Efeito da parede celular de levedura insolúvel e solúvel sobre a digestibilidade, microbiota intestinal, produtos de fermentação e parâmetros imunológicos em cães saudáveis
| Ano de defesa: | 2025 |
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| Instituição de defesa: |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10136/tde-23072025-094233/ |
Resumo: | A parede celular (PCL) de Saccharomyces cerevisiae tem efeito prebiótico que pode contribuir para a microbiota intestinal e saúde dos cães. No entanto, os estudos sobre preparações de PCL concentram-se em mananooligossacarideos insolúveis (MOS), mas faltam estudos dose-resposta de PCL analisando MOS solúvel. Este estudo avaliou os efeitos dose-resposta de dois extratos de PCL, um convencional e insolúvel (PCL) e outro com maior concentração de MOS solúvel (PCLs) sobre a coeficiente de digestibilidade aparente (CDA), produtos de fermentação, microbiota fecal e imunidade. Foi formulada uma dieta controle e desdobrada em 7 tratamentos: CON (controle); PCL (0,2, 0,4 e 0,8%); PCLs (0,2, 0,4 e 0,8%). Foram utilizados 56 cães, com oito repetições por tratamento e dois blocos. Cada bloco teve duração de 45 dias: 15 dias de washout (consumindo dieta CON), no 0º dia coleta de amostra basal para microbiota fecal, citocinas e fagocitose (T0); seguidos de 10 dias de adaptação à dieta experimental, que antecederam o período de coleta da digestibilidade e características fecais. No final de cada bloco (T30), as fezes foram coletadas para determinação de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) e ácidos graxos de cadeia ramificada (AGCC), lactato, amônia, aminas biogênicas, microbiota (gene 16S rRNA - Illumina MiSeq), sangue para análises de citocinas (Milliplex) e fagocitose. Com exceção da microbiota, os dados foram testados quanto à normalidade (teste de Shapiro-Wilk) e à homogeneidade (teste de Levene). Quando foram encontradas diferenças, foram utilizados contrastes polinomiais e ortogonais. Apenas para os dados de imunidade, o T0 foi utilizado como covariável. A análise da microbiota após ANOVA foi submetida ao teste de Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn (P<0,05). Observou-se efeito para o CDA do PB e EE, com maior digestibilidade para os PCLs 0,2 e 0,4%. Houve aumento linear do lactato para PCLs. Na análise de AGCC, o tratamento com 0,8% de PCL mostrou maior concentração de acetato, propionato e AGCC total, quando comparado com 0,8% de PCLs. A família Coriobacteriaceae e o gênero Collinsella reduziram após 30 dias do consumo de 0,8% de PCL e 0,8% de PCLs, e a Collinsella intestinalis também reduziu no T30 para 0,4% e 0,8% de PCL e 0,8% de PCLs, e a sua redução pode estar relacionada com alterações na barreira intestinal. A abundância dos gêneros Ruminococcus e Faecalibacterium aumentaram para PCLs 0,2% e PCL 0,2%, respectivamente, após 30 dias. Estes gêneros são conhecidos por produzirem AGCC e manterem a saúde intestinal. Na IL-2 foi observado efeito quadrático para PCL e linear para PCLs ambos com redução. Para a IL-6 houve diminuição com a inclusão de PCL e PCLs. Na fagocitose dos neutrófilos houve aumento linear para PCL, quadrático para PCLs. Os monócitos apresentaram aumento no contraste linear para PCL e PCLs. As preparações de PCL e PCLs interferiram na microbiota de acordo com a dose, e induziram modulações tanto da microbiota, quanto da imunidade. |
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Efeito da parede celular de levedura insolúvel e solúvel sobre a digestibilidade, microbiota intestinal, produtos de fermentação e parâmetros imunológicos em cães saudáveisEffect of insoluble and soluble yeast cell wall on digestibility, intestinal microbiota, fermentation products, and immunological parameters in healthy dogsÁcidos graxosFatty acidsGastrointestinal tractImmunityImunidadePrebióticoPrebioticsTrato gastrointestinalA parede celular (PCL) de Saccharomyces cerevisiae tem efeito prebiótico que pode contribuir para a microbiota intestinal e saúde dos cães. No entanto, os estudos sobre preparações de PCL concentram-se em mananooligossacarideos insolúveis (MOS), mas faltam estudos dose-resposta de PCL analisando MOS solúvel. Este estudo avaliou os efeitos dose-resposta de dois extratos de PCL, um convencional e insolúvel (PCL) e outro com maior concentração de MOS solúvel (PCLs) sobre a coeficiente de digestibilidade aparente (CDA), produtos de fermentação, microbiota fecal e imunidade. Foi formulada uma dieta controle e desdobrada em 7 tratamentos: