Descoberta e estudo de modo de ação de antivirais para Chikungunya.

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Ribeiro, Giselle Ferreira
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertacoes da USP; Universidade de São Paulo; Biotecnologia
• Palavras-chave em Português: Antivirais; Descoberta de fármacos; Triagem de alto conteúdo; vírus Chikungunya; Antivirals; Chikungunya vírus; Drug Discovery; High throughput screening
• Link de acesso: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-30042026-130402/

O vírus Chikungunya (CHIKV), transmitido pela picada de mosquitos <em>Aedes</em> infectados, pode causar infecção crônica, com fortes dores nas articulações, que duram de semanas a anos. Atualmente, não existe medicamento ou vacina aprovados e avanços no tratamento da doença são urgentes. A triagem fenotípica e o reposicionamento de medicamentos são estratégias eficazes que podem ajudar nisso. Nosso objetivo foi encontrar novos antivirais contra o CHIKV utilizando ensaio fenotípico. O ensaio de triagem primária foi realizado com uma concentração teste utilizando células de carcinoma hepatocelular humano (HUH-7) infectadas com a cepa atenuada CHIKV 181/clone25, seguida por um ensaio de confirmação que envolveu uma curva concentração-resposta e outras linhagens celulares, além do isolado CHIKV99/2016BR. As imagens foram adquiridas e avaliadas por <em>High Content Analysis</em> (HCA). Um total de 2187 compostos foram testados para CHIKV, dos quais 235 apresentaram atividade antiviral e viabilidade celular satisfatória, onde 28 apresentaram atividade antiviral na faixa micromolar, diminuindo de forma dose-dependente o efeito citopático induzido pelo CHIKV. Destes, sete compostos se destacaram com atividade anti-CHIKV seletiva. Sete compostos se destacaram por sua atividade seletiva contra o CHIKV, incluindo um antiviral, um antitumoral, um antiespasmódico, um anti-inflamatório, dois antibacterianos e um produto natural. Os valores da metade da concentração efetiva máxima (EC₅₀) e do índice de seletividade (IS) foram &le; 10 &micro;M e entre 13-74, respectivamente. Posteriormente, foram realizados estudos de modo de ação para determinar em que estágio da infecção viral os compostos exercem atividade. Os resultados dos ensaios de modo de ação mostraram atividade virucida de alguns compostos, incluindo o produto natural, e que afetou os estágios iniciais da infecção, reduzindo a replicação do vírus em concentrações de 10 &micro;M. Além disso, foi observado a liberação crescente de partículas infecciosas de CHIKV até 36 horas pós infecção de neurônios dopaminérgicos derivado de hiPSC. Nossos resultados revelam um novo composto natural com atividade anti-CHIKV e alguns compostos que poderiam ser reaproveitados como novos medicamentos antivirais anti CHIKV e fornecem novos <em>insights</em> sobre potenciais estratégias terapêuticas.