Investigação da modulação de células NK pelo microambiente leucêmico associado à mutação JAK2V617F

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Lopes, Izabela Aparecida
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Antitumor control; Células NK; Controle antitumoral; JAK2V617F mutation; Mutação JAK2V617F; Myeloproliferative neoplasms; Neoplasias mieloproliferativas; NK cells
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17154/tde-22012025-152814/

As células Natural Killer (NK) possuem papel central na resposta imune inata contra tumores. Na hematopoese, além de sua propriedade citotóxica, há evidências de que apresentam capacidade regulatória sobre as células-tronco hematopoéticas (CTH), reduzindo sua frequência e potencial de autorrenovação. Em neoplasias originadas de transformação neoplásica das CTH, esta regulação parece não ser eficiente. Considerando que as CTH normais podem responder aos estímulos mediados pelas células NK, é possível que deficiências funcionais contribuam para expansão de células-tronco neoplásicas e resistência à ação antileucêmica das células NK. Demonstramos previamente um comprometimento funcional de células NK no modelo murino Jak2V617F e células primárias de pacientes com neoplasias mieloproliferativas (NMPs), destacando-se o aumento da frequência de células NK imaturas e a redução da citotoxicidade da fração CD27-CD11b+ mais madura. Não se sabe se as células iniciadoras de NMPs são intrinsecamente resistentes à imunidade tumoral ou se são capazes de modificar as células NK do microambiente leucêmico, tornando-as disfuncionais. Para investigar a contribuição do microambiente leucêmico no fenótipo disfuncional de células NK, geramos um modelo murino quimérico no qual células da medula óssea de animais C56BL/6 portadores ou não da mutação Jak2V617F (Jak2VF ou Jak2WT) foram injetadas em animais selvagens subletalmente irradiados, de modo a preservar parcialmente a hematopoese do receptor. A enxertia de 40-50% foi comprovada por citometria de fluxo após quatro e oito semanas. Observamos que a exposição ao microambiente leucêmico alterou a maturação funcional, levando a um predomínio de células NK secretórias maduras (CD27+CD11b+) e citotóxicas (CD27-CD11b+). Além disso, foi observado aumento da expressão do receptor de ativação CD244 e diminuição do seu ligante CD48 no grupo de exposição à NMP. Funcionalmente, a exposição ao microambiente leucêmico induziu um aumento na morte celular específica dependente de células NK sem alterar a ativação ou degranulação, avaliadas pela frequência de CD107 e CD69, enquanto células NK derivadas da leucemia se mostraram deficientes. Dentre outras, observou-se aumento da expressão das citocinas IFNg e TNFa em células LSK do enxerto leucêmico. Sugerimos que a expressão de TNFa participe da resistência à apoptose de células tumorais e que o aumento de IFNg possa levar a um prejuízo na atividade citotóxica de células NK. Em conclusão, apesar do modelo semiablativo de transplante não levar ao fenótipo de NMP, a exposição ao microambiente leucêmico induziu alterações de frequência, maturação funcional e desbalanço de receptores NK. Tais efeitos são dependentes da carga de doença Jak2-mutada, de modo que a disfunção de ativação e degranulação das células NK foi observada apenas nas células do enxerto leucêmico. Esses achados destacam a importância das interações entre células imunes, microambiente tumoral e células-tronco leucêmicas, visando o desenvolvimento de estratégias terapêuticas que reforcem as vias de sinalização deficientes na proteção antitumoral das NMPs.