CON (controle); PCL (0,2, 0,4 e 0,8%); PCLs (0,2, 0,4 e 0,8%). Foram utilizados 56 cães, com oito repetições por tratamento e dois blocos. Cada bloco teve duração de 45 dias: 15 dias de washout (consumindo dieta CON), no 0º dia coleta de amostra basal para microbiota fecal, citocinas e fagocitose (T0); seguidos de 10 dias de adaptação à dieta experimental, que antecederam o período de coleta da digestibilidade e características fecais. No final de cada bloco (T30), as fezes foram coletadas para determinação de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) e ácidos graxos de cadeia ramificada (AGCC), lactato, amônia, aminas biogênicas, microbiota (gene 16S rRNA - Illumina MiSeq), sangue para análises de citocinas (Milliplex) e fagocitose. Com exceção da microbiota, os dados foram testados quanto à normalidade (teste de Shapiro-Wilk) e à homogeneidade (teste de Levene). Quando foram encontradas diferenças, foram utilizados contrastes polinomiais e ortogonais. Apenas para os dados de imunidade, o T0 foi utilizado como covariável. A análise da microbiota após ANOVA foi submetida ao teste de Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn (P<0,05). Observou-se efeito para o CDA do PB e EE, com maior digestibilidade para os PCLs 0,2 e 0,4%. Houve aumento linear do lactato para PCLs. Na análise de AGCC, o tratamento com 0,8% de PCL mostrou maior concentração de acetato, propionato e AGCC total, quando comparado com 0,8% de PCLs. A família Coriobacteriaceae e o gênero Collinsella reduziram após 30 dias do consumo de 0,8% de PCL e 0,8% de PCLs, e a Collinsella intestinalis também reduziu no T30 para 0,4% e 0,8% de PCL e 0,8% de PCLs, e a sua redução pode estar relacionada com alterações na barreira intestinal. A abundância dos gêneros Ruminococcus e Faecalibacterium aumentaram para PCLs 0,2% e PCL 0,2%, respectivamente, após 30 dias. Estes gêneros são conhecidos por produzirem AGCC e manterem a saúde intestinal. Na IL-2 foi observado efeito quadrático para PCL e linear para PCLs ambos com redução. Para a IL-6 houve diminuição com a inclusão de PCL e PCLs. Na fagocitose dos neutrófilos houve aumento linear para PCL, quadrático para PCLs. Os monócitos apresentaram aumento no contraste linear para PCL e PCLs. As preparações de PCL e PCLs interferiram na microbiota de acordo com a dose, e induziram modulações tanto da microbiota, quanto da imunidade.The cell wall (YCW) of Saccharomyces cerevisiae has a prebiotic effect that can contribute to the intestinal microbiota and health of dogs. However, studies on YCW preparations focus on insoluble mannan oligosaccharides (MOS), but dose-response studies of YCW analyzing soluble MOS are lacking. This study evaluated the dose- response effects of two YCW extracts, one conventional and insoluble (YCW) and the other with a higher concentration of soluble MOS (YCWs) on the apparent digestibility coefficient (ADC), fermentation products, fecal microbiota, and immunity. A control diet was formulated and divided into 7 treatments: CON (control); YCW (0.2, 0.4, and 0.8%); YCWs (0.2, 0.4, and 0.8%). Fifty-six dogs were used, with eight replicates per treatment and two blocks. Each block lasted 45 days: 15 days of washout (consuming CON diet), on day 0, baseline sample collection for fecal microbiota, cytokines, and phagocytosis (T0); followed by 10 days of adaptation to the experimental diet, which preceded the period of collection of digestibility and fecal characteristics. At the end of each block (T30), feces were collected to determine short-chain fatty acids (SCFA) and branched-chain fatty acids (BCFA), lactate, ammonia, biogenic amines, microbiota (16S rRNA gene - Illumina MiSeq), blood for cytokine analysis (Milliplex), and phagocytosis. With the exception of the microbiota, the data were tested for normality (Shapiro-Wilk test) and homogeneity (Levene test). When differences were found, polynomial and orthogonal contrasts were used. Only for the immunity data, T0 was used as a covariate. The analysis of the microbiota after ANOVA was subjected to the Kruskal-Wallis test and Dunn′s post-test (P<0.05). An effect was observed for the ADC of CP and EE, with greater digestibility for the 0.2 and 0.4% YCWs. There was a linear increase in lactate for YCWs. In the AGCC analysis, the treatment with 0.8% YCW showed a higher concentration of acetate, propionate, and total SCFA when compared to 0.8% YCWs. The Coriobacteriaceae family and the Collinsella genus decreased after 30 days of consuming 0.8% YCW and 0.8% YCWs, and