Comparação das soluções de sorbitol-manitol e Ringer lactato para irrigação artroscópica de equinos
| Ano de defesa: | 2025 |
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| Tipo de documento: | Tese |
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Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10137/tde-21012026-124242/ |
Resumo: | O objetivo do estudo foi avaliar e comparar o efeito da solução de sorbitol-manitol com o Ringer lactato na artroscopia de articulações saudáveis de equinos, por meio de testes in vitro, ex vivo e in vivo. Na fase I, in vitro, foi realizada cocultura de células derivadas de membrana sinovial e explantes de cartilagem articular (CA) de 6 articulações. A cocultura foi exposta a solução de sorbitol-manitol (SM) ou Ringer lactato (RL) durante 20 ou 50 minutos. O sobrenadante foi coletado antes e imediatamente, 24 e 48 horas após a exposição para mensuração de marcadores inflamatórios (PGE2, IL-1β, IL-6, IL-10 e TNF-α) e de degradação da CA (condroitin sulfato CS). Na fase II, ex vivo, foi realizada artroscopia nas articulações do carpo de 11 animais, sem doença sistêmica. As soluções de SM e RL foram escolhidas aleatoriamente. Amostras de CA foram coletadas no início e após 20 e 50 minutos de artroscopia para estudo histomorfológico, histoquímico e de microscopia eletrônica de varredura (MEV). Na fase III, in vivo, foram utilizados 6 cavalos experimentais e realizada artroscopia das articulações intercárpicas. As soluções de RL e SM foram determinadas aleatoriamente uma para cada membro. Amostras de membrana sinovial e CA foram coletadas no início e ao final de 50 minutos da artroscopia para estudo histológico, histoquímico e de MEV. Amostras do líquido sinovial (LS) foram coletadas imediatamente antes, 12 e 24 horas após a artroscopia, para mensurar biomarcadores inflamatórios e de degradação da CA. Imagens ultrassonográficas do carpo foram obtidas antes e 24 horas após a artroscopia. In vitro, os níveis de PGE2 elevaram significativamente no grupo RL e SM. Os níveis de CS elevaram gradual e significativamente ao longo tempo em todos os grupos. Na MEV do estudo ex vivo e in vivo, foi evidente após a artroscopia, maior delaminação, erosão e exposição das fibrilas de colágeno na superfície da CA. In vivo, as citocinas inflamatórias (PGE2, IL-1β e IL-6 e IL-10) e o CS elevaram significativamente no LS após a artroscopia em ambos os grupos, porém, maiores concentrações foram observadas no grupo RL. Na ultrassonografia alterações no LS, sinóvia e cápsula foram evidentes em ambos os grupos, mas significativas apenas no RL. A concentração de ácido hialurônico no LS aumentou estatisticamente em ambos os grupos em detrimento da redução do peso molecular modal. De modo geral, a artroscopia promove um dano articular, transitório, em articulações saudáveis de equinos, independente da solução de RL e SM. Os resultados demonstraram uma inflamação articular mais sutil e um LS de maior qualidade após a artroscopia com a solução de SM, contudo, o tempo de estudo não permite validar a superioridade de nenhum dos fluidos. Mais além, os achados sugerem que a solução de SM é segura para a irrigação artroscópica e mais estudos devem ser realizados para validar seu emprego em articulações com osteoartrite. |
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Comparação das soluções de sorbitol-manitol e Ringer lactato para irrigação artroscópica de equinosComparison of sorbitol-manitol and Ringer-lactate solutions for equine arthroscopic joint irrigationArthroscopyArticular cartilageArtroscopiaCartilagem articularCavalosFluidFluidoHorsesOsteoarthritisOsteoartriteO objetivo do estudo foi avaliar e comparar o efeito da solução de sorbitol-manitol com o Ringer lactato na artroscopia de articulações saudáveis de equinos, por meio de testes in vitro, ex vivo e in vivo. Na fase I, in vitro, foi realizada cocultura de células derivadas de membrana sinovial e explantes de cartilagem articular (CA) de 6 articulações. A cocultura foi exposta a solução de sorbitol-manitol (SM) ou Ringer lactato (RL) durante 20 ou 50 minutos. O sobrenadante foi coletado antes e imediatamente, 24 e 48 horas após a exposição para mensuração de marcadores inflamatórios (PGE2, IL-1β, IL-6, IL-10 e TNF-α) e de degradação da CA (condroitin sulfato CS). Na fase II, ex vivo, foi realizada artroscopia nas articulações do carpo de 11 animais, sem doença sistêmica. As soluções de SM e RL foram escolhidas aleatoriamente. Amostras de CA foram coletadas no início e após 20 e 50 minutos de artroscopia para estudo histomorfológico, histoquímico e de microscopia eletrônica de varredura (MEV). Na fase III, in vivo, foram utilizados 6 cavalos experimentais e realizada artroscopia das articulações intercárpicas. As soluções de RL e SM foram determinadas aleatoriamente uma para cada membro. Amostras de membrana sinovial e CA foram coletadas no início e ao final de 50 minutos da artroscopia para