Potencial de antígenos de superfície da larva infectante de Strongyloides venezuelensis na detecção da estrongiloidíase humana
| Ano de defesa: | 2025 |
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| Tipo de documento: | Dissertação |
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Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-26012026-155050/ |
Resumo: | A estrongiloidíase é uma infecção intestinal causada pelo nematódeo Strongyloides stercoralis, com maior ocorrência em regiões tropicais e subtropicais. Na maioria dos casos se apresenta como uma infecção crônica e assintomática, no entanto pode evoluir para quadros graves como hiperinfecção e disseminação, principalmente em indivíduos imunocomprometidos, podendo levar a óbito. Devido à baixa sensibilidade das técnicas parasitológicas, ocasionada pela liberação intermitente de larvas nas fezes, as técnicas sorológicas vêm sendo utilizadas de forma complementar no diagnóstico da infecção. O presente estudo teve como objetivo avaliar o extrato antigênico da larva infectante (iL3) de Strongyloides venezuelensis, obtido com a utilização do detergente catiônico (CTAB) - iL3 CTAB, aplicado ao imunodiagnóstico da estrongiloidiase humana, assim como identificar as proteínas presentes nas frações imunodominantes. Para os experimentos foi utilizado um painel de soros positivos para S. stercoralis (indivíduos imunocompetentes e imunocomprometidos), negativos, e positivos para outras parasitoses, baseado no diagnóstico parasitológico. As amostras foram submetidas as técnicas de ELISA e Western-blotting (WB), e as frações proteicas imunodominantes foram submetidas a espectrometria de massas. O cut-off escolhido no ELISA apresentou sensibilidade de 95% e especificidade de 97,8%, e 28,13% de positividade nas amostras de indivíduos imunocomprometidos. Foram identificadas 15 frações proteicas imunodominantes, sendo as de maiores reconhecimentos as que se encontraram na região de 25-45 kDa, com valores de sensibilidade e especificidade variando de 83-100% e 63,7-98,9%, respectivamente. Considerando as amostras dos indivíduos imunocomprometidos, 69-100% reconheceram a região de 25-45 kDa. Com a análise da região de interesse foi identificada 376 proteínas, sendo as mais abundantes: de domínio CAP, zinco metaloproteinases, 14-3-3 zeta, actinas e galectinas. O conjunto de resultados demonstrou que o extrato heterólogo de iL3 CTAB, apresentou bons resultados quando aplicado no imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana, com destaque para a maior sensibilidade na técnica de WB especialmente em indivíduos imunocomprometidos. Além disso, o perfil proteico apresentado pode auxiliar na ampliação do conhecimento da composição proteica dentro do gênero Strongyloides, abrindo novas perspectivas para pesquisa futuras e a possibilidade de aplicação no imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana. |
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Potencial de antígenos de superfície da larva infectante de Strongyloides venezuelensis na detecção da estrongiloidíase humanaPotential of Strongyloides venezuelensis Infective Larva Surface Antigens in the Detection of Human StrongyloidiasisCTABCTABEnsaio imunoenzimáticoEnzyme-linked immunosorbent assayEstrongiloidíaseImmunodiagnosisImunodiagnósticoProteômicaProteomicsStrongyloides venezuelensisStrongyloides venezuelensisStrongyloidiasisWestern blottingWestern-blottingA estrongiloidíase é uma infecção intestinal causada pelo nematódeo Strongyloides stercoralis, com maior ocorrência em regiões tropicais e subtropicais. Na maioria dos casos se apresenta como uma infecção crônica e assintomática, no entanto pode evoluir para quadros graves como hiperinfecção e disseminação, principalmente em indivíduos imunocomprometidos, podendo levar a óbito. Devido à baixa sensibilidade das técnicas parasitológicas, ocasionada pela liberação intermitente de larvas nas fezes, as técnicas sorológicas vêm sendo utilizadas de forma complementar no diagnóstico da infecção. O presente estudo teve como objetivo avaliar o extrato antigênico da larva infectante (iL3) de Strongyloides venezuelensis, obtido com a utilização do detergente catiônico (CTAB) - iL3 CTAB, aplicado ao imunodiagnóstico da estrongiloidiase humana, assim como identificar as proteínas presentes nas frações imunodominantes. Para os experimentos foi utilizado um painel de soros positivos para S. stercoralis (indivíduos imunocompetentes e imunocomprometidos), negativos, e positivos para outras parasitoses, baseado no diagnóstico parasitológico. As amostras foram submetidas as técnicas de ELISA e Western-blotting (WB), e as frações proteicas imunodominantes foram submetidas a espectrometria de massas. O cut-off escolhido no ELISA apresentou sensibilidade de 95% e especificidade de 97,8%, e 28,13% de positividade nas amostras de indivíduos imunocomprometidos. Foram identificadas 15 frações proteicas imunodominantes, sendo as de maiores reconhecimentos as que se encontraram na região de 25-45 kDa, com valores de sensibilidade e especificidade variando de 83-100% e 63,7-98,9%, respectivamente. Considerando as amostras dos indivíduos imunocomprometidos, 69-100% reconheceram a região de 25-45 kDa. Com a análise da região de interesse foi identificada 376 proteínas, sendo as mais abundantes: de domínio CAP, zinco metaloproteinases, 14-3-3 zeta, actinas e galectinas. O conjunto de resultados demonstrou que o extrato heterólogo de iL3 CTAB, apresentou bons resultados quando aplicado no imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana, com destaque para a maior sensibilidade na técnica de WB especialmente em indivíduos imunocomprometidos. Além disso, o perfil proteico apresentado