Investigação do papel de Leishmania amazonensis e Leishmania braziliensis na reprogramação metabólica em macrófagos murinos infectados

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Oliveira, Elaine Carvalho de
• Orientador(a): Brodskyn, Claudia Ida
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://arca.fiocruz.br/handle/icict/50175
• topic: Fosforilação oxidativa; Glicólise; Leishmania spp; Metabolismo Mitocondrial; Modulação metabólica; Oxidative phosphorylation; Glycolysis; Leishmania spp; Mitochondrial Metabolism; Fosforilação Oxidativa; Glicolise; Leishmania

INTRODUÇÃO: A leishmaniose é causada por protozoários de diversas espécies do gênero Leishmania que parasitam mamíferos, utilizando o flebotomíneo como vetor de transmissão. Evidências indicam que Leishmania spp. têm a capacidade de modular o metabolismo de macrófagos durante sua infecção, o que resulta na interferência em etapas importantes da respiração celular. OBJETIVO: Assim, o objetivo deste estudo consiste na avaliação do perfil metabólico em macrófagos murinos infectados por L. amazonensis e L. braziliensis. MATERIAL E MÉTODOS: Precursores hematopoiéticos de macrófagos foram obtidos da medula óssea de camundongos C57BL/6 e cultivados até sua diferenciação em macrófagos. Os macrófagos foram infectados com Leishmania spp. e as taxas de acidificação extracelular (ECAR) e consumo de oxigênio (OCR), foram mensuradas através do Seahorse. Posteriormente, foi avaliada a carga parasitária e a taxa de infecção, mediante o tratamento prévio dos BMDMs com os inibidores da via glicolítica, fosforilação oxidativa e síntese de ácidos graxos. Além disso, a funcionalidade das mitocôndrias foi avaliada através de sondas \201CMitoTrackers\201D, aferindo a massa mitocondrial e o potencial de membrana. A produção de espécies reativas de oxigênio foi mensurada através da sonda \201CCellrox\201D. Os dados obtidos foram então submetidos à análise estatística, e os valores foram considerados significativos quando p \2264 0,05. RESULTADOS: Este estudo mostra que os BMDMs infectados por L. amazonensis e L.braziliensis exibem um perfil glicolítico e possuem um aumento no consumo de oxigênio. BMDMs tratados com inibidores que atuam no metabolismo mitocondrial apresentaram diminuição na carga parasitária e taxa de infecção, mostrando a importância do metabolismo mitocondrial para a sobrevivência do parasito. Além disso, interferências no metabolismo dos macrófagos estão relacionadas com o aumento do estresse oxidativo, aumentando a produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) que ajudam na eliminação do parasito. CONCLUSÃO: Este estudo demonstra que a infecção por L. amazonensis e L.braziliensis interfere no metabolismo mitocondrial do hospedeiro, ficando evidente que na presença do parasito ocorre um aumento nas taxas de glicólise para alimentar a fosforilação oxidativa. Esse trabalho destaca o potencial do metabolismo mitocondrial dos macrófagos como alvo terapêutico para modular a infecção por Leishmania.