungi isolated from corn seeds and the effect on the quality of higher vigor and lower vigor corn seeds treated with the formulations at two experimental times (immediately after treatment and after six months of storage). The emulsions and nanoemulsions were characterized by particle size, polydispersity index, zeta potential, as well as particle size distribution, concentration, and long-term physical stability of the nanoemulsions. For the in vitro experiment, conventional emulsions (5%, 10%, 20% w/v) were incorporated into potato dextrose agar culture medium in Petri dishes, and mycelial discs of the fungi Fusarium verticillioides, Acremonium sp., Penicillium sp., and Aspergillus sp. were placed at the center of each plate, with mycelial growth evaluated over 9, 10, 16, and 11 days, respectively, and the number of spores counted on the last evaluation day using a hemocytometer. For treating corn seeds, conventional emulsions and nanoemulsions (10% and 20% w/v) were used. The quality of treated seeds was assessed for viability (germination test), vigor (cold test on paper rolls with soil, accelerated aging with saturated salt solution, computerized seedling analysis, seedling emergence in sand, speed of emergence index, and field seedling emergence), moisture content, and health (blotter test). The particle sizes of the 10% (604.9 nm) and 20% (481.3 nm) emulsions were approximately twice as large as those of the nanoemulsions, which were 10% (330.0 nm) and 20% (289.9 nm), respectively. The polydispersity indices were acceptable, ranging from 0.175 to 0.338. The formulations remained stable for four months, with zeta potentials close to +30 mV for the 10% and 20% nanoemulsions. In the in vitro experiment, increasing OEO concentration in the chitosan solution led to a progressive reduction in colony diameter for all fungi. The maximum fungistatic effect was observed with 20% OEO, resulting in mycelial growth inhibitions of Fusarium verticillioides (76.6%), Acremonium sp. (68.0%), Penicillium sp. (68.7%), and Aspergillus sp. (80.5%). Sporulation was nearly absent for Penicillium sp. and Acremonium sp., regardless of concentration. For Fusarium verticillioides and Aspergillus sp., the reduction in spore numbers was dose-dependent. Treatment of higher vigor seeds did not affect germination or vigor across all tests conducted at both experimental times; additionally, the 20% conventional emulsion showed greater shoot length and total seedling length along with higher vigor and growth indices. In contrast, treatment of lower vigor seeds evaluated during the first period did not interfere with germination or vigor; however, the 20% emulsion reduced the speed of emergence index while both emulsions and nanoemulsions stimulated shoot length without differing from fungicide treatment. In the second period for lower vigor seeds, nanoemulsions and the 20% emulsion reduced germination, although the 10% emulsion did not have an effect. Most vigor parameters were unaffected by treatments evaluated after six months except for the 20% emulsion which resulted in a reduction of seed vigor in the cold test, sand emergence, and root length measurements. Root length in the second period was also negatively impacted by nanoemulsions but was not affected by the 10% emulsion, which additionally stimulated shoot length in seedlings. For higher vigor seed health during the first period, emulsions (10% and 20%) and nanoemulsions (10% and 20%) reduced Fusarium verticillioides by 84%, 71%, 89%, and 79%, respectively, while reducing Acremonium sp. by 26%, 43%, 52%, and 67%. In the 12 second period, emulsions (10% and 20%) and nanoemulsions (10% and 20%) reduced Fusarium verticillioides by 65%, 78%, 82%, and 81%, respectively; however, no control was observed for Acremonium sp. The low incidence of Aspergillus sp. likely masked treatment effects; moreover, treatments containing sweet orange essential oil showed no control over Penicillium sp. during both experimental periods for high-vigor seeds. For lower vigor seed health in the first period, emulsions (10% and 20%) and nanoemulsions (10% and 20%) reduced Penicillium sp. by 96%, 85%, 88%, and 88%. In this same period, the concentration of 10% (both emulsion and nanoemulsion) reduced Fusarium verticillioides by 75%, while the 20% concentration resulted in an 86% reduction. In the second period, emulsions (10% and 20%) and nanoemulsions (10% and 20%) reduced Penicillium sp. by 83%, 46%, 10%, and 30%, respectively; however, there was no reduction in Fusarium verticillioides, Aspergillus sp. and Acremonium sp., likely due to their low occurrence after six months of storage. The results obtained in this study indicate significant potential for chitosan-based emulsions and nanoemulsions containing sweet orange essential oil towards more sustainable agriculture practices.