Collinsella intestinalis. Also decreased at T30 for 0.4% and 0.8% YCW and 0.8% YCWs, and their reduction may be related to changes in the intestinal barrier. The abundance of the genera Ruminococcus and Faecalibacterium increased by 0.2% YCWs and 0.2% YCW, respectively, after 30 days. These genera are known to produce SCFAs and maintain intestinal health. A quadratic effect was observed for IL-2 for YCW and a linear effect for YCWs, both with a reduction. IL-6 decreased with the inclusion of YCW and YCWs. Neutrophil phagocytosis increased linearly for YCW and quadratically for YCWs. Monocytes showed an increase in linear contrast for YCW and YCWs. The YCW and YCWs preparations interfered with the microbiota according to the dose, and induced modulations of both the microbiota and immunity.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPCarciofi, Aulus CavalieriGomes, Márcia de Oliveira SampaioEugênio, Débora Alberici2025-05-05info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10136/tde-23072025-094233/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPReter o conteúdo por motivos de patente, publicação e/ou direitos autoriais.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-10-09T15:51:02Zoai:teses.usp.br:tde-23072025-094233Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-10-09T15:51:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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A parede celular (PCL) de Saccharomyces cerevisiae tem efeito prebiótico que pode contribuir para a microbiota intestinal e saúde dos cães. No entanto, os estudos sobre preparações de PCL concentram-se em mananooligossacarideos insolúveis (MOS), mas faltam estudos dose-resposta de PCL analisando MOS solúvel. Este estudo avaliou os efeitos dose-resposta de dois extratos de PCL, um convencional e insolúvel (PCL) e outro com maior concentração de MOS solúvel (PCLs) sobre a coeficiente de digestibilidade aparente (CDA), produtos de fermentação, microbiota fecal e imunidade. Foi formulada uma dieta controle e desdobrada em 7 tratamentos: CON (controle); PCL (0,2, 0,4 e 0,8%); PCLs (0,2, 0,4 e 0,8%). Foram utilizados 56 cães, com oito repetições por tratamento e dois blocos. Cada bloco teve duração de 45 dias: 15 dias de washout (consumindo dieta CON), no 0º dia coleta de amostra basal para microbiota fecal, citocinas e fagocitose (T0); seguidos de 10 dias de adaptação à dieta experimental, que antecederam o período de coleta da digestibilidade e características fecais. No final de cada bloco (T30), as fezes foram coletadas para determinação de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) e ácidos graxos de cadeia ramificada (AGCC), lactato, amônia, aminas biogênicas, microbiota (gene 16S rRNA - Illumina MiSeq), sangue para análises de citocinas (Milliplex) e fagocitose. Com exceção da microbiota, os dados foram testados quanto à normalidade (teste de Shapiro-Wilk) e à homogeneidade (teste de Levene). Quando foram encontradas diferenças, foram utilizados contrastes polinomiais e ortogonais. Apenas para os dados de imunidade, o T0 foi utilizado como covariável. A análise da microbiota após ANOVA foi submetida ao teste de Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn (P<0,05). Observou-se efeito para o CDA do PB e EE, com maior digestibilidade para os PCLs 0,2 e 0,4%. Houve aumento linear do lactato para PCLs. Na análise de AGCC, o tratamento com 0,8% de PCL mostrou maior concentração de acetato, propionato e AGCC total, quando comparado com 0,8% de PCLs. A família Coriobacteriaceae e o gênero Collinsella reduziram após 30 dias do consumo de 0,8% de PCL e 0,8% de PCLs, e a Collinsella intestinalis também reduziu no T30 para 0,4% e 0,8% de PCL e 0,8% de PCLs, e a sua redução pode estar relacionada com alterações na barreira intestinal. A abundância dos gêneros Ruminococcus e Faecalibacterium aumentaram para PCLs 0,2% e PCL 0,2%, respectivamente, após 30 dias. Estes gêneros são conhecidos por produzirem AGCC e manterem a saúde intestinal. Na IL-2 foi observado efeito quadrático para PCL e linear para PCLs ambos com redução. Para a IL-6 houve diminuição com a inclusão de PCL e PCLs. Na fagocitose dos neutrófilos houve aumento linear para PCL, quadrático para PCLs. Os monócitos apresentaram aumento no contraste linear para PCL e PCLs. As preparações de PCL e PCLs interferiram na microbiota de acordo com a dose, e induziram modulações tanto da microbiota, quanto da imunidade. |
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