estudo histológico, histoquímico e de MEV. Amostras do líquido sinovial (LS) foram coletadas imediatamente antes, 12 e 24 horas após a artroscopia, para mensurar biomarcadores inflamatórios e de degradação da CA. Imagens ultrassonográficas do carpo foram obtidas antes e 24 horas após a artroscopia. In vitro, os níveis de PGE2 elevaram significativamente no grupo RL e SM. Os níveis de CS elevaram gradual e significativamente ao longo tempo em todos os grupos. Na MEV do estudo ex vivo e in vivo, foi evidente após a artroscopia, maior delaminação, erosão e exposição das fibrilas de colágeno na superfície da CA. In vivo, as citocinas inflamatórias (PGE2, IL-1β e IL-6 e IL-10) e o CS elevaram significativamente no LS após a artroscopia em ambos os grupos, porém, maiores concentrações foram observadas no grupo RL. Na ultrassonografia alterações no LS, sinóvia e cápsula foram evidentes em ambos os grupos, mas significativas apenas no RL. A concentração de ácido hialurônico no LS aumentou estatisticamente em ambos os grupos em detrimento da redução do peso molecular modal. De modo geral, a artroscopia promove um dano articular, transitório, em articulações saudáveis de equinos, independente da solução de RL e SM. Os resultados demonstraram uma inflamação articular mais sutil e um LS de maior qualidade após a artroscopia com a solução de SM, contudo, o tempo de estudo não permite validar a superioridade de nenhum dos fluidos. Mais além, os achados sugerem que a solução de SM é segura para a irrigação artroscópica e mais estudos devem ser realizados para validar seu emprego em articulações com osteoartrite.The aim of this study was to evaluate and compare the effects of a sorbitol-mannitol solution with Ringer′s lactate in the arthroscopy of healthy equine joints, using in vitro, ex vivo, and in vivo tests. In phase I, in vitro, co-culture of synovial membrane-derived cells and articular cartilage (AC) explants from six joints was performed. The co-culture was exposed to sorbitol- mannitol (SM) or Ringer′s lactate (RL) solution for 20 or 50 minutes. The supernatant was collected before exposure, and immediately, 24, and 48 hours after exposure, to measure inflammatory markers (PGE2, IL-1β, IL-6, IL-10, and TNF-α) and AC degradation (chondroitin sulfate CS). In phase II, ex vivo, arthroscopy was performed on the carpal joints of 11 animals without systemic disease. The SM and RL solutions were randomly assigned. AC samples were collected at baseline and after 20 and 50 minutes of arthroscopy for histomorphological, histochemical, and scanning electron microscopy (SEM) analysis. In Phase III, in vivo, six experimental horses were used, and arthroscopy of the intercarpal joints was performed. The RL and SM solutions were randomly determined, one for each limb. Synovial membrane and AC samples were collected at baseline and at the end of 50 minutes of arthroscopy for histological, histochemical, and SEM studies. Synovial fluid (SF) samples were collected immediately before, 12, and 24 hours after arthroscopy to measure inflammatory biomarkers and AC degradation. Ultrasound images of the carpus were obtained before and 24 hours after arthroscopy. In vitro, PGE2 levels increased significantly in the RL and SM groups. CS levels increased gradually and significantly over time in all groups. In the ex vivo and in vivo studies, SEM revealed increased delamination, erosion, and exposure of collagen fibrils on the surface of the AC after arthroscopy. In vivo, inflammatory cytokines (PGE2, IL-1β, IL-6, and IL-10) and CS levels increased significantly in the SL after arthroscopy in both groups; however, higher concentrations were observed in the RL group. Ultrasound changes in the SL, synovium, and capsule were evident in both groups, but significant only in the RL. The concentration of hyaluronic acid in the SF increased significantly in both groups, accompanied by a reduction in modal molecular weight. Overall, arthroscopy induces transient joint damage in healthy equine joints, regardless of whether RL or SM solution is used. The results demonstrated milder joint inflammation and higher-quality LS after arthroscopy with the SM solution; however, the study time does not allow us to validate the superiority of either fluid. Furthermore, the findings suggest that the SM solution is safe for arthroscopic irrigation, and further studies are needed to validate its use in osteoarthritic joints.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPSilva, Luis Claudio Lopes Correia daYamada, Ana Lucia MiluzziCota, Letícia de Oliveira2025-09-18info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10137/tde-21012026-124242/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2026-03-18T14:30:02Zoai:teses.usp.br:tde-21012026-124242Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212026-03-18T14:30:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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