pode auxiliar na ampliação do conhecimento da composição proteica dentro do gênero Strongyloides, abrindo novas perspectivas para pesquisa futuras e a possibilidade de aplicação no imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana.Strongyloidiasis is an intestinal infection caused by the nematode Strongyloides stercoralis, with higher incidence in tropical and subtropical regions. In most cases, it presents as a chronic and asymptomatic infection; however, it can progress to severe conditions such as hyperinfection and dissemination, mainly in immunocompromised individuals, potentially leading to death. Due to the low sensitivity of parasitological techniques, caused by the intermittent shedding of larvae in feces, serological techniques have been used as a complementary tool in the diagnosis of the infection. The present study aimed to evaluate the antigenic extract of Strongyloides venezuelensis infective larvae (iL3), obtained using the cationic detergent (CTAB) - iL3 CTAB, applied to the immunodiagnosis of human strongyloidiasis, as well as to identify the proteins present in the immunodominant fractions. For the experiments, a panel of sera positive for S. stercoralis (immunocompetent and immunocompromised individuals), negative, and positive for other parasitoses was used, based on parasitological diagnosis. The samples were submitted to ELISA and Western-blotting (WB) techniques, and the immunodominant protein fractions were submitted to mass spectrometry. The chosen cut-off in ELISA showed a sensitivity of 95% and a specificity of 97.8%, and 28.13% positivity in samples from immunocompromised individuals. Fifteen immunodominant protein fractions were identified, with the most highly recognized ones being in the 25-45 kDa region, with sensitivity and specificity values ranging from 83-100% and 63.7-98.9%, respectively. Considering samples from immunocompromised individuals, 69-100% recognized the 25-45 kDa region. Analysis of the region of interest identified 376 proteins, with the most abundant being: CAP domain-containing proteins, zinc metalloproteinases, 14-3-3 zeta, actins, and galectins. The set of results demonstrated that the heterologous iL3 CTAB extract showed good results when applied in the immunodiagnosis of human strongyloidiasis, with emphasis on the higher sensitivity in the WB technique, especially in immunocompromised individuals. Furthermore, the protein profile presented can assist in expanding the knowledge of protein composition within the Strongyloides genus, opening new perspectives for future research and the possibility of application in the immunodiagnosis of human strongyloidiasis.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPPaula, Fabiana Martins deGomes, Bruna Barroso2025-08-18info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-26012026-155050/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2026-01-27T14:38:02Zoai:teses.usp.br:tde-26012026-155050Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212026-01-27T14:38:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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A estrongiloidíase é uma infecção intestinal causada pelo nematódeo Strongyloides stercoralis, com maior ocorrência em regiões tropicais e subtropicais. Na maioria dos casos se apresenta como uma infecção crônica e assintomática, no entanto pode evoluir para quadros graves como hiperinfecção e disseminação, principalmente em indivíduos imunocomprometidos, podendo levar a óbito. Devido à baixa sensibilidade das técnicas parasitológicas, ocasionada pela liberação intermitente de larvas nas fezes, as técnicas sorológicas vêm sendo utilizadas de forma complementar no diagnóstico da infecção. O presente estudo teve como objetivo avaliar o extrato antigênico da larva infectante (iL3) de Strongyloides venezuelensis, obtido com a utilização do detergente catiônico (CTAB) - iL3 CTAB, aplicado ao imunodiagnóstico da estrongiloidiase humana, assim como identificar as proteínas presentes nas frações imunodominantes. Para os experimentos foi utilizado um painel de soros positivos para S. stercoralis (indivíduos imunocompetentes e imunocomprometidos), negativos, e positivos para outras parasitoses, baseado no diagnóstico parasitológico. As amostras foram submetidas as técnicas de ELISA e Western-blotting (WB), e as frações proteicas imunodominantes foram submetidas a espectrometria de massas. O cut-off escolhido no ELISA apresentou sensibilidade de 95% e especificidade de 97,8%, e 28,13% de positividade nas amostras de indivíduos imunocomprometidos. Foram identificadas 15 frações proteicas imunodominantes, sendo as de maiores reconhecimentos as que se encontraram na região de 25-45 kDa, com valores de sensibilidade e especificidade variando de 83-100% e 63,7-98,9%, respectivamente. Considerando as amostras dos indivíduos imunocomprometidos, 69-100% reconheceram a região de 25-45 kDa. Com a análise da região de interesse foi identificada 376 proteínas, sendo as mais abundantes: de domínio CAP, zinco metaloproteinases, 14-3-3 zeta, actinas e galectinas. O conjunto de resultados demonstrou que o extrato heterólogo de iL3 CTAB, apresentou bons resultados quando aplicado no imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana, com destaque para a maior sensibilidade na técnica de WB especialmente em indivíduos imunocomprometidos. Além disso, o perfil proteico apresentado pode auxiliar na ampliação do conhecimento da composição proteica dentro do gênero Strongyloides, abrindo novas perspectivas para pesquisa futuras e a possibilidade de aplicação no imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana. |
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