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPCicero, Silvio MoureSilva, Mariana Altenhofen daZacharias, Marina Barros2025-02-14info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11136/tde-12052025-152008/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-05-14T18:34:02Zoai:teses.usp.br:tde-12052025-152008Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-05-14T18:34:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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description O tratamento de sementes com nanoemulsões, utilizando materiais biodegradáveis provenientes de resíduos agroindustriais, vem sendo explorado como uma alternativa sustentável para o controle de doenças em plantas. O objetivo foi avaliar o potencial fisiológico e a sanidade de sementes de milho tratadas com nanoemulsões e emulsões convencionais de quitosana associada a óleo essencial de laranja doce. Foram desenvolvidas emulsões e nanoemulsões à base de quitosana contendo óleo essencial de laranja doce (OEL) para determinação tanto do efeito in vitro em fungos isolados de sementes de milho, quanto do efeito na qualidade de sementes de milho de vigor mais alto e de vigor mais baixo tratadas com as formulações em duas épocas experimentais (após tratamento e após seis meses armazenadas). A caracterização das emulsões e nanoemulsões foi realizada pelo tamanho de partícula, índice de polidispersidade e potencial zeta, além da distribuição de tamanho e concentração de partículas e estabilidade física a longo prazo das nanoemulsões. Para o experimento in vitro, as emulsões convencionais (5%, 10%, 20% m/v) foram incorporadas ao meio de cultura batata-dextrose-agar em placas de Petri e discos de micélio dos fungos Fusarium verticillioides, Acremonium sp., Penicillium sp. e Aspergillus sp. foram dispostos no centro de cada placa, sendo o crescimento micelial avaliado ao longo de, respectivamente, 9, 10, 16 e 11 dias e o número de esporos no último dia de avalição mediante contagem em hemacitômetro. Para o tratamento das sementes de milho, foram utilizadas emulsões convencionais e nanoemulsões (10% e 20% m/v). A qualidade das sementes tratadas foi averiguada pela viabilidade (teste de germinação), vigor (teste de frio em rolo de papel com terra, envelhecimento acelerado com solução saturada de sal, análise computadorizada de plântulas, emergência de plântulas em areia, índice de velocidade de emergência e emergência de plântulas em campo), teor de água e sanidade (blotter test). O tamanho de partículas das emulsões a 10% (604,9 nm) e 20% (481,3 nm) foi aproximadamente duas vezes maior em relação ao tamanho das nanoemulsões a 10% (330,0 nm) e 20% (289,9 nm), respectivamente. Os índices de polidispersidade foram aceitáveis, variando de 0,175 a 0,338. As formulações se mantiveram estáveis por quatro meses, com potenciais zeta próximos de +30mV nas nanoemulsões 10% e 20%. No experimento in vitro, o aumento da concentração de OEL na solução de quitosana levou a uma redução progressiva no diâmetro das colônias de todos os fungos. O efeito fungistático máximo foi observado com 20% de OEL, com inibições do crescimento micelial de Fusarium verticillioides (76,6%), Acremonium sp. (68,0%), Penicillium sp. (68,7%) e Aspergillus sp. (80,5%). A esporulação foi praticamente ausente para Penicillium sp. e Acremonium sp., independentemente da concentração. Para Fusarium verticillioides e Aspergillus sp., a redução no número de esporos foi dependente da dose. O tratamento das sementes de vigor mais alto não interferiu na germinação e no vigor em todos os testes conduzidos nas duas épocas experimentais, adicionalmente a emulsão convencional 20% apresentou maior comprimento de parte aérea e comprimento total de plântulas e maior índice de vigor e de crescimento. 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