Caracterização da proteína pequena secretada rica em cisteína (CSS) como candidato a vacina contra <i>Plasmodium</i>.

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Gaitan, Xiomara Alexandra
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertacoes da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Ciências Biomédicas
• Palavras-chave em Português: antígenos; merozoíto; Malária; invasão; esporozoíto; vacinas; invasion; Malaria; merozoite; antigens; sporozoite; vaccines
• Link de acesso: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-22042026-180651/

A invasão de células hospedeiras por zoítos de Plasmodium é um processo complexo e envolve múltiplas proteínas e complexos proteicos que são alvos para o desenvolvimento de vacinas contra a malária. Em <i>P. falciparum</i>, um complexo (PCRCR) composto pelas proteínas <i>P. falciparum </i>thrombospondin-related apical merozoite protein (PTRAMP), cysteine-rich small secreted protein (PfCSS), PfRh5-interacting protein (PfRipr), cysteine-rich protective antigen (CyRPA) e reticulocyte binding protein homologue 5 (PfRh5), é essencial para a invasão de eritrócitos por merozoítos. Em <i>P. knowlesi </i>e outros plasmódios do clado não Laverania, CyRPA e Rh5 não são conservados, e um complexo trimérico (PCR) composto por PkPTRAMP, PkCSS e PkRipr foi identificado como essencial para a invasão de merozoítos. Imunoprecipitações de PbRipr de extratos de merozoítos de <i>P. berghei </i>identificaram PbPTRAMP e PbCSS, mostrando que o complexo também está presente em merozoítos de <i>P. berghei</i>. Nesta tese, usamos o modelo <i>P. berghei </i>de malária em camundongos para estudar o papel da PbCSS em estágios invasivos e como um potencial antígeno vacinal. Tentativas malsucedidas de nocaute da PbCSS indicaram que ela é essencial para a invasão de merozoítos e sugerem que o PCR é de fato um complexo de invasão presente em merozoítos de <i>Plasmodium</i>. No entanto, a vacinação de camundongos com proteínas recombinantes ou mRNA baseados na sequencia da PbCSS não os protegeu contra desafio com estágios sanguíneos de <i>P. berghei</i>. Da mesma forma, os anticorpos contra a CSS de <i>P. vivax </i>mostraram apenas uma inibição modesta da invasão de reticulócitos por <i>P. vivax in vitro</i>. Nos esporozoítos de <i>P. berghei</i>, PbPTRAMP e PbCSS são expressos, mas a PbRipr está ausente, sugerindo que o complexo PCR não é formado e levantando a questão se os esporozoítos usam essas proteínas para invasão. Confirmamos a expressão de CSS em esporozoítos de <i>P. beghei </i>e de <i>P. vivax</i>. Para estudar a função da CSS nos estágios pré-eritrocíticos, utilizamos o sistema DiCre de recombinase dependente de rapamicina para nocautear condicionalmente (cKO) a PbCSS em esporozoítos. Descobrimos que, embora os esporozoítos PbCSS-cKO apresentem invasão das glândulas salivares do mosquito e motilidade normais, eles são deficientes na invasão de hepatócitos e na infecção de camundongos. Os camundongos vacinados com mRNA baseado na sequência da PbCSS e desafiados com esporozoítos foram parcialmente protegidos, como evidenciado por um atraso de um dia na parasitemia patente. Nossos dados sugerem que a PbCSS pode ser um componente comum de diferentes complexos de invasão em merozoítos e esporozoítos, e é um alvo promissor para o desenvolvimento de vacinas que interrompam múltiplos estágios do ciclo de vida do parasita.